МУК 4.1.1234-03
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Определение остаточных количеств Фенамидона
и его метаболитов (RPA 405862 и RPA 408056)
в воде, почве, картофеле, томатах, луке и огурцах
методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
Дата введения 2003-07-01
УТВЕРЖДЕНЫ Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации Г.Г.Онищенко 16 марта 2003 г.
1. Вводная часть
Фирма-производитель: Байер КропСайенс (Германия).
Торговое название: Сектин (Секур).
Действующее вещество: фенамидон (RPA 407213).
(S)-5-метил-2-метилтио-5-фенил-3-фениламино-3,5-дигидроимидазол-4-он (ИЮПАК).
Структурная формула:
|
Эмпирическая формула: C |
М. м.: 311 |
H
N
OS
Белый хлопьевидный порошок без запаха.
Температура плавления 137 °С.
Давление паров при 25 °С: 3,4х10
Па.
Коэффициент распределения н-октанол/вода: 
=2,8.
Растворимость (г/л) при 20 °С: ацетон - 250, дихлорметан - 330, ацетонитрил - 86, толуол - 40, метанол - 43, вода - 0,008.
Стабильность к гидролизу: 
=более 1 месяца при рН 5-7 и 22 дня при рН 9.
Краткая токсикологическая характеристика. Острая пероральная токсичность (
) для крыс - более 5000 мг/кг; острая дермальная токсичность (
) для крыс - более 2000 мг/кг; острая ингаляционная токсичность (
) для крыс - более 2,1 мг/дм
воздуха. Фенамидон не оказывает раздражающего действия на слизистые оболочки глаз и кожу кроликов. 
для рыб - 0,74 мг/л (96 ч).
Препарат малотоксичен для пчел, птиц, зеленых водорослей, дафний, дождевых червей и почвенных микроорганизмов.
Гигиенические нормативы:
ПДК (с учетом метаболита) в воде водоемов - 0,003 мг/дм
;
ОДК (с учетом метаболита) в почве - 0,09 мг/кг;
МДУ (с учетом метаболита) в томатах - 0,5 мг/кг; картофеле - 0,03 мг/кг.
Основной метаболит фенамидона в воде и растениях: RPA 405862.
5-метил-5-фенил-3-фениламиноимидазолидин-2,4-дион (ИЮПАК).
Структурная формула:
|
Эмпирическая формула: C |
М. м.: 281 |
H
N
O
Белый порошок без запаха.
Другие физико-химические и токсикологические характеристики метаболита RPA 405862 отсутствуют.
Основной метаболит фенамидона в почве: RPA 408056.
5-метил-2-метилтио-5-фенил-3,5-дигидроимидазол-4-он (ИЮПАК).
Структурная формула:
|
Эмпирическая формула: C |
М. м.: 220 |
H
N
OS
Белый порошок без запаха.
Другие физико-химические и токсикологические характеристики метаболита RPA 408056 отсутствуют.
Область применения препарата. Фенамидон - специфический системный фунгицид широкого спектра действия, обладает защитными и искореняющими свойствами. Высокоэффективен против возбудителей фитофтороза картофеля и томатов, ложной мучнистой росы подсолнечника, огурцов и лука, мильдью винограда. Обычно применяется в смеси с препаратами контактного действия. В настоящее время в России и странах СНГ проходит регистрационные испытания смесевой препарат Сектин, ВДГ (100 г фенамидона + 500 г манкоцеба в 1 кг препарата) при норме расхода фунгицида 1,25 кг/га и 4-кратной обработке за сезон. Механизм действия фенамидона связан с подавлением транспорта электронов и образования АТФ в митохондриях патогенов.
Фенамидон весьма лабильное соединение и достаточно быстро метаболизируется в растениях и объектах окружающей среды. В воде и растениях фенамидон разрушается с образованием 5-метил-5-фенил-3-фениламиноимидазолидин-2,4-диона (RPA 405862), а в почве он метаболизируется до 5-метил-2-метилтио-5-фенил-3,5-дигидроимидазол-4-она (RPA 408056).
