МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ФОТОМЕТРИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ СОДЕРЖАНИЯ
ТАНИНА НА КОЖЕ И СПЕЦОДЕЖДЕ
УТВЕРЖДЕНЫ заместителем Главного государственного санитарного врача СССР В.И.Чибураевым 28 сентября 1989 г. N 5131-89
С |
М.м. 1700 |
Танин (галлотанин) представляет собой аморфный светло-желтый порошок. Плотность 1,25 г/см. Хорошо растворим в воде и этиловом спирте. Нерастворим в эфире и хлороформе.
Токсическое вещество, II класс опасности. Проникает через кожу.
1. Характеристика методики
Методика основана на фотометрировании продукта реакции, образованного при взаимодействии танина с молибдатом аммония.
В качестве смывающей жидкости используется дистиллированная вода.
Диапазон измеряемого содержания танина 0,0006-0,015 мг/см.
Граница суммарной погрешности измерения не превышает ±25%.
Определению не мешает галловая кислота.
ПДУ танина на коже и спецодежде не установлены.
2. Реактивы и растворы
Танин, ТУ 6-09-50-2366-80, ч.
Основной раствор с содержанием 1 мг/мл танина готовят растворением 1 г танина в 1 л воды. Раствор устойчив в течение месяца.
Стандартный раствор N 1 с содержанием 50 мкг/мл танина готовят соответствующим разбавлением основного раствора водой. Раствор устойчив в течение двух недель.
Стандартный раствор N 2 с содержанием 20 мкг/мл танина готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 1 водой.
Аммоний молибденовокислый 4-х водный, ГОСТ 3765-72, х.ч., 1% раствор, свежеприготовленный.
Уксусная кислота, ГОСТ 61-75, х.ч., ледяная, 1 м раствор.
Натрий уксуснокислый, ГОСТ 199-68, 1 м раствор.
Буферный раствор (рН=4,1), готовят смешиванием 90 мл 1 м раствора уксусной кислоты с 10 мл 1 м раствора уксуснокислого натрия.
Фильтры "белая лента", ТУ 6-09-1678-77.
Вата гигроскопическая.
Образцы тканей, применяемые в производстве для изготовления спецодежды и белья, размером 5х5 или 10х10 см.
3. Приборы и посуда
Спектрофотометр.
Аппарат для встряхивания жидкостей.
Фарфоровые чашки, ГОСТ 9147-73, диаметром 12 см. рН-метр.
Центрифуга лабораторная.
Воронки стеклянные, ГОСТ 8613-76, диаметром 6 см.
Пробирки колориметрические.
4. Проведение измерения
Условия проведения смыва
Участок кожи 25 см, загрязненный танином, обрабатывают способом обмыва 15 мл дистиллированной воды, помещенной в фарфоровую чашку. Ватным тампоном 0,3 г, смоченным водой, обмывают участок кожного покрова сверху вниз. При этом тампон несколько раз обмакивают в жидкость. В качестве держателя тампона используется пинцет.
Пробы устойчивы в течение 2 дней.
Снимают с рабочего костюма нашивки 100 см или вырезают часть 25 см
, помещают в стеклянную посуду с 10-12 мл воды в зависимости от размера нашивок. Пробы сохраняются в течение 2 дней.
Условия анализа
Вату отжимают, раствор фильтруют через бумажный фильтр. Ватный тампон тщательно промывают в смыве, переносят на воронку с фильтром, через который раствор декантацией фильтруется в цилиндр. Вату отжимают, промывают 5-10 мл воды (дробными порциями). Жидкость присоединяют к основному смыву и измеряют объем. Мутные растворы проб центрифугируют.
Образец ткани отжимают, промывают водой, вновь отжимают, доводят объем экстракта до 20 мл. Если экстракт мутный, то раствор центрифугируют.
К 2 мл смыва приливают 0,5 мл раствора ацетатного буфера, 0,5 мл раствора молибдата аммония. Растворы перемешивают и фотометрируют в кювете с толщиной слоя 1 см при длине волны 364 нм. Раствором сравнения служит смыв с кожи рабочих, не контактирующих с исследуемым веществом, обработанный в условиях анализируемой пробы.
Для построения градуировочного графика готовят шкалу стандартов согласно таблице.
Таблица 19
Шкала стандартов
N стандарта |
Стандартный раствор N 2, мл |
Стандартный раствор N 1,мл |
Дистиллированная |
Содержание танина, мкг |
1 |
0 |
0 |
2,0 |
0 |
2 |
0,1 |
- |
1,9 |
2 |
3 |
0,2 |
- |
1,8 |
4 |
4 |
0,4 |
- |
1,6 |
8 |
5 |
- |
0,2 |
1,8 |
10 |
6 |
- |
0,4 |
1,6 |
20 |
7 |
- |
0,8 |
1,2 |
40 |
8 |
- |
1,0 |
1,0 |
50 |
Пробирки шкалы стандартов обрабатывают аналогично пробам.
Градуировочные растворы устойчивы в течение 2 часов.
Строят градуировочный график: на ось ординат наносят значения оптических плотностей градуировочных растворов, а на ось абсцисс - соответствующие им величины содержания вещества в градуировочном растворе (мкг).
Проверка градуировочного графика проводится 1 раз в 2 месяца или в случае использования новой партии реактивов. Содержание танина (мг/см
) вычисляют по формуле:
,
где - количество искомого вещества во всей пробе, мг;
- площадь исследуемой части тела, см
.