МУК 4.1.1147-02

     
     
Методические указания


4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение концентраций Фамоксадона в воздухе рабочей зоны и атмосферном
воздухе методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

     
     
Дата введения 2003-01-01

     
     
     УТВЕРЖДЕНЫ Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации Г.Г.Онищенко
     
     

1. Вводная часть

     
     Фирма-производитель: Дюпон, США.
     
     Торговое название: Танос, КР 481.
     
     Синонимы: JE-874.
     
     Название действующего вещества по ИСО: Фамоксадон.
     
     Название действующего вещества по IUPAC: 3-анилино-5-метил-5-(4-феноксифенил)-2,4-оксазолидиндион.
               

          
     Химически чистый Фамоксадон представляет собой светлый кремовый порошок.
     
     Давление паров: 6,4х10 Ра (4,8х10 мм Hq) при 20 °С.
     
     Температура плавления: 140,3-141,8 °С.
     
     Коэффициент распределения н-октанол-вода: 4,8 (рН 5); 4,65 (рН 7); 5,55 (рН 9).
     
     Растворимость в воде зависит от кислотности среды и составляет 243х10 г/л при рН 5; 111х10 г/л при рН 7, при рН 9 вещество быстро гидролизуется. Растворимость в органических растворителях (г/л при 20 °С): ацетон - 274, ацетонитрил - 125, гексан - 0,0476, дихлорметан - 239, метанол - 10, толуол - 13,3, этилацетат - 124, н-октанол - 1,78.
     
     Фамоксадон нестабилен в водных растворах. Гидролиз наблюдается в диапазоне рН 5-9, и время полураспада составляет 41 день, 2 дня и 93 минуты при рН 5,0; 7,0 и 9,0 соответственно. Период полураспада при фотолизе составляет 4,6 дней и 3,9 часов при рН 5 и 7,75 соответственно.
     
     Краткая гигиеническая характеристика
     
     Фамоксадон относится к малоопасным соединениям по острой (ЛД для крыс - более 5000 мг/кг) и дермальной токсичности (ЛД для крыс - более 2000 мг/кг) и умеренно опасным по ингаляционной (ЛК  (4 часа) 5300 мг/м ) токсичности, не вызывает раздражения глаз и кожи.
     
     В РФ установлены следующие гигиенические нормативы:
     
     ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 1,0 мг/м ;
     
     ОБУВ в атмосферном воздухе - 0,01 мг/м ;
     
     Область применения
     
     Фамоксадон (JE-874) - фунгицид из группы оксазолидиндионов контактного действия с глубинным эффектом. Является ингибитором митохондриального дыхания, специфически связываясь с активным центром убихинол-цитохром С оксидоредуктазы. Используется в заводских смесях с цимоксанилом и флусилазолом в антирезистентных системах применения фунгицидов.
     
     Высокоэффективен против возбудителей из класса Оомицетов, в т.ч. против рас возбудителей, устойчивых к фениламидам. Зарегистрирован в России под названием Танос (DPX-KP 481), диспергируемые в воде гранулы, 50% (25% фамоксадона + 25% цимоксанила) на картофеле с нормой расхода 0,6 кг/га, трехкратная обработка за сезон, проходил испытания на огурцах открытого и закрытого грунта.
     
     

2. Методика измерения концентраций Фамоксадона (ДРХ-JE 874) в воздухе
рабочей зоны и атмосферном воздухе методом
высокоэффективной жидкостной хроматографии

     
2.1. Основные положения

     
2.1.1. Принцип метода

     
     Методика основана на определении вещества с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с ультрафиолетовым детектором.
     
     Отбор проб воздуха осуществляется концентрированием аэрозоля на бумажные фильтры "синяя лента". Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.
     

2.1.2. Избирательность метода

     
     В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии компонентов препаративной формы, в т.ч. Цимоксанила.
     

2.1.3. Метрологическая характеристика метода (Р=0,95)

2.2. Реактивы, растворы и материалы

2.4. Отбор проб

     
     Отбор проб воздуха рабочей зоны следует осуществлять в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 "ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны".
     
     Воздух со скоростью 5 л/мин пропускают через фильтр "синяя лента", помещенный в фильтродержатель.
     
     Для измерения концентрации вещества по п.2.7.1 на уровне 0,013 мг/м, по п.2.7.2 на уровне 0,006 мг/м следует отобрать 75 л воздуха.
     
     Фильтры с отобранными пробами, помещенные в герметически закрываемые склянки, можно хранить в морозильной камере при температуре -18 °С в течение 4 дней.
     

2.5. Подготовка к определению

     
2.5.1. Приготовление 10 мМ фосфатного буферного раствора

     
     1,32 г однозамещенного фосфата калия растворяют в бидистиллированной воде в мерной колбе вместимостью 1000 мл, доводят рН раствора до 3 с помощью ортофосфорной кислоты, контролируя его значение с помощью иономера.
     

2.5.2. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ N 1 (измерение по п.2.7.1)

     Отмеряют 650 мл ацетонитрила, переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл, добавляют 350 мл 10 мМ фосфатного буферного раствора (рН 3), перемешивают, фильтруют и дегазируют.
     

