МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
НА РАЗДЕЛЬНОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПАРОВ ФЕНОЛА, ОРТО-, МЕТА- И ПАРА-КРЕЗОЛА
В ВОЗДУХЕ С ПОМОЩЬЮ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

    
    
    УТВЕРЖДЕНЫ заместителем Главного государственного санитарного врача СССР А.И.Заиченко 5 августа 1976 г. N 1473-76
    
    

I. Общая часть

    
    1. Определение основано на получении азокрасителей при взаимодействии фенола, орто-, мета- и пара-крезола с пара-нитрофенилдиазонием в щелочной среде с последующим разделением их в тонком слое силикагеля в системе растворителей бензол-метанол-диэтиламин (10:1,5:1).
    
    Зона фенола окрашена в кирпичный цвет, пара-крезола - в грязно-малиновый, орто- и -мета-крезола - в красный цвет (с разными оттенками).
    
    Величина Rf фенола 0,20-0,24; мета-крезола - 0,26-0,30; орто-крезола - 0,33-0,44; пара-крезола - 0,95-0,96.
    
    Количественное определение проводят фотометрически. Возможно также визуальное определение фенолов сравнением интенсивности окраски зон локализации пробы со стандартной хроматографической шкалой.
    
    2. Чувствительность определения - 0,1 мкг для фенола, орто- и мета-крезола и 0,3 мкг для пара-крезола в анализируемом объеме элюата; минимально определяемые количества на хроматограмме (визуально) для фенола, орто- и мета-крезола - по 0,005 мкг, пара-крезола - 0,03 мкг.
    
    3. Определению не мешают резорцин, формальдегид, фурфурол, орто-оксибензиловый спирт.
    
    4. Предельно допустимая концентрация фенола в воздухе - 0,03 мкг/м; для изомеров крезола ПДК не установлена.
    
    

II. Реактивы и аппаратура

    
    5. Применяемые реактивы и растворы.
    
    Фенол, ГОСТ 6417-52, перегнанный при температуре 182 °С.
    
    Стандартный раствор N 1 фенола. В мерную колбу емкостью 10 мл наливают 4 мл 0,01 н. раствора едкого натра и взвешивают на аналитических весах, затем вносят 2-3 кристаллика фенола и снова взвешивают. Объем доводят до метки 0,01 н. едким натром. По разности в весе рассчитывают содержание фенола в 1 мл раствора.
    
    Из стандартного раствора N 1 соответствующим разведением 0,01 н. едким натром готовят стандартный раствор N 2 фенола, содержащий в 1 мл 1000 мкг. Затем готовят стандартный раствор N 3 фенола, содержащий в 1 мл 100 мкг; путем последующего разведения готовят стандартный раствор N 4 фенола, содержащий в 1 мл 10 мкг, и из последнего стандартный раствор N 5 фенола, содержащий в 1 мл 1 мкг.
    
    орто-Крезол, МРТУ 6-09-3829-67, перегнанный при температуре 190,9 °С.
    
    мета-Крезол, МРТУ 6-09-2796-66, перегнанный при температуре 202,8 °С.
    
    пара-Крезол, МРТУ 6-09-5624-68, перегнанный при температуре 202,5 °С.
    
    Стандартные растворы орто-, мета- и пара-крезола готовят аналогично стандартным растворам фенола. Исключение составляют стандартные растворы N 1, 2, 3 и 4 орто-, мета- и пара-крезола, содержащие 1000, 100, 10, 1 мкг/л, которые готовят соответствующим разведением стандартных растворов N 1, 2, 3 и 4 орто-, мета-, пара-крезола 0,01 н. раствором едкого натра.
    
    Смеси стандартных растворов фенола и орто-, мета-, пара-крезола готовят с содержанием в 1 мл 1, 10, 100 мкг каждого вещества в 0,01 н. растворе едкого натра.
    
    Бумага индикаторная универсальная, рН 1-10.
    
