МУК 4.1.1398-03  

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств пропамокарб гидрохлорида в воде, почве, капусте, огурцах и томатах газохроматографическим методом

    
    
Дата введения 2003-06-30

    
    
    УТВЕРЖДЕНЫ Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации Г.Г.Онищенко 24 июня 2003 г.
    
    

1. Вводная часть

    
    Фирма производитель: Байер Кроп Сайенс (Германия).
    
    Торговое название: ПРЕВИКУР N.
    
    Действующее вещество: пропамокарб гидрохлорид.
    
    Пропил 3-(диметиламино)пропилкарбамат гидрохлорид (ИЮПАК).
    
    Пропил [3-(диметиламино)пропил]карбамат гидрохлорид (Ch.A.).
    
    (СН)N(СН)NНСООСН·НСl
    

    Бесцветное кристаллическое, чрезвычайно гигроскопическое вещество без запаха.
    
    Температура плавления: 45-55 °С.
    
    Растворимость (г/л) при 20 °С: вода - 1005, метанол - 656, дихлорметан - 626, ацетон - 560, этилацетат - 4,34, толуол - 0,14, гексан менее 0,01.
    
    Давление паров при 20 °С: 3,85х10 мПа.
    
    Коэффициент распределения н-октанол/вода: =-2,6 (20 °С).
    
    Вещество стабильно при нормальных условиях хранения, не гидролизуется в водном растворе при различных значениях температуры и рН.
    
    Краткая токсикологическая характеристика
    
    Острая пероральная токсичность (LD) для крыс - 2000-2900, для мышей - 1600-2000 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD) для мышей и крыс более 3000 мг/кг.
    
    Пропамокарб гидрохлорид нетоксичен для пчел, птиц и диких животных.
    
    Гигиенические нормативы: ОДК в почве - 0,1 мг/кг; ПДК в воде - 0,08 мг/дм; ВМДУ в огурцах - 0,05 мг/кг.
    
    Область применения препарата
    
    Пропамокарб гидрохлорид - системный фунгицид с достаточно продолжительным защитным действием, рекомендуемый для борьбы с возбудителями пероноспороза, фитофтороза, черной ножки и корневых гнилей овощных, декоративных культур и табака путем внесения в почву, опрыскиванием вегетирующих растений и обработкой семян, корней рассады, клубней, клубнелуковиц перед посадкой.
    
    Проходит регистрационные испытания в России и странах СНГ под названием Превикур, ВК как средство борьбы с возбудителями пероноспороза и корневых гнилей на огурцах, черной ножки рассады капусты, фитофтороза глоксинии и томатов защищенного грунта, корневых гнилей табака при норме расхода 1,5-5 л/га за обработку. Фунгицид выпускается в виде водорастворимого концентрата, содержащего в 1 л 722 г пропамокарб гидрохлорида (или 607 г пропамокарба).
    
    

2. Методика определения остаточных количеств пропамокарб гидрохлорида в воде, почве, капусте, огурцах и томатах газохроматографическим методом

    
2.1. Основные положения

    
2.1.1. Принцип метода

    
    Метод основан на газохроматографическом определении пропамокарб гидрохлорида с ТИД на неподвижной фазе FFAP после экстракции его из воды диизопропиловым эфиром, из почвы и растительного материала - подкисленным метанолом, очистки экстракта перераспределением в системе растворителей.
    
    Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.
    

2.1.2. Избирательность метода

    
    В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии пестицидов, применяемых при возделывании капусты, огурцов и томатов.
    

2.1.3. Метрологическая характеристика метода

    
    
Таблица

Метрологическая характеристика метода

2.4. Отбор проб

    
    Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.79).
    
    Отобранные пробы воды, почвы и растительного материала хранят в стеклянной таре в холодильнике не более суток. Для длительного хранения пробы почвы доводят до воздушно-сухого состояния и хранят в холодильнике; пробы капусты, огурцов и томатов замораживают и хранят до анализа в морозильной камере при минус 18 °С. Перед анализом сухую почву просеивают через сито с отверстиями диаметром 0,1 мм, а растительный материал измельчают.
    