2. Методика определения остаточных количеств Фенамидона и его метаболитов
(RPA 405862 и RPA 408056) в воде, почве, картофеле, томатах, луке и огурцах
методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
2. 1. Основные положения
2.1.1. Принцип методики
Методика основана на определении фенамидона и его метаболитов (RPA 405862 и RPA 408056) с помощью обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с ультрафиолетовым детектором после извлечения фунгицида и RPA 405862 из воды соответственно гексаном и хлористым метиленом, фенамидона и метаболитов из почвы и растительного материала водным ацетоном, очистки экстрактов перераспределением в системе несмешивающихся растворителей, а также на колонке с оксидом алюминия и концентрирующем патроне Диапак-диол.
Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.
2.1.2. Избирательность метода
В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии пестицидов, применяемых в интенсивной технологии выращивания картофеля, томатов, огурцов и лука.
2.1.3. Метрологическая характеристика метода
Таблица
Метрологические параметры метода
|
Метрологические параметры, | ||||||
|
Анализи- руемый объект |
предел обнаружения, мг/дм |
диапазон определяемых концентраций, мг/дм |
среднее значение определения, % |
стандартное отклонение, S,% |
относительное отклонение, % |
довери- тельный интервал среднего, % |
|
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
|
Фенамидон | ||||||
|
Вода |
0,0005 |
0,0005-0,005 |
86,8 |
4,3 |
1,9 |
±4,0 |
|
Почва |
0,01 |
0,01-0,1 |
83,9 |
5,7 |
2,5 |
±5,3 |
|
Картофель |
0,02 |
0,02-0,2 |
88,7 |
4,1 |
1,8 |
±3,8 |
|
Томаты |
0,02 |
0,02-0,2 |
90,2 |
4,3 |
1,9 |
±4,1 |
|
Лук |
0,02 |
0,02-0,2 |
90,6 |
2,7 |
1,2 |
±2,8 |
|
Огурцы |
0,02 |
0,02-0,2 |
86,5 |
5,6 |
2,5 |
±5,3 |
|
Метаболит RPA 405862 | ||||||
|
Вода |
0,0005 |
0,0005-0,005 |
85,8 |
5,4 |
2,4 |
±5,0 |
|
Картофель |
0,02 |
0,02-0,2 |
89,2 |
4,5 |
2,0 |
±4,2 |
|
Томаты |
0,02 |
0,02-0,2 |
89,1 |
5,9 |
2,7 |
±5,5 |
|
Лук |
0,02 |
0,02-0,2 |
85,6 |
2,9 |
1,3 |
±2,9 |
|
Огурцы |
0,02 |
0,02-0,2 |
91,1 |
4,0 |
1,8 |
±4,1 |
|
Метаболит RPA 408056 | ||||||
|
Почва |
0,02 |
0,02-0,2 |
78,9 |
5,5 |
2,4 |
±5,1 |
=0,95, 
=20
2.2. Реактивы, растворы и материалы
_______________
* Соответствует оригиналу. - Примечание .
2.4. Отбор проб
Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.79).
Отобранные пробы почвы, клубней картофеля, плодов томата и огурца и лука хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике не более суток. Для длительного хранения пробы почвы доводят до воздушно-сухого состояния и хранят в холодильнике при температуре не выше 4 °С в течение 3 месяцев; растительные образцы хранят до анализа в морозильной камере при температуре -18 °С. Пробы воды хранят при температуре не выше 4 °С в течение 2 дней, при температуре -18 °С в течение месяца.
Перед анализом сухую почву просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм, а растительный материал измельчают.
2.5. Подготовка к определению
2.5.1. Подготовка и очистка реактивов и растворителей
Органические растворители перед началом работы очищают, сушат и перегоняют в соответствии с типовыми методиками. Гексан и хлористый метилен встряхивают с небольшими порциями концентрированной серной кислоты до тех пор, пока свежая порция кислоты не перестанет окрашиваться. Затем растворители последовательно промывают водой, 2%-ным раствором гидроксида натрия и снова водой, после чего сушат над гидроксидом натрия и перегоняют.
Ацетон перегоняют над перманганатом калия и поташом (на 1 л ацетона 10 г KMnO
и 2 г K
CO
).
Ацетонитрил сушат над пентоксидом фосфора и перегоняют; отогнанный растворитель повторно перегоняют над углекислым калием.
Оксид алюминия V степени активности по Брокману получают добавлением 12% воды к навеске оксида алюминия II степени активности.
