МУК 4.1.1552-03

     
     
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

   
  
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
по измерению концентрации метилового эфира эстрона в воздухе рабочей зоны
методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

     
     
Дата введения: с момента утверждения

     
     
     УТВЕРЖДЕНЫ Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г.Онищенко 29 июня 2003 г.
     
     

          
     Метиловый эфир эстрона (3-метокси-1,3,5-эстратриен-17-она) - производное эстрона, активного эстрогенного гормона, используется в синтезе анаболических препаратов феноболина и силаболина. Белый с желтоватым оттенком мелкокристаллический порошок с температурой плавления 167-171 °C. В воде нерастворим, растворим в хлористом метилене, метаноле, изопропаноле.
     
     В воздухе находится в виде аэрозоля.
     
     Метиловый эфир эстрона - малотоксичное вещество при внутрижелудочном введении. Не обладает раздражающим действием на кожу и слизистые, легко проникает через неповрежденные кожные покровы, оказывая системное влияние на организм. У женщин эстрогены вызывают циклические изменения эпителия влагалища и эндометрия, что приводит к кровотечению, у мужчин - угнетают сперматогенез, вызывают признаки феминизации.
     
     ОБУВ в воздухе - 0,0001 мг/м.
     
     

Характеристика метода

     
     Определение основано на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с УФ-детектированием.
     
     Отбор проб проводится с концентрированием на фильтры АФА-ХА-20 или АФА-ХП-20.
     
     Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы 0,003 мк.
     
     Нижний предел измерения в воздухе 0,00005 мг/м (при отборе 1480 л воздуха).
     
     Диапазон измеряемых концентраций от 0,00005 до 0,001 мг/м.
     
     Измерению не мешает диметилсульфат изопропанола.
     
     Суммарная погрешность измерения не превышает ±18,5%.
     
     Время выполнения измерения 1 час 40 мин, включая отбор проб.
     
     

Приборы, аппаратура, посуда

     
     Хроматограф с УФ-детектором для жидкостной хроматографии.
     
     Колонка из нержавеющей стали длиной 0,25 м, шириной 8,2 мм.
     
     Аспирационное устройство с расходомером, модель 822. ТУ 64-1-862-72.
     
     Весы лабораторные аналитические, ГОСТ 24104-88Е.
     
     Разновесы Г-22210, 1 класс, ГОСТ 7328-75.
     
     Мерные колбы вместимостью 25, 50 и 100 мл, ГОСТ 1770-74Е.
     
     Пипетки на 1, 5 и 10 мл, ГОСТ 29227-91.
     
     Ротационный испаритель типа ИР-1M, ТУ 25-11-917.76.
     
     Аппарат Сокслета, ГОСТ 28165-89.
     
     Фильтры АФА-ХА-20 или АФА-ХП-20, ОСТ 95-743-80.
     

Реактивы, растворы, материалы

     
     Метиловый эфир эстрона - порошок.
     
     Спирт метиловый, х.ч., ГОСТ 6295-75, абсолютизированный по стандартным методикам.
     
     Силикагель "для хроматографии" фирмы "Zorbak" с размером частиц 4,0-5,0 мкм, диаметром пор 6-60 нм, устойчивый в водных растворах в интервале рН 1-11.
     
     Стандартный раствор N 1 с концентрацией 100 мкг/мл метилового эфира эстрона, готовят растворением навески вещества 0,0100 г в 100 мл метанола. Градуировочные растворы с концентрацией 0,15-0,30-1,0-2,0-3,0 мкг/мл, готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 1 метиловым спиртом. Растворы устойчивы в течение 25 дней.
     
     

Отбор пробы воздуха

     
     Воздух с объемным расходом 100 л/мин аспирируют через два фильтра типа АФА-ХА или АФА-ХП. Для определения 1/2ОБУВ следует отобрать 1480 л воздуха. Отобранные пробы можно хранить на протяжении 15 суток.
     

Подготовка к измерению

     
     Прибор выводят на рабочий режим в соответствии с инструкцией, прилагаемой к жидкостному хроматографу. Стандартную хроматографическую колонку, заполненную силикагелем "для хроматографии", промывают в течение 10-15 мин метиловым спиртом до получения стабильной нулевой линии.
     
     При построении градуировочного графика в хроматограф последовательно вводят по 20 мкл градуировочных растворов метилового эфира эстрона, что соответствует 0,003-0,006-0,02-0,04-0,06 мкг препарата. На полученной хроматограмме обсчитывают с помощью ЭВМ "SP-4100" площади хроматографических пиков в мВ мин и строят градуировочную зависимость их величины (ось ординат) от концентрации вещества в мкг/мл (ось абсцисс).
     
     Условия хроматографирования градуировочных растворов и анализируемых проб:
     
     Колонка длиной 0,25 м, диаметром 8,2 мм.
     
     Насадка для колонки - силикагель "для хроматографии" с размером частиц 4,0-5,0 мкм, диаметром пор 6-60 нм.
     
     Температура колонки 50 °С.
     
     Объем вводимой пробы 20 мкл.
     
     Элюент - метанол - подается со скоростью 0,7 мл/мин.
     
     Детектор - ультрафиолетовый, длина волны 280 нм.
     
     Чувствительность определения 0,4 Д на всю шкалу.
     
     Время удерживания вещества 16 мин 10 с.
     
     

Проведение измерения

     
     Фильтр с отобранной пробой помещают в аппарат Сокслета, заливают 10 мл метанола и экстрагируют в течение 7 мин. Экстракцию повторяют дважды. Степень извлечения составляет 98,9%. Объединенные экстракты упаривают в ротационном испарителе при 70 °С. Сухой остаток растворяют в 0,5 мл метанола и вводят в хроматограф через инжекторное устройство, снабженное дозирующей петлей объемом 20 мкл. Количественное определение вещества (в мкг/мл) проводят по предварительно построенному градуировочному графику.
     
     

Расчет концентраций

     
     Концентрацию метилового эфира эстрона в воздухе "" (мг/м) вычисляют по формуле:
     

,

     
где  - концентрация метилового эфира эстрона в анализируемом объеме, найденная по градуировочному графику, мкг/мл;
     
     - объем раствора пробы, мл;
     
      - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям, л (см. Приложение 1).