МУК 4.1.1583-03

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
по измерению концентраций 2-[4-(1,2-Дифенил-1-бутенил)фенокси]-
N,N-диметилэтанамина-(Z)-2-гидрокси-1,2,3-пропантрикарбоксилата
(тамоксифен цитрата) и 2-[4-(1,2-Дифенил-1-бутенил)фенокси]-
N,N-диметилэтанамина (тамоксифен основания) в воздухе рабочей зоны
методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Дата введения: с момента утверждения

    УТВЕРЖДЕНЫ Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г.Онищенко 29 июня 2003 г.     
    

Тамоксифена цитрат

CHNO·СНО               M.м. 563,64


Тамоксифена основание

CHNO                    M.м. 371,51

         
    
    Тамоксифена цитрат, почти белый мелкокристаллический порошок, с температурой плавления 142-145 °С, растворим в метиловом и этиловом спирте, мало растворим в ацетоне, практически не растворим в воде.
    
    Тамоксифена основание, белый кристаллический порошок с температурой плавления 101-102 °С, не растворим в воде, растворим в 95% этиловом спирте и хлороформе.
    
    В воздухе находятся в виде аэрозоля.
    
    Оказывают выраженное раздражающее действие на кожу.
    
    ПДК тамоксифена цитрата и тамоксифена основания в воздухе 0,001 мг/м. 1 класс опасности.
    
    

Характеристика метода

    Методика основана на применении высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением УФ-детектора.
    
    Отбор проб проводится с концентрированием на фильтр.
    
    Нижний предел измерения содержания веществ в хроматографируемом объеме (20 мкл) - 0,08 мкг.
    
    Нижний предел измерения концентрации веществ в воздухе 0,0005 мг/м (при отборе 1600 л воздуха).
    
    Диапазон измеряемых концентраций веществ в воздухе от 0,0005 до 0,0075 мг/м.
    
    Определение веществ избирательно на стадиях сушки, просеивания, фасовки и хранения.
    
    Определению не мешают лимонная кислота, пары этилового и изопропилового спиртов.
    
    Суммарная погрешность измерения не превышает ±20%.
    
    Время выполнения измерения, включая отбор проб, 4 часа.
    
    

Приборы, аппаратура, посуда

    Микроколоночный жидкостной хроматограф "Милихром" или другие модели с УФ-детектором.
    
    Хроматографическая колонка размером 80·2 мм, заполненная твердым сорбентом Силасорб NH.
    
    Весы аналитические ВЛА-200, 2 кл., ГОСТ 24104-88Е.
______________
    * На территории Российской Федерации действует ГОСТ 24104-2001. - Примечание изготовителя базы данных.
         
    Микрошприц МШ-10, ТУ 2833-106.
    
    Аспирационное устройство ПУ-ЗЭ/220 или ПУ-ЗЭ/12.
    
    Фильтродержатели ТУ 95.72.05-77.
    
    Колбы мерные, вместимостью 25, 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74Е.
    
    Колбы круглодонные, вместимостью 50 мл, ГОСТ 19908-74.
    
    Пипетки мерные, вместимостью 1, 2, 5, 10 мл, ГОСТ 29227-91.
    
    Фильтры типа "Миллипор" или "Владипор", с диаметром пор 0,45 мкм, ТУ 6-05-221-433-79.
    
    Роторный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917.76.
    
    Секундомер, ГОСТ 5072-97.
    
    Линейка измерительная металлическая, ГОСТ 8309-75.
    
    Лупа измерительная ЛИ-3-10X, ГОСТ 8309-75.
    
    

Реактивы, растворы, материалы

    Тамоксифен цитрат ВФС 42-2421-94.
    
    Тамоксифен основания (полупродукт в синтезе тамоксифен цитрата). Временный технологический регламент на производство тамоксифен цитрата. ПЭЗ ВНИХФИ. (М., 1992 г.).
    
    Этиловый спирт, ГОСТ 5963-67*.
______________
    * На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 51723-2001. - Примечание изготовителя базы данных.
         
    Метиловый спирт, х.ч., ГОСТ 6995-77.
    