2.5.2. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ
При подготовке подвижной фазы N 1 для анализа фенамидона отмеряют 630 мл ацетонитрила, переносят в мерную колбу емкостью 1000 мл, добавляют 370 мл бидистиллированной воды, перемешивают, фильтруют и дегазируют.
При подготовке подвижной фазы N 2 для анализа метаболита RPA 405862 отмеряют 550 мл ацетонитрила, переносят в мерную колбу емкостью 1000 мл, добавляют 450 мл бидистиллированной воды, перемешивают, фильтруют и дегазируют.
При подготовке подвижной фазы N 3 для анализа метаболита RPA 408056 отмеряют 300 мл ацетонитрила, переносят в мерную колбу емкостью 1000 мл, добавляют 700 мл бидистиллированной воды, перемешивают, фильтруют и дегазируют.
2.5.3. Кондиционирование колонки
Промыть колонку для ВЭЖХ смесью ацетонитрил-вода (63:37, по объему для фенамидона; 55:45, по объему для RPA 405862; 30:70, по объему для RPA 408056) в течение 30 мин при скорости подачи растворителя 1 мл/мин. Включить детектор и подождать стабилизации базовой линии (5-15 мин).
2.5.4. Приготовление стандартных растворов
Основной стандартный раствор фенамидона с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 0,010 г вещества, содержащего 99,5% д.в., в ацетонитриле в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранят в холодильнике не более месяца.
Рабочие стандартные растворы с концентрациями 0,04; 0,08; 0,2 и 0,4 мкг/мл готовят из основного стандартного раствора фенамидона соответствующим последовательным разведением подвижной фазой N 1 для ВЭЖХ (п.2.5.2). Рабочие растворы хранят в холодильнике при температуре не выше 4 °С не более 7 дней.
Основной стандартный раствор метаболита RPA 405862 с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 0,010 г вещества, содержащего 99,3% д.в., в ацетонитриле в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранят в холодильнике не более месяца.
Рабочие стандартные растворы с концентрациями 0,04; 0,08; 0,2 и 0,4 мкг/мл готовят из основного стандартного раствора метаболита RPA 405862 соответствующим последовательным разведением подвижной фазой N 2 для ВЭЖХ (п.2.5.2). Рабочие растворы хранят в холодильнике при температуре не выше 4 °С не более 7 дней.
Основной стандартный раствор метаболита RPA 408056 с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 0,010 г вещества, содержащего 99,6% д.в., в ацетонитриле в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранят в холодильнике не более месяца.
Рабочие стандартные растворы с концентрациями 0,04; 0,08; 0,2 и 0,4 мкг/мл готовят из основного стандартного раствора метаболита RPA 408056 соответствующим последовательным разведением подвижной фазой N 3 для ВЭЖХ (п.2.5.2). Рабочие растворы хранят в холодильнике при температуре не выше 4 °С не более 7 дней.
2.5.5. Построение калибровочного графика
Для построения калибровочного графика в инжектор хроматографа вводят по 50 мкл рабочего стандартного раствора фенамидона или метаболитов с концентрациями 0,04; 0,08; 0,2 и 0,4 мкг/мл. Осуществляют не менее 5 параллельных измерений и находят среднее значение высоты хроматографического пика для каждой концентрации. Строят калибровочный график зависимости высоты хроматографического пика в мм от концентрации вещества в растворе в мкг/мл.
2.5.6. Подготовка колонки с оксидом алюминия и концентрирующего патрона Диапак-диол
для очистки экстракта
В нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см и внутренним диаметром 1,8 см вставляют тампон из стекловаты, закрывают кран и приливают около 10 мл гексана. Затем в колонку вносят суспензию 10 г оксида алюминия V степени активности по Брокману в 20 мл гексана. Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента и помещают на него слой безводного сульфата натрия высотой 1 см. Колонку промывают 20 мл гексана со скоростью 1-2 капли в секунду, после чего она готова к работе.
Концентрирующий патрон Диапак-диол промывают сначала с помощью медицинского шприца 10 мл хлористого метилена, а затем 5 мл смеси гексан-хлористый метилен (9:1) при анализе фенамидона или 5 мл смеси гексан-хлористый метилен (6:4) при анализе RPA 405862 со скоростью 5 мл/мин.