2.5. Подготовка к определению

    
2.5.1. Подготовка и очистка реактивов и растворителей

    
    Органические растворители перед началом работы очищают, сушат и перегоняют в соответствии с типовыми методиками.
    

2.5.2. Подготовка и кондиционирование колонки

    
    Готовую насадку (5% FFAP на Supelcoport) засыпают в стеклянную колонку, уплотняют под вакуумом, колонку устанавливают в термостат хроматографа, не подсоединяя к детектору, и стабилизируют в токе азота при температуре 230 °С в течение 8-10 ч.
    

2.5.3. Приготовление стандартных растворов

    
    При определении открываемости метода в модельные матрицы вносят аликвоты стандартных растворов пропамокарб гидрохлорида. Основной стандартный раствор пропамокарб гидрохлорида с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 0,013 г препарата, содержащего 76,6% д.в., в 1 н НСl в мерной колбе на 100 мл. Рабочие растворы с концентрациями 1, 5 и 10 мкг/мл получают разбавлением соответственно 1, 5 и 10 мл основного стандартного раствора 1 н НСl до объема 100 мл. Все растворы хранят в холодильнике не более трех месяцев.
    
    Для построения калибровочного графика используют растворы пропамокарба (свободное основание). Основной стандартный раствор пропамокарба с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 0,010 г вещества в диизопропиловом эфире в мерной колбе на 100 мл. Рабочий раствор с концентрацией 10 мкг/мл получают разбавлением 10 мл основного стандартного раствора диизопропиловым эфиром до объема 100 мл. Все растворы хранят в холодильнике не более трех месяцев.
    

2.5.4. Построение калибровочного графика

    
    Для построения калибровочного графика используют растворы с концентрациями 0,25; 0,5; 1,25 и 2,5 мкг/мл, получаемые соответствующим разведением рабочего раствора пропамокарба (свободное основание). Осуществляют не менее 5 параллельных измерений и находят среднее значение высоты хроматографического пика для каждой концентрации. Строят калибровочный график зависимости высоты хроматографического пика вещества в мм от содержания пропамокарба в пробе в мкг/мл.
    

2.6. Описание определения

    
2.6.1. Экстракция пропамокарб гидрохлорида

    
    2.6.1.1. Вода. 100 мл предварительно отфильтрованной воды подкисляют 2 мл 1 н р-ра НСl, упаривают на роторном испарителе при температуре 50 °С (разряжение не ниже 50 мм рт.ст.) до объема 5-10 мл, переносят в делительную воронку емкостью 50 мл, добавляют 0,4 г хлорида натрия, 5 мл 10 н р-ра гидроксида натрия и дважды экстрагируют диизопропиловым эфиром порциями по 2,5 мл при энергичном встряхивании в течение 1 мин. Объединенный эфирный экстракт упаривают в градуированной пробирке на роторном испарителе при температуре 30 °С до объема около 0,5 мл, доводят конечный объем до 1 мл диизопропиловым эфиром и анализируют на содержание пропамокарба по п.2.7.
    