    Спирт этиловый, ректификат, ГОСТ 5962-67*, 96° и 50%-ный раствор, перегнанный с едким кали. К 1000 мл этилового спирта добавить 100 г едкого кали. Погон собирать при температуре 78,4 °С.
__________________
    * На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 51652-2000. - Примечание .
           
    Кали едкое, ГОСТ 4203-66.
    
    Натр едкий, ГОСТ 4328-66, 0,01 н. и 10%-ный растворы.
    
    Соляная кислота, ГОСТ 3118-67, удельный вес 1,19 и 5 н. раствор.
    
    пара-Нитроанилин, ТУ 6-09-258-70, 0,5%-ный раствор.
    

    В 70 мл воды растворить при нагревании 0,35 г пара-нитроанилина. В полученный раствор добавить 4 мл соляной кислоты удельный вес 1,19.
    
    Натрий азотистокислый, ГОСТ 4197-66, 25%-ный раствор. Хранить в темной склянке.
    
    пара-Нитрофенилдиазоний. К 7,4 мл раствора пара-нитроанилина, приготовленного вышеуказанным способом, добавить 0,5 мл 25%-ного раствора кислого азотнокислого натрия и мешать стеклянной палочкой до исчезновения пузырьков газа (приготовление раствора на холоду ускоряет процесс азотирования). Раствор готовят в день анализа.
    
    Диэтиловый эфир, чистый для наркоза, ГОСТ 6265-52.
    
    Бензол, ГОСТ 5955-68.
    
    Метанол, ГОСТ 6995-67.
    
    Диэтиламин, ТУ 6-09-68-70.
    
    Система растворителей: в делительную воронку на 25 мл вносят 10 мл бензола, 1,5 мл метанола и 1 мл диэтиламина. Тщательно перемешивают в течение 2 мин.
    
    6. Применяемые посуда и приборы.
    
    Аспирационное устройство.
    
    Хроматографическая стеклянная камера (эксикатор).
    
    Чашка Петри.
    
    Теплоэлектровентилятор (фен).
    
    Центрифуга, скорость 2500 об/мин.
    
    Спектрофотометр.
    
    Приборы поглотительные с пористой пластинкой N 1. Малая модель.
    
    Пробирки колориметрические с притертыми пробками, высотой 150 мм и внутренним диаметром 15 мм с делениями 5 и 10 мл.
    
    Пробирки колориметрические с притертыми пробками, высотой 100 мм и внутренним диаметром 10 мм с делениями 1, 2 и 3 мл.
    
    Пробирки центрифужные на 10 мл с ценой деления 0,1 мл.
    
    Микропипетки, ГОСТ 1770-64, емкостью 0,1 мл с ценой деления 0,001 мл.
    
    Пипетки, ГОСТ 1770-64, емкостью 1, 2, 5 и 10 мл с ценой деления 0,01; 0,02; 0,05 и 0,1 мл.
    
    Колбы мерные, ГОСТ 1770-64, емкостью 10 и 25 мл.
    
    Делительные воронки емкостью 10 и 25 мл.
    
    Склянки реактивные.
    
    Палочки стеклянные.
    
    Кюветы с расстоянием между рабочими гранями 1 см.
    
    Пластинки хроматографические "Silufol".
    
    

III. Отбор пробы воздуха

    
    7. Воздух со скоростью 0,5 л/мин протягивают через поглотительный прибор со стеклянной пористой пластинкой N 1, содержащей 2 мл 0,01 н. раствора едкого натра. Для определения ПДК для фенола необходимо отобрать 12 л воздуха.
    
    

IV. Описание определения

    
    8. В колориметрическую пробирку отбирают 1,0 мл пробы, добавляют 0,1 мл раствора пара-нитрофенилдиазония и 0,1 мл раствора 10%-ного едкого натра. Пробу нейтрализуют 5 н. раствором соляной кислоты до рН 3-6 (примерно 0,06 мл или 2 капли 5 н. раствора соляной кислоты), вследствие чего красная окраска переходит в желтую. Окрашенный продукт экстрагируют эфиром 2 раза. Эфирный слой помещают в пробирки с притертыми пробками с делениями 1, 2 и 3 мл. Общее количество эфира должно быть 1 мл (если эфирный слой окрашен в желтый цвет очень интенсивно, то это свидетельствует о большом содержании фенола). Количество эфирной вытяжки можно увеличить разбавлением, отмечая общий объем эфирной вытяжки. Если эфирный слой бесцветен, то нужно количество анализируемой пробы уменьшить, испарив эфирную вытяжку до объема 0,2 мл.
    