2.5.7. Проверка хроматографического поведения фенамидона на колонке с оксидом алюминия
В круглодонную колбу емкостью 10 мл отбирают 0,1 мл стандартного раствора фенамидона с концентрацией 10 мкг/мл. Отдувают растворитель током теплого воздуха, остаток растворяют в 3 мл гексана и раствор наносят на хроматографическую колонку (п.2.5.6). Промывают колонку 50 мл гексана и затем 60 мл смеси гексан-хлористый метилен (9:1, по объему) со скоростью 1-2 капли в секунду. Отбирают фракции по 10 мл каждая, упаривают, остаток растворяют в 1 мл подвижной фазы N 1 для ВЭЖХ (п.2.5.2) и анализируют на содержание фенамидона по п.2.7.1.
Фракции, содержащие фенамидон, объединяют, упаривают досуха, остаток растворяют в 2,5 мл подвижной фазы N 1 для ВЭЖХ и вновь анализируют по п.2.7.1. Рассчитывают содержание фенамидона в элюате, определяют полноту вымывания вещества из колонки и необходимый для очистки экстракта объем элюента.
Аналогичным образом проводится проверка хроматографического поведения метаболитов RPA 405862 и RPA 408056 на колонке с оксидом алюминия.
Примечание. Профиль вымывания фенамидона и метаболитов может меняться при использовании новой партии сорбента и растворителей.
2.6. Описание определения
2.6.1. Экстракция фенамидона и его метаболитов
2.6.1.1. Вода. 200 мл предварительно отфильтрованной воды помещают в делительную воронку емкостью 500 мл и трижды экстрагируют гексаном порциями по 30 мл при энергичном встряхивании в течение 1 мин. Объединенную органическую фазу пропускают через слой безводного сульфата натрия и упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 30 °С. Сухой остаток растворяют в 2,5 мл подвижной фазы N 1 для ВЭЖХ (п.2.5.2) и анализируют на содержание фенамидона по п.2.7.1.
Водную фазу, оставшуюся после экстракции гексаном, трижды экстрагируют хлористым метиленом (30+20+20 мл) при встряхивании. Объединенную органическую фазу пропускают через слой безводного сульфата натрия и упаривают на роторном испарителе досуха при температуре 30 °С. Сухой остаток растворяют в 2,5 мл подвижной фазы N 2 для ВЭЖХ (п.2.5.2) и анализируют на содержание метаболита RPA 405862 по п.2.7.2.
2.6.1.2. Почва. Навеску (50 г) воздушно-сухой почвы помещают в коническую колбу на 500 мл, приливают 40 мл бидистиллированной воды и спустя 20 мин 160 мл ацетона и суспензию перемешивают в течение 30 мин на аппарате для встряхивания. Суспензию фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр. Почву повторно экстрагируют 200 мл 80%-ного водного ацетона в течение 30 мин и суспензию фильтруют. Из объединенного экстракта отбирают аликвоту раствора (около 35 мл), эквивалентную 5 г почвы. Дальнейшую очистку экстракта проводят по п.2.6.2.
2.6.1.3. Клубни картофеля, плоды томата и огурца, лук. К навеске (25 г) измельченного растительного материала приливают 100 мл смеси ацетон-вода (80:20, по объему) и гомогенизируют 5 мин при 10000 об./мин. Суспензию фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр в колбу на 250 мл. Остаток на фильтре промывают 50 мл смеси ацетон-вода (80:20, по объему). Из объединенного экстракта отбирают аликвоту раствора (около 30 мл), эквивалентную соответственно 5 г ткани. Дальнейшую очистку экстракта проводят по п.2.6.2.
2.6.2. Очистка экстракта
Аликвоту почвенного (из п.2.6.1.2) или растительного (из п.2.6.1.3) экстракта упаривают до водной фазы на роторном испарителе при температуре 40 °С. Водный остаток переносят в делительную воронку емкостью 100 мл, приливают 20 мл бидистиллированной воды и 30 мл гексана и воронку встряхивают в течение 1 мин. После разделения слоев отделяют гексановую фракцию, а водную фазу экстрагируют гексаном еще дважды (20+20 мл). Объединенный гексановый экстракт, содержащий фенамидон, пропускают через стеклянный фильтр, заполненный безводным сульфатом натрия, и затем упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 30 °С. Дальнейшую очистку экстракта проводят по п.2.6.3.
