МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
по хроматографическому измерению концентраций бициклата
в воздухе рабочей зоны

    
    
    УТВЕРЖДЕНЫ заместителем Главного государственного санитарного врача СССР А.И.Заиченко 12 декабря 1988 г. N 4899-88
    
    

М. м. 250,5

         
    Жидкость - желтого цвета, температура кипения 64°С (0,075 мм рт.ст.). Давление паров 7,5·10 мм рт.ст. при 20 °С. Хорошо растворим в ацетоне, метаноле, ксилоле (при 25 °С 1000 г/л), хуже растворим в н-гексане (130 г/л). Растворимость в воде 2,2 г/л.
    
    В воздухе находится в виде паров и аэрозоля.
    
    Бициклат относится к высокотоксичным фосфорорганическим пестицидам, опасным при попадании на кожу. Кумулятивный эффект проявляется слабо.
    
    В механизме токсического действия этого пестицида ведущее значение имеет угнетение функции нервной системы, печени и почек.
    
    ПДК бициклата в воздухе 0,5 мг/м.
    
    

Характеристика метода

    
    Метод основан на использовании газожидкостной (с пламенно-фотометрическим детектором) и тонкослойной хроматографии.
    
    Отбор проб с концентрированием - бумажный фильтр "синяя лента", ацетон-вода 7:3.
    
    Нижний предел измерения в хроматографируемом объеме 0,005 мкг (ГЖХ), 2 мкг (ТСХ).
    
    Нижний предел измерения в воздухе 0,1 мг/м (ГЖХ), 0,2 мг/м (ТСХ), (при отборе 10 л воздуха).
    
    Диапазон измеряемых концентраций - 0,1-1 мг/м.
    
    Измерению не мешают наполнители технического препарата.
    
    Суммарная погрешность определения ±23%.
    
    Время выполнения измерения, включая отбор проб, - 2 часа.
    
    

А. Газохроматографический метод

Приборы, аппаратура, посуда

    
    Хроматограф с пламенно-фотометрическим (ПФД) детектором по фосфору (тип Цвет-164 и др.).
    
    Микрошприц МШ, на 10 мкл.
    
    Колонка стеклянная, длина 1 м, диаметр 3 мм.
    
    Аспирационное устройство.
    
    Поглотительные приборы с пористой пластинкой N 1.
    
    Ротационный испаритель с набором колб марки ИР-1 и ТУ 25-11-91776.
    
    Фильтры бумажные "синяя лента", ТУ 6-09-1678-77.
    
    Секундомер.
    
    Фильтродержатели.
    
    Пипетки, колбы, мерная посуда, ГОСТ 20292-74 и ГОСТ 1770-74.
    
    

Реактивы, растворы, материалы

    
    Ацетон, ч., ГОСТ 2603-79.
    
    Хлороформ, ч., ГОСТ 20015-74.
    
    Сульфат натрия безводный, ч., ГОСТ 4166-76.
    
    Хроматрон N-AW с 5% SE-30 (Хемапол, ЧССР).
    
    Стандартный раствор N 1 бициклата с содержанием 100 мкг/мл.
    
    Готовят растворением 10 мг препарата в мерной колбе на 100 мл ацетона. Хранят в холодильнике, устойчив в течение 2-х месяцев.
    
    Стандартные растворы бициклата с содержанием 10, 5 и 1 мкг/мл готовят соответствующим разведением ацетоном стандартного раствора N 1. Хранят не более 5 дней.
    
    Азот газообразный, ГОСТ 9293-74.
    
    Водород газообразный, ГОСТ 3022-70.
    
    

Отбор проб воздуха

    
    Воздух с объемным расходом 1 л/мин последовательно аспирируют через помещенный в фильтродержатель фильтр "синяя лента" и поглотитель, содержащий 10 мл смеси ацетон-вода 7:3 (при охлаждении льдом).
    
    Для определения 1/2 ПДК достаточно отобрать 10 л воздуха. Длительность хранения пробы в холодильнике (+4 °С) не более 2-х дней.
    
    

Подготовка к измерению

    
    Хроматографическую колонку с помощью вакуума заполняют готовой насадкой (около 2 г) - Хроматон N-AW с 5% SE-30 и кондиционируют при 220 °С в течение 5-6 часов в токе газа-носителя.
    
    Градуировочные растворы с содержанием бициклата от 1 до 10 мкг/мл готовят соответствующим разведением стандартного раствора N 1 ацетоном согласно таблице. Стандартные растворы бициклата устойчивы при хранении в холодильнике в течение 5 дней.
    
    

Таблица 2

    
Шкала градуировочных растворов

    
    
    Вводят 5 мкл каждого градуировочного раствора в хроматограф через самоуплотняющуюся мембрану. Строят градуировочную кривую, выражающую зависимость высоты пика (мм) от концентрации компонента (мкг/мл).
    
    Для каждой концентрации проводят не менее 5 параллельных измерений.     
    

Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб*

________________
    * При необходимости для работы можно использовать термоионный детектор (ТИД).
         

Проведение измерения

    
    Бумажный фильтр, содержащий аэрозоль, из фильтродержателя переносят в коническую колбу и заливают 20 мл ацетона. Экстрагируют бициклат в течение 30 мин. Экстракцию повторяют дважды. Объединяют, сушат безводным сульфатом натрия и сливают в колбу для отгонки растворителей.
    
    Смесь ацетон-вода 7:3 из поглотителя переносят в делительную воронку, прибавляют 200 мл дистиллированной воды и реэкстрагируют препарат дважды по 20 мл хлороформом. Объединенный хлороформный экстракт сушат безводным сульфатом натрия (5-7 г) и сливают в колбу для отгонки растворителей, где находится экстрат из фильтра. Концентрируют растворитель при температуре бани не выше 50 °С до объема 0,2-0,3 мл, досуха упаривают на воздухе.
    
