МУК 4.1.1918-04

     
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

     
     
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

     
Определение остаточных количеств Пропетамфоса
в молоке и мясе методом газожидкостной хроматографии

     

Дата введения с момента утверждения

     
     
     1. РАЗРАБОТАНЫ Московской сельскохозяйственной академией им. К.А.Тимирязева, Учебно-научным центром "Агроэкология пестицидов и агрохимикатов" (авторы В.А.Калинин, Т.С.Калинина, Н.В.Устименко).
     
     2. УТВЕРЖДЕНЫ Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г.Онищенко 3 августа 2004 г.
     
     3. ВВЕДЕНЫ ВПЕРВЫЕ.
     
     

1. Вводная часть

     
     Фирма производитель: Каллиопе С.А.С.
     
     Торговое название: Блотик.
     
     Название действующего вещества по ИСО: Пропетамфос.
     
     Название действующего вещества по ИЮПАК:
     
     Е-0-2-изопропоксикарбонил-1-метилвинил-О-метилэтилфосфорамидотиоат.
     
     Структурная формула:     
     

     
     Эмпирическая формула: CHNОPS
     
     Молекулярная масса: 281,3
     
     Физическое состояние технического продукта - желтоватая маслянистая жидкость.
     
     Давление насыщенного пара 1,9 мПа при 20 °С.
     
     Температура кипения: 87-89 °С.
     
     Плотность при 20 °С: 1,1294 г/мл.
     
     Коэффициент перераспределения октанол/вода: =3,82.
     
     Растворимость: в воде - 110 мг/л; хорошо смешивается с ацетоном, этанолом, метанолом, гексаном, диэтиловым эфиром, диметилсульфоксидом, хлороформом и ксиленом.
     
     Стабилен при хранении и на свету. Гидролитическая стабильность: DT 11 дней при pH 3; 1 год при pH 6 и 41 день при pH 9. В водной среде не разлагается в течение 70 ч.
     
     pKa 13.67.
     
     В почве сохраняется в течение 2-3 месяцев.
     
     Краткая токсикологическая характеристика: Пропетамфос относится к веществам, опасным по острой пероральной (ЛД крысы - 59,5-119,0 мг/кг) и ингаляционной токсичности (ЛД крысы - 4 ч - 690-1500 мг/м), но умеренно опасным по дермальной (ЛД крысы - 2260-2850 мг/кг).
     
     В России гигиенические нормативы не установлены.
     
     Область применения препарата. Пропетамфос - инсектицид контактного и кишечного действия из группы органических соединений фосфора с длительным защитным эффектом. Он эффективно подавляет развитие синантропных насекомых (тараканы, мухи, моли, муравьи, комары) и эктопаразитов животных (личинки оводов, клещи и др.). Проходит регистрационные испытания в России и странах СНГ под торговым названием Блотик для применения в качестве ветеринарного препарата.
     
     

2. Методика определения Пропетамфоса в молоке и мясе
методом газожидкостной хроматографии

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

     
     Методика основана на определении Пропетамфоса методом газожидкостной хроматографии с использованием термоионного детектора на фосфор после экстракции из анализируемой пробы ацетоном, очистки экстракта перераспределением между двумя несмешивающимися растворителями и/или на колонке с силикагелем.
     
     Идентификация проводится по времени удерживания. Количественное определение - методом абсолютной калибровки.
     

2.1.2. Метрологическая характеристика метода

     
     Метрологическая характеристика метода представлена в табл.1.
     
     

Таблица 1

     
     
2.1.3. Избирательность метода

     
     В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии пестицидов, применяемых в ветеринарии.
     
     

2.2. Реактивы, материалы, приборы, оборудование

2.2.1. Реактивы, растворы и материалы

2.3. Отбор проб

     
     Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.79), утвержденными заместителем Главного государственного санитарного врача СССР. Пробы воды и масла хранят в стеклянной герметично закрытой таре в холодильнике при температуре 4 °С; пробы яблок, зеленой массы рапса, а также клубней картофеля в полиэтиленовой таре - в морозильнике при температуре -18 °С; пробы зерна, семян рапса в бумажных или тканевых мешочках - в сухом, хорошо проветриваемом шкафу, недоступном для грызунов.
     
     

2.4. Подготовка к определению

2.4.1. Приготовление стандартных растворов

     
     Основной стандартный раствор Пропетамфоса с концентрацией 100 мкг/мл готовят растворением 0,0010 г вещества в мерной колбе на 100 мл в этилацетате. Раствор хранится при комнатной температуре в течение 10 дней.
     
     Рабочие стандартные растворы Пропетамфоса с концентрацией 0,05; 0,1; 0,25 и 0,50 мкг/мл готовят из раствора, содержащего 100 мкг/мл вещества, соответствующим последовательным разбавлением этилацетатом. Растворы хранятся при комнатной температуре в течение 10 дней.
     

2.4.2. Построение градуировочного графика

     
     В испаритель хроматографа вводят по 1 мкл рабочего стандартного раствора Пропетамфоса с концентрацией 0,05; 0,1; 0,25 и 0,50 мкг/мл. Строят градуировочный график зависимости высоты хроматографического пика (мм) от содержания Пропетамфоса в хроматографическом объеме (нг).
     

2.4.3. Приготовление колонки

     
     Суспензию 5 г безводного сульфата натрия в 20 мл гексана заливают в колонку с уложенной на дне ватой. После оседания сульфата натрия добавляют в колонку 6 г силикагеля и 5 г сульфата натрия. Промывают колонку 20 мл гексана, не допуская осушения верхнего слоя сорбента.
     