    На силуфоловую пластинку с помощью микропипетки в точки, расположенные на 1 см от нижнего края пластинки, 1 см ее боковых краев и 2 см друг от друга, наносят путем многократного прикосновения пипеткой к пластинке в токе холодного воздуха работающего фена по 0,1 мл раствора проб.
    
    Разделение веществ проводят в камере, на дно которой помещают чашку Петри со смесью растворителей. Пластинку закладывают так, чтобы нижний край погрузился в жидкость приблизительно на 0,7 см. Разделение считается законченным, когда растворитель поднимется от линии старта на высоту 12-13 см. После этого хроматограмму вынимают, отмечают линию фронта и сушат на воздухе. Время разделения должно быть не более 25-30 мин.
    
    Для количественного определения веществ на хроматограмме рекомендуются фотометрический и визуальный способы.
    
    Для визуального определения готовится шкала стандартов содержанием от 0,005 до 2 мкг, для фотометрического - от 0,01 до 2 мкг.
    
    Подробно приготовление шкалы стандартов в колориметрических пробирках дано в табл.23.
    

Таблица 23

Шкала стандартов

    
    
    Затем во все пробирки шкалы стандартов прибавляют дважды по 1,0 мл эфира и извлекают образовавшийся окрашенный продукт в делительных воронках. Водный слой отбрасывают, эфирные вытяжки помещают в маленькие пробирки с притертыми пробками. Количество эфирной вытяжки должно быть равным 1 мл, при большем содержании эфир испаряют.
    
    Приготовление хроматографической шкалы. На хроматографическую пластинку наносят по 0,1 мл эфирной вытяжки из каждого стандарта с помощью микропипетки в потоке холодного воздуха (фен). Дальнейшее хроматографическое разделение в хроматографических камерах проводят аналогично пробам.
    
    При визуальном определении сравнивают интенсивность окрашенных зон исследуемых проб с зонами хроматографической шкалы с содержанием от 0,005 до 2,0 мкг для каждого вещества (фенола и изомеров крезола).
    
    При фотометрическом методе количественного определения веществ полученные на хроматографической пластинке зоны исследуемых веществ (проба и шкала) осторожно вырезают (каждую в отдельности), помещают в центрифужные пробирки и обрабатывают 4 мл 50%-ного раствора перегнанного этилового спирта, тщательно перемешивают стеклянной палочкой. Затем пробы центрифугируют в течение 10 мин со скоростью 2500 об/мин. Прозрачный слой сливают в колориметрические пробирки и добавляют по 0,1 мл 10%-ного раствора едкого натра.
    
    Интенсивность образующихся окрасок измеряют на спектрофотометре при 490 нм для фенола, 515 нм для орто- и мета-крезола и 540 нм для пара-крезола. Контролем служит раствор, содержащий 4 мл 50%-ного перегнанного этилового спирта и 0,1 мл 10%-ного раствора едкого натра.
    
    Количество микрограмм в пробе устанавливают по калибровочным графикам для каждого вещества, построенным в координатах оптическая плотность - концентрация.
    
    Концентрацию фенола и изомеров крезолов в мг/м воздуха вычисляют по формуле
    

,

    
где - количество вещества (фенол, орто-, мета-, пара-крезол), найденное в анализируемом объеме пробы, мкг;
    
     - общий объем пробы, мл;
    
     - объем пробы, взятый для анализа, мл;
    
     - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к нормальным условиям (см. приложение 1), л.
    
    
    

Текст документа сверен по:
Методические указания на определение
вредных веществ в воздухе. Вып.XIII
/ НИИ гигиены водного транспорта. -
М.: ЦРИА "Морфлот", 1979