МУК 4.1.816-99

     
     
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

     
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
по измерению концентрации верапамила
[5 (3,4-диметоксифенилэтил)-метиламино-2(3,4-диметоксифенил)-2-
-изопропилвалеронитрил гидрохлорид] в воздухе рабочей зоны
методом жидкостной хроматографии

Дата введения: с момента утверждения

     
     
     УТВЕРЖДЕНЫ Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г.Онищенко 30.12.1999 г.
     
     

CHNO·HCl

М.м.=491,07

          
     Верапамил - кристаллическое вещество белого цвета, без запаха. Растворим в воде, этаноле, хлороформе, нерастворим в эфире.
     
     Температура плавления 142-143 °С. В воздухе находится в виде аэрозоля.
     
     Верапамил обладает чрезвычайно сильным раздражающим действием, оказывает влияние на зрение.
     
     ОБУВ в воздухе 0,2 мг/м.
     
     

Характеристика метода

     
     Определение основано на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением спектрофотометрического детектора.
     
     Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.
     
     Нижний предел измерения - 0,008 мкг в анализируемой пробе раствора (1 мкл).
     
     Нижний предел измерения в воздухе - 0,1 мг/м (при отборе 80 л воздуха).
     
     Диапазон определяемых концентраций - 0,1-1,25 мг/м.
     
     Суммарная погрешность измерения не превышает ±23,5%.
     
     Определению верапамила не мешают бензол, толуол, ксилолы, кумол, анилин.
     
     Длительность анализа, включая отбор проб, 2 часа.
     
     

Реактивы, растворы и материалы

     
     Верапамил, содержание основного вещества 99,5%.
     
     Раствор верапамила в дистиллированной воде, 1 мг/мл.
     
     Этанол, 96°, ГОСТ 5962-67*.
_______________
     * На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 51652-2000. - Примечание изготовителя базы данных.
          
     Ацетонитрил для жидкостной хроматографии, ОП-3, ос.ч., ТУ 6-09-14-2167-84.
     
     Аммония ацетат, х.ч., ГОСТ 3117-68.
     
     0,1 М раствор аммония ацетата (в 1 л дистиллированной воды растворяется 7,7083 г аммония ацетата).
     
     Элюент - ацетонитрил: 0,1 М аммония ацетат (85:15).
     
     Фильтры АФА-ВП-40 ТУ 95.7181-76.
     
     

Приборы, аппаратура и посуда

     
     Хроматограф жидкостный микроколоночный "Милихром" (ПО "Научприбор", г.Орел).
     
     Аппарат для встряхивания пробирок АВ-30С, ТУ 61-1.24-51-78.
     
     Аспирационное устройство.
     
     Испаритель вакуумный ИР-1M, ТУ-25-11-917-76.
     
     Пробирки ПГКШ-5, ГОСТ 1770-74.
     
     Пикнометр ПЖ 2-25-КШ 7/16, ГОСТ 22254-77Е.
     
     Пипетки вместимостью 1; 2; 5 мл, ГОСТ 20292-74* КЛО.
________________
     * Действуют ГОСТ 29169-91, ГОСТ 29227-91-ГОСТ 29229-91, ГОСТ 29251-91-ГОСТ 29253-91. - Примечание изготовителя базы данных.
          
     Фильтродержатель с мембранным капроновым фильтром (25 мм; 0,2 мкм; МО КНПО "Диагностикум").
     
     Металлическая колонка 80x2 мм (заполнена сорбентом силасорб РН С), 5 мкм.
     
     

Отбор пробы воздуха

     
     Воздух с объемным расходом 5 л/мин аспирируют через фильтр АФА-ВП-40, помещенный в фильтродержателе (срок хранения отобранных проб в темном прохладном месте - до 5 дней). Для определения 1/2ОБУВ достаточно отобрать 80 л воздуха.
     
     

Подготовка к измерению

     
     Разбавлением исходного стандартного раствора (1 мг/мл) готовятся градуировочные растворы с концентрацией 8-100 мкг/мл. Срок хранения растворов в темном прохладном месте - 2 недели. По 1 мкл каждого градуировочного раствора вводят в хроматограф.
     
     Калибровочный график строится в координатах - по оси абсцисс - количество вещества в анализируемой пробе (мкг), по оси ординат - площадь пика (мм). Значения площадей пиков определяют по 7 измерениям. Градуировочный график строят каждый раз после приготовления новой серии градуировочных растворов и проверяют его перед исследованием проб воздуха.
     
     Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:
     
     Адсорбент: Силасорб SPHC (5 мкм).
     
     Элюент: смесь 0,1 М раствора аммония ацетата и ацетонитрила в соотношении 15:85.
     
     Скорость подачи элюента 100 мкл/мин.
     
     Длина волны детекции 278 нм.
     
     Диапазон чувствительности детектора 0,4 А.
     
     Чувствительность шкалы электрометра 50 мв.
     
     Скорость движения диаграммной ленты 180 мм/час.
     
     Время удерживания верапамила 3 мин 32 сек.
     
     

Проведение измерения

     
     Фильтр с пробой помещают в пробирку с 3 мл этилового спирта и встряхивают 5 минут. Раствор декантируют, фильтр еще два раза встряхивают с 3 мл этанола. Объединенный спиртовый экстракт упаривают на вакуумном испарителе до 1 мл, фильтруют через фильтр с диаметром пор 0,2 мкм и исследуют на жидкостном хроматографе. 1 мкл полученного раствора вводят в хроматограф аналогично градуировочным растворам.
     
     Количественное определение верапамила в хроматографируемом растворе проводят по предварительно построенному градуировочному графику.
     
     

Расчет концентрации

     
     Концентрацию вещества в воздухе  мг/м рассчитывают по формуле:
     

,

где  - содержание вещества по калибровочному графику, мкг;
               
      - объем пробы, взятый для анализа, мл;
               
      - общий объем пробы, мл;
               
      - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к нормальным условиям (л) (см. Приложение 1).