     

2.5. Проведение определения

     
     2.5.1. Молоко. Навеску молока 50 г интенсивно перемешивают в стакане на гомогенизаторе или высокоскоростной мешалке с 200 мл ацетона в течение 3 мин или встряхивают в течение 30 мин. Экстракт переносят в центрифужный стакан и центрифугируют в течение 5 мин при 3000 об./мин. Супернатант переносят в концентратор. Осадок в стакане экстрагируют путем встряхивания с 50 мл ацетона. Экстракты объединяют в концентраторе и упаривают ацетон. Оставшуюся жидкость переносят в делительную воронку и экстрагируют Пропетамфос гексаном три раза по 20 мл. Гексановую фракцию пропускают через безводный серно-кислый натрий и упаривают досуха на ротационном испарителе при температуре не выше 40 °С. Сухой остаток растворяют в 5-10 мл этилацетата и аликвоту 3-5 мкл хроматографируют.
     
     2.5.2. Мясо. Навеску измельченного на мясорубке мяса 20-100 г помещают в стакан гомогенизатора, добавляют 20 г целита 545 и 200 мл ацетона и гомогенизируют при максимальной скорости в течение 3 мин. Переносят экстракт на воронку Бюхнера с бумажным фильтром и фильтруют под вакуумом. Остаток на фильтре возвращают в стакан гомогенизатора, добавляют 150 мл ацетона и гомогенизируют еще 2 мин. Встряхивают дополнительно субстрат на механическом встряхивателе 30 мин и фильтруют экстракт через воронку Бюхнера. Экстракты объединяют и упаривают ацетон на ротационном испарителе при =40 °С.
     
     Остаток в концентраторе переносят 100 мл петролейного эфира в делительную воронку объемом 250 мл. Обмывают концентратор двумя порциями по 25 мл ацетонитрила, содержащего 5% воды. Смыв переносят в делительную воронку. Встряхивают воронку 30 мин, дают жидкостям расслоиться и нижнюю фракцию сливают в концентратор. Повторяют экстракцию ацетонитрилом еще 3 раза (50+50+50 мл). Ацетонитрильные экстракты объединяют и упаривают досуха на ротационном испарителе при =40 °С.
     
     Растворяют остаток в 10 мл н-гексана и переносят на заранее подготовленную колонку с силикагелем. Обмывают концентратор дважды 15 мл н-гексана, перенося гексановый экстракт на колонку. Гексановые экстракты, прошедшие через колонку, отбрасывают.
     
     Элюируют Пропетамфос из колонки 80 мл смеси толуола с диэтиловым эфиром (75:25). Элюат из колонки собирают и упаривают досуха при =40 °С. Остаток растворяют в 10 мл толуола или этилацетата и хроматографируют, вводя в хроматограф 2-5 мкл раствора.
     
     

2.6. Условия хроматографирования и обработка результатов

2.6.1. Условия хроматографирования

     
     Газовый хроматограф "Цвет-550" или "Цвет-600" с термоионным детектором.
     
     Неподвижная фаза: Инертон-супер с 3% OV-17 (0,16-0,20 мм).
     
     Колонка стеклянная длиной 2 м, внутренним диаметром 3 мм.
     
     Температура термостата колонки - 200 °С;
     
     испарителя - 240 °С;
     
     детектора - 340 °С.
     
     Скорость газа-носителя (азота) - 50 мл/мин.
     
     Скорость водорода - 17 мл/мин.
     
     Скорость воздуха - 200 мл/мин.
     
     Показания аттенюатора - 16х10 Ом.
     
     Скорость движения диаграммной ленты - 240 мм/ч.
     
     Хроматографируемый объем - 1-5 мкл.
     
     Абсолютное время удерживания - 2 мин 27 с.
     
     Линейный диапазон детектирования - 0,05-0,5 нг.
     
     Пробы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 0,5 мкг/мл, разбавляют этилацетатом или толуолом.
     
     Альтернативная хроматографическая фаза: Инертон-супер с 5% ХЕ-60 (0,16-0,20 мм).
     
     Колонка стеклянная длиной 2 м, внутренним диаметром 2 мм.
     
     Температура термостата колонки - 180 °С.
     
     испарителя - 250 °С;
     
     детектора или
     
     переходной камеры - 360 °С.
     
     Скорость газа-носителя (азота) - 35 мл/мин.
     
     Скорость водорода - 11 мл/мин.
     
     Скорость воздуха - 140 мл/мин.
     
     Показание аттенюатора - 16х10.
     
     Хроматографируемый объем - 1-5 мкл.
     
     Абсолютное время удерживания - 3 мин 45 с.
     
     Линейный диапазон детектирования - 0,05-0,5 нг.
     
     Пробы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 1,0 мкг/мл, разбавляют этилацетатом.
     

2.6.2. Обработка результатов анализа

     
     Содержание Пропетамфоса в пробах молока и мяса рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:
     

 где

     
      - содержание Пропетамфоса в пробе, мг/кг;
     
      - высота пика в образце, мм;
     
      - высота пика Пропетамфоса в стандарте, мм;
     
      - концентрация стандартного раствора, мкг/мл;
     
      - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл;
     
      - масса или объем анализируемого образца, г или мл;
     
      - содержание Пропетамфоса в аналитическом стандарте.
     
     

3. Требования техники безопасности

     
     Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами и сжатыми газами.
     
     
     
Текст документа сверен по:

официальное издание

М.: Федеральный центр Госсанэпиднадзора
Минздрава России, 2005