    2.6.1.2. Растительный материал (капуста, огурцы, томаты). Навеску (50 г) измельченного растительного материала помещают в аппарат Сокслета и экстрагируют 300 мл метанола, подкисленного 2 мл 1 н р-ра НСl, в течение 2,5 ч. Экстракт упаривают на роторном испарителе при температуре 40 °С до объема около 2 мл. К водному остатку добавляют 20 мл 0,1 н р-ра НСl и переносят в делительную воронку емкостью 250 мл, приливают 4 мл 10 н р-ра гидроксида натрия (рН р-ра больше 10) и дважды экстрагируют хлороформом порциями по 50 мл при встряхивании в течение 1 минуты. Для четкого разделения фаз экстракт центрифугируют при 4000 g 5 мин при температуре около 10 °С (в случае почвенных образцов разделение фаз происходит без центрифугирования). Объединенный хлороформный экстракт переносят в делительную воронку и трижды экстрагируют 1 н р-ром НСl (2х30 и 1х40 мл) при встряхивании в течение 1 мин. Объединенную водную фазу упаривают на роторном испарителе при температуре 50 °С до объема около 5 мл, переносят в 50 мл делительную воронку, добавляют 4 г хлорида натрия и 10 мл 10 н р-ра гидроксида натрия (рН раствора больше 10) и экстрагируют дважды по 4,5 мл диизопропилового эфира (почвенные образцы экстрагируют дважды по 2 мл диизопропилового эфира). Эфирную фазу переносят в градуированную пробирку с притертой пробкой, доводят объем до 10 мл диизопропиловым эфиром (в случае почвенных образцов конечный объем доводят до 5 мл диизопропиловым эфиром) и анализируют на содержание пропамокарба по п.2.7.
    
    2.6.1.3. Почва. Навеску (50 г) подготовленной почвы помещают в коническую колбу емкостью 250 мл, приливают 100 мл метанола, подкисленного 2 мл 1 н р-ра НСl, и перемешивают в течение 30 мин на аппарате для встряхивания. Затем добавляют 2 г целита и экстракт фильтруют на воронке Бюхнера через бумажный фильтр в колбу на 500 мл. Осадок на фильтре промывают 20 мл подкисленного метанола. Пропамокарб гидрохлорид из почвы повторно экстрагируют 100 мл метанола, подкисленного 2 мл 1 н р-ра НСl. Объединенный фильтрат упаривают на роторном испарителе при 40 °С до объема около 2 мл. Водный остаток переносят 20 мл 0,1 н р-ра НСl в делительную воронку емкостью 250 мл и последовательно обрабатывают хлороформом (2х50 мл) и диизопропиловым эфиром (1х50 мл). Органические фазы отбрасывают. Дальнейшую очистку оставшейся водной фазы проводят так, как описано в п.2.6.1.2. Анализ очищенного экстракта на содержание пропамокарба проводят по п.2.7.
    

2.7. Условия хроматографирования

    
    Газовый хроматограф "Цвет-560" с термоионным детектором с пределом детектирования на азотсодержащие вещества, предел детектирования по азоту (в азобензоле) - 1,5х10 мг/см.
    

    Альтернативная фаза: 2% карбовакса 20 М на Хроматоне N-AW-HMDS (0,20-0,25 мм); колонка стеклянная 2000х2 мм; условия хроматографирования те же.
    
    Каждую анализируемую пробу вводят 3 раза и вычисляют среднюю высоту пика.
    
    Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 3,0 мкг/мл, разбавляют диизопропиловым эфиром.
    

2.8. Обработка результатов анализа

    
    Содержание пропамокарб гидрохлорида рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:
    

, где

    
     - содержание пропамокарб гидрохлорида в пробе, мг/кг; мг/дм;
    
     - высота пика образца, мм;
    
     - высота пика стандарта, мм;
    
     - концентрация стандартного раствора пропамокарба, мкг/мл;
    
     - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл;
    
     - масса (или объем) анализируемого образца, г (мл);
    
     - молекулярная масса пропамокарб гидрохлорида, г;
    
     - молекулярная масса пропамокарба, г.
    
    

3. Требования техники безопасности

    
    Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами и сжатыми газами.
    
    

4. Контроль погрешности измерений

    
    Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями МИ 2335-95. ГСИ "Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа".
    
    

5. Разработчики

    
    Дубовая Л.В.; Талалакина Т.Н.; Макеев А.М., к.биол.н.; Чкаников Д.И., д.биол.н.
    
    ВНИИ фитопатологии, 143050, Московская обл., п/о Большие Вяземы, тел.592-92-20.
    
    
    

Текст документа сверен по:
официальное издание
Сборник методических указаний. Вып.3.
Часть 3. МУК 4.1.1395-4.1.1398-03. -          
М.: Федеральный центр госсанэпиднадзора
Минздрава России, 2004