МУК 4.1.1612-03

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
по газохроматографическому измерению концентраций
17-этинилэстратриен-1,3,5(10)-диола-3,17В (этинилэстрадиол)
в воздухе рабочей зоны

Дата введения: с момента утверждения

    УТВЕРЖДЕНЫ Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г.Онищенко 29 июня 2003 г.
    
    

         
    
    Этинилэстрадиол (17-этинилэстратриен-1,3,5(10)-диол-3,17В) - белый или кремовато-белый мелкокристаллический порошок.
    
    =181-186 °C. Практически не растворим в воде, растворим в спирте, ацетоне, хлороформе, тетрагидрофуране, диэтиловом эфире и растительных маслах.
    
    В воздухе находится в виде аэрозоля.
    
    Высокоопасное вещество (I класс опасности).
    
    В воздухе рабочей зоны не должен присутствовать.
    
    

Характеристика метода

    Определение этинилэстрадиола основано на использовании газовой хроматографии на приборе с электронно-захватным детектором с предварительным превращением этинилэстрадиола в его бис-трифторацетат.
    
    Отбор проб проводится с концентрированием на фильтр.
    
    Предел измерения содержания этинилэстрадиола 0,0025 мкг в анализируемой пробе.
    
    Предел измерения концентрации этинилэстрадиола в воздухе - 0,0001 мг/м (при отборе 2400 л воздуха).
    
    Диапазон измеряемых концентраций в воздухе от 0,0001 до 0,01 мг/м.
    
    Определению этинилэстрадиола не мешают эстрон и тестостерон.
    
    Время выполнения измерения, включая отбор проб, 1 час.
    
    Суммарная погрешность измерения не превышает ±20%.
    
    

Приборы, аппаратура и посуда

    Газовый хроматограф "Агат" с электронно-захватным детектором.
    
    Колонка хроматографическая стеклянная длиной 1,5 м и внутренним диаметром 2 мм.
    
    Весы аналитические ВЛА-200, ГОСТ 24104-88E*.
______________
    * На территории Российской Федерации действует ГОСТ 24104-2001. - Примечание изготовителя базы данных.
    
    Микрошприц вместимостью 10 мкл МШ-10, ТУ 2.833-106.
    
    Пробирки колориметрические вместимостью 10 мл, ГОСТ 1770-74E.
    
    Колбы мерные вместимостью 25 и 100 мл, ГОСТ 1770-74Е.
    
    Пипетки вместимостью 1, 2, 5 и 10 мл, ГОСТ 29227-91.
    
    Ротационный испаритель ИР-1М с набором колб, TУ 25-11-917-76.
    
    Аппарат для встряхивания пробирок АВ-30С, ТУ 64-1-2451-785.
    
    Электроаспиратор с расходомером ЭА-2С-М1, ТУ 2.840.016.
    
    Фильтродержатель ТУ 95-72-05-77.
    
    Допускается применение других приборов и вспомогательного оборудования с техническими и метрологическими характеристиками не хуже указанных выше.
    
    

Реактивы, растворы и материалы

    Этинилэстрадиол, содержание основного вещества не менее 99%.
    
    Тетрагидрофуран, х.ч., ТУ 6-09-3686-77.
    
    Трифторуксусный ангидрид, х.ч., ТУ 6-09-4135-75.
    
    Пиридин, х.ч., ГОСТ 13647-78.
    
    Фильтры АФА-ВП-10, ТУ 95-743-80.
    
    Азот газообразный в баллонах, о.с.ч., ГОСТ 9293-74.
    
    Хроматон N-AW c 5% фазы SE-30 - сорбент для хроматографической колонки с дисперсностью 0,1…..*-0,20 мм.
________________
    * Брак оригинала. - Примечание изготовителя базы данных.
    
    Раствор трифторуксусного ангидрида в тетрагидрофуране готовят путем разведения 10 мл трифторуксусного ангидрида в 100 мл свежеперегнанного тетрагидрофурана. Раствор хранят не более недели.
    
    Основной стандартный раствор этинилэстрадиола с концентрацией 0,1 мг/мл готовят растворением 10 мг этинилэстрадиола в мерной колбе вместимостью 100 мл в тетрагидрофуране.
    
    Градуировочные растворы этинилэстрадиола с концентрацией от 0,05 мкг/мл до 5,0 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением основного стандартного раствора тетрагидрофураном.
    
    Срок хранения растворов в холодильнике 2 недели.
    
    Стандартные градуировочные растворы этинилэстрадиола с концентрациями 0,0001, 0,001, 0,002, 0,004, 0,01 мг/мл готовят путем соответствующего разведения основного стандартного раствора тетрагидрофураном.
    
    Срок хранения растворов в холодильнике 2 недели.
    
    

Отбор пробы воздуха

    Воздух с объемным расходом 100 л/мин аспирируют через фильтр, закрепленный в фильтродержателе, снабженный металлической сеткой. Для определения этинилэстрадиола на уровне 0,0001 мг/м следует отобрать 2400 л воздуха. Экспонированный фильтр складывают в 4 раза и помещает в бюкс с притертой крышкой. Фильтр хранят в холодильнике не более недели.
    
    

Подготовка к измерению

    Хроматографическую колонку заполняют сорбентом и кондиционирует в токе газа-носителя (скорость газа-носителя 50 л/мин) при отключенном детекторе, постепенно повышая температуру от 50 до 280 °С со скоростью 2 град/мин и выдерживают при 280 °С в течение 24 часов. После этого колонку присоединяют к детектору, снижают температуру до рабочей.
    
    В пробирки с притертыми пробками отбирают по 7 мл градуировочных растворов, добавляет 1 мл 10%-ного раствора трифторуксусного ангидрида в тетрагидрофуране и несколько капель пиридина. В результате реакции ацилирования образуется трифторацетат этинилэстрадиола с выходом 100%.
    
    Смесь выдерживают при комнатной температуре в течение 5 минут, затем переносят в колбу ротационного испарителя и отгоняют растворитель при комнатной температуре.
    
    Сухой остаток растворяют в 0,5 мл свежеприготовленного тетрагидрофурона и вводят по 5 мкл каждого градуировочного раствора в испаритель хроматографа через самоуплотняющуюся мембрану.
    
    На основании полученных данных строят градуировочную кривую, выражающую зависимость высоты пика (мм) от содержания вещества в градуировочном растворе (мкг).
    
    Построение градуировочного графика необходимо проводить по 5 точкам, проводя 5 параллельных определений для каждой концентрации.     
    

Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб

Проведение измерения

    Фильтр с отобранной пробой помещают в пробирку, заливают 3 мл свежеприготовленного тетрагидрофурана и встряхивает в течение 5 минут. Раствор сливают, отжимая фильтр стеклянной палочкой, затем операцию повторяют еще 2 раза, используя для экстракции по 2 мл тетрагидрофурана. Степень десорбции с фильтра 98%. Экстракты объединяют. Далее анализ проводят аналогично градуировочным растворам.
    
    

Расчет концентрации

    Концентрацию этинилэстрадиола "" в воздухе (в мг/м) рассчитывают по формуле:
    

,

где - содержание трифторацетата этинилэстрадиола в хроматографируемом объеме, найденное по градуировочному графику, мкг;
    
     - общий объем раствора пробы, мл;
    
     - объем раствора пробы, взятый для хроматографирования, мл;
    
     - объем воздуха (л), отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям (см. Приложение 1).