    Дистиллированная вода, ГОСТ 6709-72.
    
    Элюент: метиловый спирт : вода в соотношении 2:8.
    
    Стандартный раствор N 1 тамоксифена основания с концентрацией 200 мкг/мл готовят растворением 0,0200 г вещества в этаноле в мерной колбе вместимостью 100 мл. Раствор хранят в склянке оранжевого стекла в течение двух недель при хранении в холодильнике.
    
    Стандартный раствор N 2 тамоксифена цитрата с концентрацией 200 мкг/мл готовят растворением 0,0200 г вещества в этаноле в мерной колбе вместимостью 100 мл. Раствор хранят в склянке оранжевого стекла в течение двух недель при хранении в холодильнике.
    
    Стандартный раствор N 3 тамоксифена основания с концентрацией 20 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 1 этанолом. Растворы используют свежеприготовленными.
    
    Стандартный раствор N 4 тамоксифена цитрата с концентрацией 20 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 2 этанолом. Растворы используют свежеприготовленными.
    
    Градуировочные растворы с концентрацией 0,16-0,32-0,48-0,8-1,6-2,4 мкг/мл тамоксифена основания и тамоксифена цитрата готовят соответствующим разбавлением этанолом стандартных растворов N 3 и N 4. Растворы используют свежеприготовленными.
    
    Фильтры АФА-ВП-20, ТУ 95-7181-76.
    
    

Отбор пробы воздуха

    Воздух с объемным расходом 100 л/мин аспирируют через фильтр АФА-ВП-20. В патрон за фильтром следует установить металлическую сетку. Для определения 1/2 ПДК следует отобрать 1600 л воздуха. Пробы хранят в защищенном от света месте в течение суток.
    
    

Подготовка к измерению

    По 5 мл каждого градуировочного раствора, что соответствует 0,8-1,6-2,4-4,0-8,0-12,0 мкг, переносят в круглодонную колбу и упаривают досуха под вакуумом в роторном испарителе при температуре 50-60 °С. Сухой остаток растворяют в 0,2 мл элюента (метанол - вода в соотношении 2:8 мл) и анализируют на хроматографе, инжектируя по 20 мкл (0,02 мл), что соответствует 0,08; 0,16; 0,24; 0,40; 0.80; 1,2 мкг вещества.
    
    Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:
    

    
    Время удерживания тамоксифенов в колонке для цитрата и основания одно и то же - 2,3 мин, в связи с разложением соли тамоксифена до тамоксифена основания в условиях среды подвижной фазы.
    
    На основании полученных хроматограмм строят градуировочный график, выражающий зависимость площади пиков (мм) от содержания вещества в хроматографируемом объеме пробы (мкг).
    
    Построение градуировочного графика необходимо проводить не менее чем по 5 точкам, выполняя 5 параллельных измерений для каждого раствора. Проверку градуировочного графика следует проводить при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в месяц,
    
    

Проведение измерения

    Фильтр с отобранной пробой переносят в круглодонную колбу, вместимостью 50 мл, приливают 5 мл этанола и оставляют на 15 минут, периодически помешивая стеклянной палочкой. Затем фильтр тщательно отжимают и удаляют. Степень десорбции вещества с фильтра 97%. Отгоняют этанол при 50-60 °С в роторном испарителе досуха. Сухой остаток растворяют в 0,2 мл подвижной фазы и хроматографируют.
    
    Хроматографирование анализируемого раствора проводят в тех же условиях, что и при построении градуировочного графика.
    
    Количественное определение содержания тамоксифена основания и тамоксифена цитрата в хроматографируемом объеме (мкг) проводят по предварительно построенным градуировочным графикам.
    
    

Расчет концентрации

    Концентрацию определяемых веществ "" в воздухе (мг/м) вычисляют по формуле:
    

*,

где - количество вещества в хроматографируемом объеме пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;
    
     - хроматографируемый объем пробы, взятый для анализа, мл ;
    
     - общий объем раствора пробы, мл;
    
         - объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, л, (Приложение 1).
________________
    * Формула и экспликация к ней соответствуют оригиналу. - Примечание изготовителя базы данных.