Водную фазу, оставшуюся после экстракции гексаном, трижды экстрагируют хлористым метиленом (30+20+20 мл) при встряхивании. Объединенный дихлорметановый экстракт, содержащий метаболиты фенамидона, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают на роторном испарителе досуха при температуре 30 °С. Дальнейшую очистку экстракта проводят по п.2.6.3.
2.6.3. Очистка на колонке с оксидом алюминия
Остаток в колбе, полученный при упаривании очищенных по п.2.6.2 гексановых экстрактов растительного материала или почвы, содержащих фенамидон, количественно переносят тремя 1-мл порциями гексана в кондиционированную хроматографическую колонку (п.2.5.6). Промывают колонку 50 мл гексана, которые отбрасывают. Фенамидон элюируют 50 мл смеси гексан-хлористый метилен (9:1, по объему), отбрасывая первые 15 мл элюата и собирая последующие 35 мл. Раствор упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 30 °С. Сухие остатки экстрактов клубней картофеля и плодов томата растворяют в 2,5 мл, а экстракта почвы - в 1,25 мл подвижной фазы N 1 для ВЭЖХ (п.2.5.2) и анализируют на содержание фенамидона по п.2.7.1. Сухие остатки экстрактов плодов огурца и лука дополнительно очищают на концентрирующем патроне Диапак-диол по п.2.6.4.
Остаток в колбе, полученный при упаривании очищенных по п.2.6.2 дихлорметановых экстрактов растительного материала, содержащих метаболит RPA 405862, количественно переносят тремя 1-мл порциями смеси гексан-хлористый метилен (6:4, по объему) в кондиционированную хроматографическую колонку (п.2.5.6). Промывают колонку 50 мл смеси гексан-хлористый метилен (6:4, по объему), которые отбрасывают. Метаболит элюируют 30 мл смеси гексан-хлористый метилен (1:1, по объему). Раствор упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 30 °С. Сухие остатки экстрактов клубней картофеля и плодов томата растворяют в 2,5 мл подвижной фазы N 2 для ВЭЖХ (п.2.5.2) и анализируют на содержание метаболита RPA 405862 по п.2.7.2. Сухие остатки экстрактов плодов огурца и лука дополнительно очищают на концентрирующем патроне Диапак-диол по п.2.6.4.
Остаток в колбе, полученный при упаривании очищенного по п.2.6.2 дихлорметанового экстракта почвы, содержащего метаболит RPA 408056, количественно переносят тремя 1-мл порциями смеси гексан-хлористый метилен (7:3, по объему) в кондиционированную хроматографическую колонку (п.2.5.6). Колонку промывают 50 мл смеси гексан-хлористый метилен (6:4, по объему), которые отбрасывают. Метаболит элюируют 30 мл смеси гексан-хлористый метилен (1:1, по объему), отбрасывая первые 5 мл элюата и собирая последующие 25 мл. Раствор упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 30 °С. Сухой остаток растворяют в 2,5 мл подвижной фазы N 3 для ВЭЖХ (п.2.5.2) и анализируют на содержание метаболита RPA 408056 по п.2.7.3.
2.6.4. Очистка на концентрирующем патроне Диапак-диол
Сухой остаток экстракта плодов огурца или лука (из п.2.6.3), содержащий фенамидон, количественно переносят двумя 1-мл порциями смеси гексан-хлористый метилен (9:1, по объему) в подготовленный концентрирующий патрон Диапак-диол (п.2.5.6). Патрон промывают 10 мл смеси гексан-хлористый метилен (1:1, по объему) со скоростью 5 мл/мин, которые отбрасывают. Фенамидон элюируют 12 мл смеси гексан-хлористый метилен (1:9, по объему). Элюат упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 30 °С. Сухой остаток растворяют в 2,5 мл подвижной фазы N 1 для ВЭЖХ (п.2.5.2) и анализируют на содержание фенамидона по п.2.7.1.
Сухой остаток экстракта плодов огурца или лука (из п.2.6.3), содержащий метаболит RPA 405862, количественно переносят двумя 1-мл порциями смеси гексан-хлористый метилен (6:4, по объему) в подготовленный концентрирующий патрон Диапак-диол (п.2.5.6). Патрон промывают 10 мл смеси гексан-хлористый метилен (4:6, по объему) со скоростью 5 мл/мин, которые отбрасывают. Метаболит RPA 405862 элюируют 8 мл смеси гексан-хлористый метилен (3:7, по объему) со скоростью 5 мл/мин. Элюат упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 30 °С. Сухой остаток растворяют в 2,5 мл подвижной фазы N 2 для ВЭЖХ (п.2.5.2) и анализируют на содержание метаболита по п.2.7.2.
