МУК 4.1.1553-03

    
    
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

    
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
по измерению концентрации монофосфорного эфира 4-метил-5--оксиэтил-N-(2'-метил-4'-амино-5'-метилпиримидил)-тиазолия
монофосфата (фосфотиамина) в воздухе рабочей зоны
методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

    
    
Дата введения: с момента утверждения

    
    
    УТВЕРЖДЕНЫ Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г.Онищенко 29 июня 2003 г.
    
    

         
    Фоcфотиамин - Монофосфорный эфир 4-метил-5--оксиэтил-N-(2-метил-4-aмино-5-мeтилпиримидил) тиaзолия фосфат - белый кристаллический порошок со слабым запахом. Легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 95% и хлороформе.
    
    В воздухе находится в виде аэрозоля и паров.
    
    Обладает общетоксическим действием.
    
    ОБУВ в воздухе 0,1 мг/м.
    

Характеристика метода

    
    Методика основана на применении высокоэффективной жидкостной хроматографии с использованием УФ-детектора.
    
    Отбор проб проводится с концентрированием на фильтр и в метанол.
    
    Нижний предел измерения в хроматографируемом объеме (10 мкл) - 0,025 мкг.
    
    Нижний предел измерения в воздухе 0,05 мкг/м (при отборе 10 л воздуха).
    
    Диапазон измеряемых концентраций вещества в воздухе от 0,05 до 0,6 мг/м.
    
    Суммарная погрешность измерения не превышает ±20%.
    
    Время выполнения измерения, включая отбор проб, 1,5 час.
    

Приборы, аппаратура, посуда

    
    Микроколоночный жидкостной хроматограф Милихром или другой модели с УФ-детектором.
    
    Хроматографическая колонка длиной 64 мм, внутренним диаметром 2 мм, заполненная сорбентом Силасорб С.
    
    Весы аналитические BЛP-200, ГОСТ 24104-88 E.
    
    Аспирационное устройство, ГОСТ 17.2.6.01-86*.
_______________
    * На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 51945-2002. - Примечание изготовителя базы данных.
         
    Стаканы химические вместимостью 25 мл, ГОСТ 25336-82.
    
    Вакуумная установка или роторный испаритель ИР-1, ТУ 25-11-9177.
    
    Колбы мерные вместимостью 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74Е.
    
    Пипетки вместимостью 1, 2, 5, 10 мл, ГОСТ 29227-91.
    
    Колбы грушевидные, вместимостью 25 мл, ГОСТ 19908-90.
    
    Пробирки мерные, вместимостью 10 мл, ГОСТ 1770-74Е.
    
    Поглотительные сосуды с пористой пластинкой. ТУ 25-11-1136-75
    
    Воронка фильтрующая.
    
    Лупа изнурительная ЛИ-3-10Х, ГОСТ 8309-75.
    

Реактивы, растворы, материалы

    
    Фосфотиамин с содержанием не менее 90% ФС 42-2331-85 Россия.
    
    Спирт метиловый, ГОСТ 6995-77, 50% раствор.
    
    Кислота о-фосфорная, ГОСТ 6552-80.
    
    Элюент: к 100 мл 50% спирта метилового добавляют около 0,2 мл о-фосфорной кислоты до рН 2,4.
    
    Стандартный раствор N 1 с концентрацией 1000 мкг/мл фосфотиамина готовят растворением 0,1100 г вещества в спирте метиловом 50% в мерной колбе вместимостью 100 мл.
    
    Раствор устойчив в течение 2 недель при хранении в холодильнике.
    
    Стандартный раствор N 2 с концентрацией 100,0 мкг/мл фосфотиамина готовят из стандартного раствора N 1 соответствующим разбавлением спиртом метиловым 50% в мерной колбе вместимостью 50 мл.
    
    Градуировочные растворы с концентрацией 2,5-5-10-15-20-30 мкг/мл фосфотиамина готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 2 спиртом метиловым 50%.
    
    Растворы применяют свежеприготовленными.
    
    Фильтры АФА-ХА-10, ТУ 85-743-80.
    

Отбор пробы воздуха

    
    Воздух с объемом расходом 1 л/мин аспирируют через фильтр АФА-ХА-10 и поглотительный сосуд с 5 мл 50% метанола. Отбор проб производят с охлаждением. Для измерения 0,5ОБУВ следует отобрать 10 л воздуха. Срок хранения отобранных проб одни сутки в холодильнике.
    
    

Подготовка к измерению

    
    Инжектируют в хроматограф от 0,025 до 0,3 мкг фосфотиамина из градуировочных растворов при максимальном объеме вводимой пробы 10 мкл.
    
    Хроматографическая колонка промышленного изготовления.
    
    Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:
    

    
    На полученной хроматограмме измеряют площади пиков и строят градуировочную кривую, выражающую зависимость площади пиков (мм) от содержания вещества в хроматографируемом объеме пробы (мкг).
    
    Построение градуировочного графика необходимо проводить  не менее чем по 5 точкам, выполняя 6 параллельных измерений для каждого раствора. Проверку градуировочного графика следует проводить при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в месяц.
    
    

Проведение измерения

    
    Фильтр и содержимое поглотительного сосуда помещают в колориметрическую пробирку и доводят объем до 5 мл 50% метанола. Оставляют  на 10-15 мин, периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения вещества. Затем фильтр отжимают и удаляют. Степень десорбции с фильтра 96%. Полученный раствор сливают в грушевидную колбу и упаривают досуха под вакуумом при температуре 50-60 °С. Сухой остаток растворяют в 0,2 мл спирта метилового 50%, подкисленного кислотой о-фосфорной до  рН 2,4.
    
    Параллельно с анализом проб проводят хроматографирование раствора, полученного обработкой чистого фильтра.
    
    Хроматографирование анализируемого раствора проводят в тех же условиях, что и при построении градуировочного графика.
    
    Количественное определение фосфотиамина (мкг) проводят по предварительно построенному градуировочному графику.
    
    

Расчет концентрации

    
    Концентрацию фосфотиамина в воздухе "" (мг/м) вычисляют по формуле:
    

,

    
где - содержание вещества в хроматографируемом объеме пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;

     - общий объем раствора пробы, мл;
    
     - объем раствора пробы, взятый для хроматографирования, мл;
    
     - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям, л (см. Приложение 1).