    Остаток в колбе растворяют в 1 мл ацетона и 5 мкл микрошприцем вводят в испаритель хроматографа через самоуплотняющуюся мембрану. Записывают хроматограмму, замеряют высоту пика и по градуировочному графику находят концентрацию измеряемого компонента.
    
    

Расчет концентрации

    
    Концентрацию бициклата в мг/м "" вычисляют по формуле:
    

, где

     - концентрация вещества, найденная в поглотительном растворе по градуировочному графику, мкг/мл;
    
     - общий объем поглотительного раствора, мл;
    
     - объем воздуха, отобранный для анализа, приведенный к стандартным условиям, л.
    
    

Б. Метод тонкослойной хроматографии

Приборы, аппаратура, посуда

    
    Аспирационное устройство.
    
    Поглотительные приборы с пористой пластинкой N 1.
    
    Ротационный испаритель с набором колб марки ИР-IM, ТУ 25-11-917-76.
    
    Фильтры бумажные "синяя лента", ТУ 6-09-1678-77.
    
    Фильтродержатели, ТУ 25-11-1062-75.
    
    Пипетки, колбы, мерная посуда, ГОСТ 20292-74 и ГОСТ 1770-74.
    
    Облучатель ртутно-кварцевый, ТУ 64-1-1618-82.
    
    Камера хроматографическая, ГОСТ 1770-74.
    
    Пульвелизатор стеклянный, ГОСТ 10391-79.
    
    

Реактивы, растворы, материалы

    
    Ацетон, ч., ГОСТ 2603-79.
    
    Хлороформ, ч., ГОСТ 20015-79.
    
    Сульфат натрия безводный, ч., ГОСТ 4166-76.
    
    Аммиак водный 25%, ГОСТ 3760-79.
    
    н-Гексан, ч., ТУ 6-09-3375-78.
    
    Диэтиловый эфир, х.ч., ГОСТ 6662-79.
    
    Нитрат серебра, ч.д.а., ГОСТ 1277-79.
    
    Пластинки "силуфол" (Хемапол, ЧССР).
    
    Стандартный раствор бициклата, содержащий 100 мкг/мл вещества, готовят растворением 10 мг препарата в мерной колбе на 100 мл в ацетоне.
    
    Проявляющий реактив - водно-ацетоновый раствор аммиака серебра. 0,5 г нитрата серебра растворяют в 5 мл дистиллированной воды, добавляют 7 мл аммиаката (=0,9 г/см) и доводят до 100 мл ацетоном. Срок хранения 5-6 дней в холодильнике. Подвижная фаза гексан-ацетон 2:1.
    
    

Отбор проб воздуха

    
    Воздух со скоростью 1 л/мин последовательно аспирируют через помещенный в фильтродержатель фильтр "синяя лента" и поглотитель, содержащий 10 мл смеси ацетон-вода 7:3 (при охлаждении льдом).
    
    Для определения 1/2 ПДК следует отобрать 10 л воздуха. Длительность хранения пробы в холодильнике (+4 °С) не более 2-х дней.
    
    

Проведение измерения

    
    Бумажный фильтр, содержащий аэрозоль, из фильтродержателя переносят в коническую колбу и заливают 20 мл раствора. Экстрагируют бициклат в течение 30 мин. Экстракцию повторяют дважды. Объединяют экстракт, сушат безводным сульфатом натрия и сливают в колбу для отгонки растворителей. Смесь ацетон-вода 7:3 из поглотителя переносят в делительную воронку, прибавляют 200 мл дистиллированной воды и реэкстрагируют препарат дважды по 20 мл хлороформом. Объединенный хлороформный экстракт сушат безводным сульфатом натрия (5-7 г) и сливают в колбу для отгонки растворителей, где находится экстракт из фильтра. Концентрируют растворитель при температуре бани не выше 50 °С до объема 0,2-0,3 мл. Остаток в колбе количественно наносят при помощи капиллярной пипетки на хроматографическую пластинку так, чтобы диаметр пятна не превышал 1,5 см. Колбу с экстрактом смывают небольшими порциями диэтилового эфира, который наносят в центр пятна. Справа и слева от пятна наносят серию стандартных растворов, содержащих 2, 5, 7 и 10 мкг препарата. Пластинку с нанесенными растворами помещают в хроматографическую камеру, в которую за 30 мин до хроматографирования залита смесь гексан-ацетон 2:1. После поднятия фронта подвижного растворителя на 10 см пластинку вынимают и оставляют на несколько минут на воздухе для испарения подвижного растворителя. После этого пластинку обрабатывают из пульверизатора водно-ацетоновым раствором нитрата серебра и подвергают УФ-облучению в течение 30 мин. Бициклат проявляется в виде черного пятна на белом фоне.
    

    
    Количественное определение пестицида проводят путем сравнения интенсивности окраски и измерения площади пятна пробы и стандартного раствора. Измерение площади проводят с помощью миллиметровой бумаги. Прямолинейная зависимость между интенсивностью и площадью пятна с содержанием препарата в пятне соблюдается и интервале 2-10 мкг.
    
    

Расчет концентрации

    
    Концентрацию вещества "" в воздухе (в мг/м) вычисляют по формуле:
    

, где

     - количество вещества, найденное в пробе, мкг;
    
     - объем воздуха (в л), отобранный для анализа, приведенный к стандартным условиям (см. Приложение 1).
    
    
    
Текст документа сверен по:
Методические указания по измерению концентрации
вредных веществ в воздухе рабочей зоны. Вып.25. -
М.: Информационно-издательский центр
Госкомсанэпиднадзора Российской Федерации, 1994