МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
НА ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ТРИХОТЕЦИНА В ВОЗДУХЕ

     УТВЕРЖДЕНЫ Заместителем Главного государственного санитарного врача СССР А.И.3аиченко 6 июня 1979 г. N 2019-79
     
     

I. Общая часть

     1. Определение основано на хроматографии трихотецина в тонком слое силикагеля, подвижный растворитель - дихлорэтан:ацетон в соотношении 9:1. Зоны локализации обнаруживаются с помощью ультрахимископа.
     
     2. Чувствительность определения - 0,5 мкг в анализируемом объеме раствора.
     
     3. Определению мешают вещества, поглощающие УФ-свет при длине волны 254 нм.
     
     4. Предельно допустимая концентрация трихотецина в воздухе - 0,2 мг/м.
     
     

II. Реактивы и аппаратура

     5. Применяемые реактивы и растворы.
     
     Этиловый спирт, ректификат, ГОСТ 5963-67*
_______________
     * Действует ГОСТ Р 51723-2001. - Примечание изготовителя базы данных.

     
     Ацетон, ГОСТ 2603-71.
     
     Дихлорэтан, х.ч., ГОСТ 5840-51.
     
     Хлороформ, х.ч., ГОСТ 20015-74.
     
     Стандартный раствор трихотецина 1 мг/10 мл, приготовленный на хлороформе.
     
     6. Применяемые посуда и приборы.
     
     Воронки делительные, ГОСТ 8613-64.
     
     Микропипетки, ГОСТ 1777-74.
     
     Колбы грушевидные, емкостью 25 мл, ГОСТ 10394-63.
     
     Цилиндры мерные.
     
     Палочки стеклянные.
     
     Камера для хроматографирования.
     
     Пластинки "Силуфол" UV-254.
     
     Ультрахимископ типа "Хроматоскоп".
     
     Весы аналитические типа АДВ-200 М.
     
     Испаритель ротационный, ГОСТ 1911-59.
     
     

III. Отбор пробы воздуха

     7. Воздух со скоростью 5-10 л/мин аспирируют через фильтры AФА-XA-20. Для анализа следует отобрать 100 л воздуха.
     
     

IV. Описание определения

     8. Фильтры с отобранной пробой помещают в делительную воронку на 25 мл, заливают 5-10 мл этилового спирта и экстрагируют, встряхивая одну минуту. Экстракт сливают в грушевидную колбу на 25 мл для отгонки и проводят повторную экстракцию. Спиртовые экстракты объединяют и упаривают на ротационном испарителе при слабом разрежении досуха. Сухой остаток растворяют в 0,5-1 мл хлороформа (в зависимости от предполагаемого количества трихоцетина) и проводят хроматографическое определение антибиотика.
     
     На предварительно промытую ацетоном и высушенную на воздухе пластинку "Силуфол" UV-254 размером 70х50 мм на расстоянии 1,5 см от нижнего края пластинки, 1,0 см от вертикального края при помощи микропипетки наносят три пробы стандартных растворов одинакового объема. В промежутках между пятнами стандартных растворов наносят такой же объем исследуемой пробы. Величина пятна на линии старта (диаметр в мм) - 2-4 мм. Пластинку помещают под углом 45° в хроматографическую камеру с подвижной системой, состоящей из дихлорэтана с ацетоном в соотношении 9:1. Камеру предварительно выдерживают в течение 15-20 минут в закрытом состоянии для насыщения парами растворителей.
     
     После развития хроматограммы пластинку вынимают из камеры, высушивают на воздухе и просматривают в УФ-свете с помощью ультрахимископа. Трихотецин обнаруживается на хроматограмме в виде малиновых пятен (0,36±0,04).
     
     Количественное определение производят путем сравнения площади пятна пробы и того стандарта, площадь которого наиболее близка по величине к площади пробы. Площадь пятен замеряют планиметром.
     
     Концентрацию трихотецина в мг/м воздуха () вычисляют по формуле:
     

,

     
где  - количество трихотецина в стандарте, мкг;
     
      - площадь пятна пробы, мм;
     
      - площадь пятна стандарта, мм;
                 
     - объем воздуха, л, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям по формуле (см. приложение).