МУК 4.1.1235-03

     
     МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение концентраций фенамидона в воздухе рабочей зоны
методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

     
Дата введения 2003-07-01

     
     
     УТВЕРЖДЕНЫ Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации Г.Г.Онищенко 16 марта 2003 г.
     

1. Вводная часть

     
     Фирма производитель: Байер КропСайенс (Германия).
     
     Торговое название: Сектин (Секур).
     
     Действующее вещество: фенамидон.
     
     (+)-(4S)-4-метил-2-метилтио-4-фенил-(1Н)-1-фениламино-2-мидазолин-5-он (ИЮПАК).
     
     Структурная формула:     
     

                                                            
     Бесцветное кристаллическое вещество без запаха.
     
     Температура плавления: 137 °С.
     
     Давление паров при 20 °С: 3,4х10 Па.
     
     Коэффициент распределения н-октанол/вода: =-2,8.
     
     Растворимость при 20 °С (г/л): вода - 25, ацетон - 250, дихлорметан - 330, гексан - 0,001, метанол - 12, ацетонитрил - 86.
     
     Стабильность к гидролизу  - 22 дня (рН 9), более месяца (рН 5-7).
     
     Может присутствовать в воздухе рабочей зоны в виде аэрозоля.
     
     Краткая токсикологическая характеристика. Острая пероральная токсичность () для крыс - 5000 мг/кг; острая дермальная токсичность () для крыс - более 2000 мг/г; острая ингаляционная токсичность () для крыс - 2,1 мг/дм воздуха.
     
     Гигиенические нормативы: ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 1,0 мг/м.
     
     Область применения препарата. Фенамидон - специфический системный фунгицид широкого спектра действия. Высокоэффективен против возбудителей фитофтороза картофеля и томатов, ложной мучнистой росы огурцов и лука. Обычно применяется в смеси с препаратами контактного действия. В настоящее время проходит регистрационные испытания смесевой препарат Сектин, ВДГ (100 г фенамидона + 500 г манкоцеба в 1 кг препарата) при норме расхода фунгицида 1,25 кг/га и 3-4-кратной обработке за сезон.
     
     Фенамидон весьма лабильное соединение и достаточно быстро метаболизируется в растениях и объектах окружающей среды. В воде и растениях фенамидон разрушается с образованием 5-метил-5-фенил-3-фениламиноимидазолидин-2,4-диона (RPA 405862), в почве до 5-метил-2-метилтио-5-фенил-3,5-дигидроимидазол-4-она (RPA 408056).
     
     

2. Методика измерения концентраций фенамидона в воздухе рабочей зоны
методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

    
2. 1. Основные положения

     
2.1.1. Принцип методики

     
     Методика основана на определении вещества с помощью обращенно-фазной высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с ультрафиолетовым детектором.
     
     Отбор проб воздуха осуществляется концентрированием аэрозоля на бумажные фильтры "синяя лента". Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.
     

2.1.2. Избирательность метода

     
     В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии компонентов препаративной формы, в т.ч. манкоцеба.
     

2.1.3. Метрологическая характеристика метода (=0,95)

     
     Число параллельных определений - 6.
     
     Предел обнаружения в хроматографируемом объеме - 2 нг.
     
     Предел обнаружения в воздухе при отборе 20 дм воздуха - 0,01 мг/м.
     
     Диапазон определяемых концентраций - 0,01-0,1 мг/м.
     
     Среднее значение определения - 93,08%.
     
     Стандартное отклонение (S) - 2,57%.
     
     Относительное стандартное отклонение (DS) - 1,13%.
     
     Доверительный интервал среднего - 2,90%.
     
     Суммарная погрешность измерения не превышает 20%.
     
     

2.2. Реактивы, растворы и материалы

     
     
2.4. Отбор проб

     
     Отбор проб воздуха рабочей зоны следует осуществлять в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 "ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны".
     
     Воздух со скоростью 4 л/мин пропускают через фильтр "синяя лента", помещенный в фильтродержатель.
     
     Для измерения концентрации вещества на уровне 0,01 мг/м следует отобрать 20 л воздуха.
     
     Фильтры с отобранными пробами, помещенные в герметически закрываемые склянки, можно хранить в холодильнике при 4-6 °С в течение 7 дней.
     
     

2.5. Подготовка к определению

     
2.5.1. Очистка растворителей

     
     Органические растворители перед началом работы очищают, сушат и перегоняют в соответствии с типовыми методиками. Хлористый метилен встряхивают с небольшими порциями концентрированной серной кислоты до тех пор, пока свежая порция кислоты не перестанет окрашиваться. Затем растворитель последовательно промывают водой, 2%-ным раствором гидроксида натрия и снова водой, после чего сушат над гидроксидом натрия и перегоняют.
     
