МУК 4.1.859-99

     
     
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

     

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
по измерению концентрации тестостерона пропионата в воздухе рабочей зоны
методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

     
     
Дата введения: с момента утверждения

     
     
     УТВЕРЖДЕНЫ Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г.Онищенко 31.12.1999 г.
          
     

          
     Тестостерона пропионат (андростен-4-ол-17--она-3-пропионат) - химико-фармацевтический препарат. Белый кристаллический порошок с температурой плавления 118-123 °C. Практически нерастворим в воде, легко растворяется в хлороформе, спирте, эфире и в растительных маслах.
     
     В воздухе находится в виде аэрозоля.
     
     Тестостерона пропионат проявляет выраженное кожно-резорбтивное действие. Относится к 1 классу "вещества чрезвычайно опасные".
     
     ПДК в воздухе 0,005 мг/м.
     

Характеристика метода

     
     Метод основан на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением УФ-детектора.
     
     Отбор проб проводится на фильтры АФА-ХА или АФА-ХП.
     
     Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы 0,004 мкг.
     
     Предел измерения в воздухе 0,0025 мг/м (при отборе 80 л воздуха).
     
     Диапазон измеряемых концентраций от 0,0025 до 0,05 мг/м.
     
     Измерению не мешает этилацетат.
     
     Суммарная погрешность не превышает ±16,0%.
     
     Время выполнения измерения, включая отбор проб, 1 час 40 мин.
     

Приборы, аппаратура, посуда

     
     Хроматограф с УФ-детектором для жидкостной хроматографии.
     
     Колонка из нержавеющей стали длиной 0,25 м, диаметром 8,2 мм.
     
     Аспирационное устройство.
     
     Стеклянная мерная посуда, ГОСТ 1770-74E, 23932-79Е.
     
     Весы лабораторные аналитические, ГОСТ 24104-80.
     
     Разновесы Г-22210, 1 класс, ГОСТ 7328-75.
     

Реактивы, растворы и материалы

     
     Тестостерона пропионат.
     
     Спирт метиловый, х.ч., ГОСТ 6995-75.
     
     Силикагель для хроматографии (4,0-5,0 мкм), диаметр пор 6-60 нм.
     
     Насадка: силикагель для хроматографии с размером частиц 4,0-5,0 мкм, диаметром пор 6-60 нм.
     
     Стандартный раствор N 1, содержащий 100 мкг/мл тестостерона пропионата, готовят растворением навески вещества 0,0100 г в 100 мл метанола.
     
     Градуировочные растворы, содержащие 0,2-0,4-1,0-3,0-5,0 мкг/мл, готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 1 метиловым спиртом. Растворы устойчивы в течение 25 дней.
     

Отбор пробы воздуха

     
     Воздух с объемным расходом 5 л/мин аспирируют через фильтры АФА-ХА или АФА-ХП. Для измерения 1/2ПДК вещества следует отобрать 80 л воздуха. Пробы устойчивы в течение недели.
     

Подготовка к измерению

     
     Количественное определение проводят методом абсолютной калибровки по площадям пиков, обсчитываемых с помощью ЭВМ "SР-4100".
     
     Для построения калибровочного графика в хроматограф вводят последовательно по 20 мкл (дозирующая петля) градуировочных растворов, что соответственно равно 0,004-0,008-0,010-0,06-0,10 мкг тестостерона пропионата. Строят градуировочный график, выражающий зависимость площади пиков на хроматограмме (мм) от количества определяемого компонента (мкг). Построение градуировочного графика необходимо проводить по шести точкам, проводя 5 параллельных определений для каждой концентрации.
     
     Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:
     
     Колонка длиной 0,25 м, диаметром 8,2 мм.
     
     Насадка для колонки - силикагель "для хроматографирования" с размером частиц 4,0-5,0 мкм, диаметром пор 6-60 нм.
     
     Температура колонки 50 °С.
     
     Элюент - метанол - подается со скоростью 0,7 мл/мин.
     
     Детектор - ультрафиолетовый, длина волны 280 нм.
     
     Скорость диаграммной ленты 6 см/час.
     
     Объем вводимый пробы 20 мкл.
     
     Время удерживания вещества 15 мин 44 с.
     

Проведение измерения

     
     Фильтр с отобранной пробой помещают в аппарат Сокслетта, заливают 10 мл метанола и экстрагируют в течение 7 мин. Экстракцию повторяют еще дважды. Степень извлечения составляет 98,9%. Объединенные экстракты упаривают в ротационном испарителе при 70 °С. Сухой остаток растворяют в 1,0 мл метанола. Отбирают с помощью шприца 0,5 мл пробы и вводят в хроматограф через инжекторное устройство, снабженное дозирующей петлей объемом 20 мкл. На полученной хроматограмме измеряют площадь пика и по градуировочному графику находят количество вещества в анализируемом объеме пробы (в мкг).
     

Расчет концентрации

     
     Концентрацию тестостерона пропионата "" в воздухе в мг/м вычисляют по формуле:
     

,

где  - содержание вещества, найденное в анализируемом объеме раствора по калибровочному графику, мкг.
                 
      - общий объем пробы, мл;
               
      - объем пробы, взятый для анализа, мл;
          
      - объем воздуха, взятый для анализа и приведенный к стандартным условиям, л (см. Приложение 1).