МУК 4.1.0.336-96
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Измерение концентрации холестерина методом высокоэффективной
жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны
Дата введения: с момента утверждения
РАЗРАБОТАНЫ 2 МОЛГМИ, г.Москва
УТВЕРЖДЕНЫ и.о. Председателя Госкомсанэпиднадзора России - заместителем Главного государственного санитарного врача Российской Федерации Г.Г.Онищенко 8 июня 1996 года
|
М. м. 386,64 |
Холестерин (10-
-(холест-5-ен-3-ол) - кристаллическое вещество белого цвета. Хорошо растворим в диоксане и гексане. Растворим в изопропиловом спирте. Не растворим в воде, метиловом и этиловом спиртах. 
149 °С.
В воздухе находится в виде аэрозоля.
Обладает общетоксическим действием.
ОБУВ в воздухе - 1 мг/м.
Характеристика метода
Метод основан на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением УФ-детектора.
Отбор проб производится с концентрированием на фильтр.
Нижний предел измерения холестерина в хроматографируемом объеме пробы (50 мкл) - 0,2 мкг.
Нижний предел измерения холестерина в воздухе (при отборе 40 л воздуха) - 0,5 мг/м.
Диапазон измеряемых концентраций холестерина в воздухе от 0,5 до 10 мг/м
.
Определению не мешает динитробензонат эргокальциферола.
Суммарная погрешность измерения не превышает ±20%.
Время выполнения измерения, включая отбор пробы, - около 40 мин.
Приборы, аппаратура, посуда
Микроколоночный жидкостный хроматограф "Милихром" или другие модели с УФ-детектором |
|
Хроматографическая колонка длиной 120 мм, внутренним диаметром 2 мм, заполненная сорбентом "Силасорб 600" с размером зерен 7,0 мкм (ЧСФР) |
|
Электроаспиратор ЭА-1 |
ОСТ 95.10052-84 |
Фильтродержатель |
|
Колбы мерные, вместимостью 100 мл |
ГОСТ 1770-74 |
Пипетки, вместимостью 1, 10 мл |
ГОСТ 20292-74 |
Пробирки с пришлифованными пробками, вместимостью 10 мл |
ГОСТ 10515-75 |
Реактивы, растворы, материалы
Холестерин, фармакопейный |
|
Гексан, х.ч. |
ТУ 6-09-3375-78 |
Гексан очищенный получают из гексана путем ректификации. Ректификационная колонка длиной 550 мм и внутренним диаметром 20 мм, флегмовое число 5. Насадка - спиральки Левина из нержавеющей стали (2х2х0,2 мм). Основную фракцию отбирают при температуре 69 °С (атмосферное давление) в пределах колебаний ±0,1°С.
Изопропанол, х. ч. |
ТУ 9805-76 |
Изопропанол очищенный получают из изопропанола путем ректификации. Ректификационная колонка длиной 550 мм и внутренним диаметром 20 мм, флегмовое число 5. Насадка - спиральки Левина из нержавеющей стали (2х2х0,2 мм). Основную фракцию отбирают при температуре 82,4 °С (атмосферное давление) в пределах колебаний ±0,1 °С.
Элюент: гексан-изопропанол (50:1).
Основной стандартный раствор с концентрацией холестерина 200 мкг/мл готовят растворением 0,02 г вещества в элюенте в мерной колбе вместимостью 100 мл.
Раствор устойчив при хранении в холодильнике в течение недели.
Фильтры аналитические стекловолокнистые |
ТУ 8-ЮП-1-77 |
Отбор пробы воздуха
Воздух с объемным расходом 10 л/мин аспирируют через аналитический стекловолокнистый фильтр. Для определения 0,5 ОБУВ достаточно отобрать 40 л воздуха.
Пробы можно хранить в закрытых сосудах в холодильнике в течение месяца.
Подготовка к измерению
Хроматографическая колонка промышленного изготовления.
Инжектируют в хроматограф от 0,2 до 4 мкг из основного стандартного раствора.
Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:
температура термостата колонки |
+20 °С; |
скорость подачи элюента гексан:изопропанол (50:1) |
200 мкл/мин; |
длина волны УФ-детектора |
212 нм; |
скорость движения диаграммной ленты |
6 мм/мин; |
чувствительность детектора |
0,2-0,8; |
диапазон измерения самописца |
100 мВ; |
максимальный объем вводимой пробы |
50 мкл; |
время удерживания холестерина |
5 мин 15 с; |
элюирующий объем |
1050 мкл; |
эффективность колонки по холестерину |
4600 тт. |
На полученной хроматограмме измеряют площади пиков и строят градуировочную кривую, выражающую зависимость площади пиков (мм
) от содержания холестерина в хроматографируемом объеме пробы (мкг).
Построение градуировочного графика необходимо проводить не менее чем по 6 точкам, выполняя по 5 параллельных измерений для каждого инжектируемого объема. Проверку градуировочного графика следует проводить при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в месяц.
Проведение измерения
Фильтр с отобранной пробой помещают в пробирку с пришлифованной пробкой, добавляют 5 мл элюента и оставляют на 15 мин при комнатной температуре, периодически перемешивая. Степень десорбции с фильтра 96,5%.
Хроматографирование анализируемого раствора проводят в тех же условиях по отношению к тому же элюенту, что и при построении градуировочного графика.
Количественное определение содержания холестерина в хроматографируемом объеме проводят по предварительно построенному градуировочному графику.
Расчет концентрации
Концентрацию холестерина "
" в воздухе (мг/м
) вычисляют по формуле:
, где
- содержание холестерина в хроматографируемом объеме, найденное по градуировочному графику, мкг;
- объем раствора пробы, взятой для анализа, мл;
- общий объем анализируемого раствора, мл;
- объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, л (см. приложение 1).
Текст документа сверен по:
официальное издание
Измерение концентраций вредных
веществ в воздухе рабочей зоны:
Сборник методических указаний.
МУК 4.1.0.272-4.1.0.340-96. Вып.31. -
М.: Федеральный центр Госсанэпиднадзора
Минздрава России, 1999