МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
по фотометрическому измерению концентраций тобрамицина
в воздухе рабочей зоны

     
     
     УТВЕРЖДЕНЫ заместителем Главного государственного санитарного врача СССР М.И.Наркевичем 10 октября 1991 г. N 6008-91
     
     

     
М.м. 690,0

    
     Белый кристаллический порошок без запаха, гигроскопичен. Легко растворим в воде, очень мало растворим в этиноле. Практически нерастворим в ацетоне, хлороформе.  220 °С (с разложением). Устойчив при хранении в растворах и в твердом виде.
     
     В воздухе находится в виде аэрозоля.
     
     Обладает ото- и нефротоксическим действием. Слабый аллерген.
     
     ПДК в воздухе - 0,1 мг/м.
     
     

Характеристика метода

     
     Метод основан на измерении оптической плотности окрашенного в желтый цвет дигидролютидинового производного, образующегося в результате конденсации аминогрупп молекулы тобрамицина с ацетил-ацетоном и формальдегидом при 356 нм.
     
     Отбор проб воздуха проводят с концентрированием на фильтр.
     
     Нижний предел измерения концентрации вещества в анализируемом растворе - 5 мкг.
     
     Нижний предел измерения содержания вещества в воздухе - 0,05 мг/м (при отборе 200 л воздуха).
     
     Диапазон измеряемых концентраций от 0,05 до 1,75 мг/м.
     
     Измерению не мешает присутствие стрептомицина.
     
     Измерению мешает наличие в воздухе канамицина, гентамицина, мономицина, сизомицина, неомицина, амикацина, апрамицина.
     
     Суммарная погрешность измерения не превышает 15%.
     
     Время выполнения измерения, включая отбор пробы, 1 час 10 мин.
     
     

Приборы, аппаратура, посуда

     
     Спектрофотометр.
     
     рН-метр.
     
     Аспирационное устройство.
     
     Фильтродержатели, ТУ 95.72-05-77.
     
     Водяная баня.
     
     Секундомер, ГОСТ 5072-79.
     
     Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, вместимостью 50, 100, 500 и 1000 мл.
     
     Пробирки с пришлифованными пробками, ГОСТ 10515-75, вместимостью 10 мл.
     
     Цилиндры мерные, ГОСТ 1770-74, вместимостью 50, 250 мл.
     
     Пипетки, ГОСТ 20292-74, вместимостью 1, 2, 5 мл.
     
     Стаканы химические, ГОСТ 19908-85, вместимостью 50 мл.
     
     Воронки с пористой пластинкой N 1.
     
     Насос водоструйный.
     
     

Реактивы, растворы, материалы

     
     Тобрамицин.
     
     Ацетил-ацетон, ГОСТ 10259-78, ч.д.а., перегнанный при 135,5-138 °С.
     
     Формалин, ГОСТ 1625-75, 30% раствор в воде.
     
     Кислота фосфорная, конц., ГОСТ 5653-75, х.ч.
     
     Кислота уксусная, ледяная, ГОСТ 61-75, х.ч.
     
     Кислота борная, ГОСТ 9656-75, ч.д.а.
     
     Натрия гидроксид, ГОСТ 4328-77, х.ч.
     
     Смесь фосфорной, уксусной и борной кислот (раствор А) готовят в мерной колбе на 1000 мл, помещая последовательно такие количества перечисленных кислот, чтобы содержание каждой составляло 0,2 М концентрации, и доводят до метки водой.
     
     Натр едкий, ГОСТ 4328-77, х.ч., 1,0 М раствор (раствор Б).
     
     Буферная смесь рН 2,56, готовят, смешивая 1000 мл раствора А с 150 мл раствора Б.
     
     Реактив С: к 50 мл буферной смеси добавляют 4,0 мл ацетилацетона, 10,0 мл раствора формальдегида, перемешивают, доводят до 150 мл буферной смесью. Устойчив 7 дней.
     
     Стандартный раствор N 1 с концентрацией тобрамицина 100 мкг/мл готовят, растворяя точную навеску стандартного образца антибиотика в воде. Раствор устойчив 10 дней.
     
     Стандартный раствор N 2 с концентрацией тобрамицина 10 мкг/мл готовят путем соответствующего разбавления стандартного раствора N 1 водой. Раствор устойчив 10 дней.
     
     Фильтры АФА.
     
     

Отборы пробы воздуха

     
     Воздух с объемным расходом 20 л/мин аспирируют через фильтр АФА-ВП-20 или АФА-ВП-10. Для измерения 1/2 ПДК следует отобрать 200 л воздуха. Срок хранения отобранных проб 2 недели.
     
     

Подготовка к измерению

     
     Градуировочные растворы (устойчивы в течение 4 часов) готовят согласно таблице 58.
     
     

Таблица 58

Шкала градуировочных растворов

     
     
     Во все пробирки шкалы добавляют по 2,5 мл реактива С и нагревают на кипящей водяной бане 20 минут, охлаждают при комнатной температуре. Измеряют на спектрофотометре оптическую плотность растворов при длине волны 356 нм. Изменения проводят в кюветах с толщиной поглощающего слоя 10 мм, по отношению к раствору сравнения, не содержащему определяемого вещества (раствор N 1 по таблице).
     
     Строят градуировочный график: на ось ординат наносят значение оптических плотностей градуировочных растворов, на ось абсцисс - соответствующие им концентрации вещества (в мкг) в градуировочных растворах.
     
     Проверка градуировочного графика проводится 1 раз в 3 месяца или в случае использования новой партии реактивов.
     
     

Проведение измерения

     
     Фильтр с отобранной пробой помещают в химический стакан, заливают 5 мл дистиллированной воды, выдерживают при перемешивании 40 минут. При необходимости раствор фильтруют через воронку с пористой пластинкой. Для анализа в пробирку с пришлифованной пробкой отбирают 2,5 мл раствора антибиотика и обрабатывают аналогично градуировочным растворам. Оптическую плотность полученного анализируемого раствора измеряют по отношению к контрольному, который готовят одновременно и аналогично пробам.
     
     Количественное измерение содержания тобрамицина в мкг во взятой аликвоте проводят по предварительно построенному градуировочному графику.
     
     

Расчет концентрации

     
     Концентрацию вещества "" в воздухе (в мг/м) вычисляют по формуле:
     

, где

     
      - содержание в анализируемом объеме раствора пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;
     
      - объем раствора пробы, взятый для анализа, мл;
     
      - общий объем раствора пробы, мл;
     
      - объем воздуха (в л), отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям (см. Приложение 1).
     
     
     
Текст документа сверен по:
Методические указания по измерению концентрации
вредных веществ в воздухе рабочей зоны:
Сб. методических указаний. Вып.28. -
М.: Информационно-издательский центр
Госкомсанэпиднадзора Российской Федерации, 1993