2.7. Условия хроматографирования
2.7.1. Фенамидон
Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором Altex (США) или аналогичный.
Колонка стальная, длиной 15 см, внутренним диаметром 4 мм, содержащая Kromasil 100А-С18, зернением 5 мкм.
Температура колонки: комнатная.
Подвижная фаза: ацетонитрил-вода (63:37, по объему).
Скорость потока элюента: 0,6 мл/мин.
Рабочая длина волны: 240 нм.
Чувствительность: 0,02 ед. абсорбции на шкалу.
Объем вводимой пробы: 50 мкл.
Скорость протяжки ленты самописца: 15 см/ч.
Время удерживания фенамидона: около 6 мин.
Линейный диапазон детектирования: 2-20 нг.
Альтернативная неподвижная фаза: Диасорб 130-С16 Т.
Подвижная фаза: ацетонитрил-вода (70:30, по объему).
Скорость потока элюента: 0,7 мл/мин.
Время удерживания фенамидона: 4 мин.
2.7.2. Метаболит RPA 405862
Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором Altex (США).
Колонка стальная, длиной 15 см, внутренним диаметром 4 мм, содержащая Kromasil 100A-C18, зернением 5 мкм.
Температура колонки: комнатная.
Подвижная фаза: ацетонитрил-вода (55:45, по объему).
Скорость потока элюента: 0,6 мл/мин.
Рабочая длина волны: 235 нм.
Чувствительность: 0,02 ед. абсорбции на шкалу.
Объем вводимой пробы: 50 мкл.
Время выхода метаболита: около 4 мин.
Линейный диапазон детектирования: 2-20 нг.
2.7.3. Метаболит RPA 408056
Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором Altex (США).
Колонка стальная, длиной 15 см, внутренним диаметром 4 мм, содержащая Kromasil 100A-C18, зернением 5 мкм.
Температура колонки: комнатная.
Подвижная фаза: ацетонитрил-вода (30:70, по объему).
Скорость потока элюента: 0,6 мл/мин.
Рабочая длина волны: 240 нм.
Чувствительность: 0,02 ед. абсорбции на шкалу.
Объем вводимой пробы: 50 мкл.
Время выхода метаболита: около 5,2 мин.
Линейный диапазон детектирования: 2-20 нг.
Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 0,4 мкг/мл, разбавляют соответствующей подвижной фазой для ВЭЖХ.
2.8. Обработка результатов анализа
Содержание фенамидона рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:
, где
- содержание фенамидона в пробе, мг/кг или мг/дм
;
- высота пика образца, мм;
- высота пика стандарта, мм;
- концентрация стандартного раствора, мкг/мл;
- объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл;
- масса или объем анализируемой части образца, г или мл (для воды - 200 мл; для почвы и растительного материала - 5 г).
Содержание метаболитов фенамидона рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:
, где
- содержание метаболита фенамидона в пробе, мг/кг или мг/дм
;
- высота пика образца, мм;
- высота пика стандарта, мм;
- концентрация стандартного раствора метаболита, мкг/мл;
- объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл;
- масса или объем анализируемой части образца, г или мл.
При расчете содержания метаболитов RPA 405862 и RPA 408056 в эквивалентах фенамидона полученное значение Х умножают соответственно на 1,11 и 1,41.
3. Требования техники безопасности
Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами и сжатыми газами.
4. Контроль погрешности измерений
Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями МИ 2335-95. ГСИ. Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа.
5. Разработчики
Дубовая Л.В.; Макеев А.М., к. биол. н.; Микитюк О.Д., к. биол. н.; Назарова Т.А., к. биол. н.
ВНИИ фитопатологии, 143050, Московская обл., п/о Большие Вяземы, тел. 592-92-20.
Текст документа сверен по:
официальное издание
Определение остаточных количеств пестицидов
в пищевых продуктах, сельскохозяйственном
сырье и объектах окружающей среды:
Сб. методических указаний. - М.: Федеральный центр
госсанэпиднадзора Минздрава России, 2004