2.5.3. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ N 2 (измерение по п.2.7.2)

     
     Отмеряют 550 мл ацетонитрила, переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл, добавляют 450 мл 10 мМ фосфатного буферного раствора (рН 3), перемешивают, фильтруют и дегазируют.
     

2.5.4. Кондиционирование колонки

     
     Промыть колонку для ВЭЖХ соответствующей подвижной фазой при скорости подачи растворителя 100 мкл/мин (измерение по п.2.7.1) или 1 мл/мин (измерение по п.2.7.2) в течение 30-45 мин до получения стабильной базовой линии.
     

2.5.5. Приготовление стандартных растворов

     
     Основной стандартный раствор фамоксадона (DPX-JE 874) с содержанием 1,0 мг/мл готовят растворением 0,1004 г препарата, содержащего 99,6% д.в., в ацетонитриле в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранится в морозильной камере при   -18 °С в течение 15 дней.
     
     Рабочие стандартные растворы с концентрацией 1,0; 2,0; 5,0; 10,0 и 20,0 мкг/мл (измерение по п.2.7.1) готовят из основного стандартного раствора соответствующим последовательным разбавлением подвижной фазой для ВЭЖХ N 1 (п.2.5.2). Рабочие растворы хранят в морозильной камере при -18 °С не более 3 дней.
     
     Рабочие стандартные растворы с концентрацией 0,025; 0,05; 0,1 и 0,25 мкг/мл (измерение по п.2.7.2) готовят из основного стандартного раствора соответствующим последовательным разбавлением подвижной фазой для ВЭЖХ N 1 (п.2.5.2). Растворы готовят непосредственно перед употреблением.
     

2.5.4. Построение градуировочного графика

     
     2.5.4.1. Градуировочный график А (измерение по п.2.7.1). Для построения градуировочного графика в инжектор хроматографа вводят по 5 мкл рабочего стандартного раствора фамоксадона с концентрацией 1,0; 2,0; 5,0; 10,0 и 20,0 мкг/мл.
     
     2.5.4.2. Градуировочный график В (измерение по п.2.7.2). Для построения градуировочного графика в инжектор хроматографа вводят по 20 мкл рабочего стандартного раствора Фамоксадона с концентрацией 0,025; 0,05; 0,1 и 0,25 мкг/мл.
     
     Осуществляют не менее 5 параллельных измерений. Находят среднее значение высоты хроматографического пика для каждой концентрации. Строят градуировочный график (А или В) зависимости высоты хроматографического пика в мм от концентрации фамоксадона в растворе в мкг/мл.
     

2.6. Описание определения

     
     Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 мл, заливают 10 мл ацетона, оставляют на 10-15 минут, периодически перемешивая. Растворитель сливают, отжимая фильтр стеклянной палочкой. Фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями ацетона объемом 10 мл.
     
     Объединенный экстракт упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 35 °С, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха, остаток растворяют в 1 мл (измерение по п.2.7.1) или в 20 мл (измерение по п.2.7.2) подвижной фазы для ВЭЖХ N 1 (п.2.5.2), фильтруют или центрифугируют для удаления взвеси и хроматографируют.
     

2.7. Условия хроматографирования

     
2.7.1. Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором Милихром (Россия)

     
     Колонка стальная длиной 64 мм, внутренним диаметром 2 мм, содержащая Separon С18, зернением 5 мкм.
     

     Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 20 мкг/мл, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ N 1 (п.2.5.2).
     

2 7.2 Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором Waters

     
     Колонка стальная длиной 25 см, внутренним диаметром 4,6 мм, содержащая Lichrosorb RP-18, зернением 5 мкм
     

     Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 0,25 мкг/мл, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ N 1 (п.2.5.2).
     

2.8. Обработка результатов анализа

     
     Содержание фамоксадона рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:
     

, где

     
      - содержание фамоксадона (DPX-JE 874) в пробе воздуха, мг/м ;
     
      - концентрация Фамоксадона в хроматографируемом растворе, найденная по калибровочному графику, мкг/мл;
     
      - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл;
     
      - объем пробы воздуха, отобранного для анализа, приведенного к стандартным условиям (давление 760 мм рт.ст., температура 20 °С), дм .
     
     

3. Требования техники безопасности

     
     Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами.
     
     

4. Разработчики

     
     Калинин В.А., проф., к.с-х.н., Довгилевич Е.В., ст.н.с., к.биол.н., Калинина Т.С., ст.н.с., к.с-х.н., Довгилевич А.В., ст.н.с., к.хим.н., Устименко Н.В., ст.н.с., к.биол.н.
     
     Московская сельскохозяйственная академия им. К.А.Тимирязева. 127550, Москва, Тимирязевский пр., 2, кафедра химических средств защиты растений. Телефон: 976-43-26.
     
     
     

Текст документа сверен по:
официальное издание
Определение остаточных количеств пестицидов
в пищевых продуктах, сельскохозяйственном сырье
и объектах окружающей среды: Сборник методических
указаний. Выпуск 1. - М.: Федеральный центр
госсанэпиднадзора Минздрава России, 2004