     Ацетонитрил сушат над пентоксидом фосфора и перегоняют; отогнанный растворитель повторно перегоняют над углекислым калием.
     

2.5.2. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ

     
     Отмеряют 630 мл ацетонитрила, переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл, добавляют 370 мл бидистиллированной воды, перемешивают, фильтруют и дегазируют.
     

2.5.3. Кондиционирование колонки

     
     Промыть колонку для ВЭЖХ смесью ацетонитрил-вода (63:37, по объему) при скорости подачи растворителя 1 мл/мин в течение 30-45 мин до получения стабильной базовой линии.
     

2.5.4. Приготовление стандартных растворов

     
     Основной стандартный раствор фенамидона с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 0,010 г вещества, содержащего 99,5% д.в., в ацетонитриле в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранится в холодильнике не более месяца.
     
     Рабочие стандартные растворы с концентрациями 0,04; 0,08; 0,2 и 0,4 мкг/мл готовят из основного стандартного раствора фенамидона соответствующим последовательным разбавлением подвижной фазой для ВЭЖХ (п.2.5.2). Рабочие растворы хранят при температуре не выше 4 °С не более 7 дней.
     

2.5.5. Построение калибровочного графика

     
     Для построения калибровочного графика в инжектор хроматографа вводят по 50 мкл рабочего стандартного фенамидона с концентрацией 0,04; 0,08; 0,2 и 0,4 мкг/мл.
     
     Осуществляют не менее 5 параллельных измерений. Находят среднее значение высоты хроматографического пика для каждой концентрации. Строят калибровочный график зависимости высоты хроматографического пика в мм от концентрации фенамидона в растворе в мкг/мл.
     
     

2.6. Описание определения

     
     Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 мл, заливают 10 мл хлористого метилена, помещают на встряхиватель на 4-5 мин. Растворитель сливают, отжимая фильтр стеклянной палочкой. Фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями хлористого метилена объемом 7-8 мл.
     
     Объединенный экстракт упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 35 °С, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха, остаток растворяют в 5 мл подвижной фазы для ВЭЖХ (п.2.5.2), фильтруют или центрифугируют для удаления взвеси и хроматографируют.
     
     

2.7. Условия хроматографирования

     
     Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором Altex (США).
     
     Колонка стальная, длиной 20 см, внутренним диаметром 4 мм, содержащая Lichrosorb RP-18, зернением 5 мкм.
     
     Температура колонки: комнатная.
     
     Подвижная фаза: ацетонитрил-вода (63:37, по объему).
     
     Скорость потока элюента: 0,7 мл/мин.
     
     Рабочая длина волны: 240 нм.
     
     Чувствительность: 0,02 ед. абсорбции на шкалу.
     
     Объем вводимой пробы: 50 мкл.
     
     Время удерживания фенамидона: около 6 мин.
     
     Линейный диапазон детектирования: 2-20 нг.
     
     Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 0,4 мкг/мл, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ (п.2.5.2).
     
     Альтернативная неподвижная фаза
     
     Хроматографическая колонка стальная (15х4 мм), заполненная Kromasil 100A-C18 (5 мкм).
     
     Скорость потока элюента: 0,6 мл/мин.
     
     Условия хроматографирования: те же.
     
     Время удерживания фенамидона: около 6 мин.
     
     

2.8. Обработка результатов анализа

     
     Содержание фенамидона рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:
     

, где

     
      - содержание фенамидона в пробе воздуха, мг/м;
     
      - концентрация фенамидона в хроматографируемом растворе, найденная по калибровочному графику, мкг/мл;
     
      - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл;
     
      - объем пробы воздуха, отобранного для анализа, приведенный к стандартным условиям (давление 760 мм рт.ст., температура 20 °С), дм.
     
     

3. Требования техники безопасности

     
     Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами.
     
     

4. Контроль погрешности измерений

     
     Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями МИ 2335-95. ГСИ. Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа.
     
     

5. Разработчики

     
     Дубовая Л.В., Макеев А.М., к. биол. н.
     
     ВНИИ фитопатологии, 143050, Московская обл., п/о Большие Вяземы, тел. 592-92-20.
     
     
     
Текст документа сверен по:
официальное издание
Определение остаточных количеств пестицидов
в пищевых продуктах, сельскохозяйственном
сырье и объектах окружающей среды:     
Сб. методических указаний. - М.: Федеральный центр
госсанэпиднадзора Минздрава России, 2004