МУК 4.1.1414-03  

    
    
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

    
Измерение концентраций кломазона в воздухе рабочей зоны
методами высокоэффективной жидкостной и газожидкостной хроматографии

    
    
Дата введения 2003-06-30

    
    УТВЕРЖДЕНЫ Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации Г.Г.Онищенко 24 июня 2003 г.
    
    

1. Вводная часть

    
    Фирма-производитель: ФМС (США).
    
    Торговое название: КОММАНД.
    
    Действующее вещество: кломазон
    
    2-(2-хлорбензил)-4,4-диметил-3-изоксалидин-3-он (ИЮПАК)
   
     

         
    Эмпирическая формула: CHClNO                                                  М.м.: 239,7
    
    
    Светло-коричневая вязкая жидкость
    
    Температура плавления: 25 °С.
    
    Температура кипения: 275 °С.
    
    Давление паров при 25 °С: 19,2 мПа.
    
    Коэффициент распределения н-октанол/вода: =2,5.
    
    Хорошо растворим в ацетоне, гексане, этаноле, метаноле, хлороформе, дихлорметане и ацетонитриле; растворимость в воде - 1,10 г/дм.
    
    Стабилен при комнатной температуре не менее 2 лет, при 50 °С - не менее 3 месяцев.
    
    Может присутствовать в воздухе рабочей зоны в виде паров и аэрозоля.
    
    Краткая токсикологическая характеристика. Острая пероральная токсичность () для крыс - 1369 - 2077 мг/кг; острая дермальная токсичность () для крыс - более 2000 мг/кг.
    
    Гигиенические нормативы. ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 1,0 мг/м ОБУВ в атмосферном воздухе - 0,02 мг/м.
    
    Область применения препарата. Кломазон - гербицид избирательного действия, применяемый для борьбы со злаковыми и двудольными сорными растениями в посевах сои и риса при довсходовом или предпосевном внесении.
    
    

2. Методика измерения концентраций кломазона в воздухе рабочей зоны
методами высокоэффективной жидкостной и газожидкостной хроматографии

    
2.1. Основные положения

    
2.1.1. Принцип методики

    
    Методика основана на определении кломазона с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с ультрафиолетовым детектором или газожидкостной хроматографии с детектором постоянной скорости рекомбинации.
    
    Отбор проб воздуха осуществляется концентрированием аэрозоля на бумажные фильтры "синяя лента", паров - на пористый пенополиуретан или в органический растворитель. Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.
    

2.1.2. Избирательность метода

    
    В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии компонентов препаративной формы, а также пестицидов, применяемых при возделывании риса и сои.
    

2.1.3. Метрологическая характеристика метода (=0,95)

    
    Число параллельных определений - 6.
    
    Предел обнаружения в хроматографируемом объеме - 10 нг (измерение по п.2.7.1, ВЭЖХ); 2 нг (измерение по п.2.7.2, ГЖХ).
    
    Предел обнаружения в воздухе (при отборе 20 л) - 0,20 мг/м (ВЭЖХ); 0,1 мг/м (ГЖХ).
    
    Диапазон определяемых концентраций - 0,20-4,0 мг/м (ВЭЖХ); 0,1-2,0 мг/м (ГЖХ).
    
    Среднее значение определения - 93,8%.
    
    Стандартное отклонение () - 5,44%.
    
    Относительное стандартное отклонение () - 2,20%.
    
    Доверительный интервал среднего - 5,66%.
    
    Суммарная погрешность измерения не превышает 17% (ВЭЖХ) и 11% (ГЖХ).
    

2.2. Реактивы, растворы и материалы

    
2.3. Приборы, аппаратура, посуда

    
    Жидкостный хроматограф Милихром с ультрафиолетовым детектором.
    
    Хроматографическая колонка стальная, длиной 64 мм, внутренним диаметром 2 мм, заполненная Силасорбом 600, зернением 5 мкм.
    
    Хроматограф газовый серии "Цвет" или аналогичный, снабженный детектором постоянной скорости рекомбинации (ДПР) с пределом детектирования по линдану 4·10 г/см.
    

    
2.4. Отбор проб

    
    Отбор проб воздуха рабочей зоны следует осуществлять в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 "ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны".
    
    Воздух со скоростью 1 л/мин пропускают через систему 1, состоящую из последовательно соединенных фильтродержателя с фильтром "синяя лента" и склянку Дрекселя с 50 мл н-гексана, охлаждаемую льдом, или систему 2, состоящую из фильтродержателя с фильтром "синяя лента" и стеклянной трубки, заполненной измельченным пенополиуретаном.
    
    Для измерения 0,5 ОБУВ следует отобрать 8 (ВЭЖХ) или 4 л (ГЖХ) воздуха.
    
    Отобранные пробы можно хранить в холодильнике не более 5 дней.
    

2.5. Подготовка к определению

    
2.5.1. Метод ВЭЖХ

    
2.5.1.1. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ

    
    В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают с помощью пипетки 0,5 мл метанола, доливают до метки хлористым метиленом, перемешивают, фильтруют.
    

2.5.1.2. Кондиционирование колонки

    
    Промыть колонку для ВЭЖХ смесью хлористый метилен-метанол (99,5:0,5, по объему) в течение 30 мин при скорости подачи растворителя 100 мкл/мин.
    

2.5.2. Метод ГЖХ. Подготовка и кондиционирование колонки

    
    Готовую насадку (5% SE-30 на Хроматоне N-AW-GMDS) засыпают в стеклянную колонку, уплотняют под вакуумом, колонку устанавливают в термостате хроматографа, не подсоединяя к детектору, и стабилизируют в токе азота при температуре 250 °С в течение 10-12 ч.
    

2.5.3. Приготовление стандартных растворов

    
    Стандартный раствор кломазона с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 0,0100 г вещества в хлористом метилене (измерение по п.2.7.1) или гексане (измерение по п.2.7.2) в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранится в холодильнике в течение месяца.
    
    Рабочие стандартные растворы с концентрацией 2,0; 4,0; 10; 20 и 40 мкг/мл готовят из раствора, содержащего 100 мкг/мл кломазона, соответствующим последовательным разбавлением хлористым метиленом или гексаном при измерении по п.2.7.1 или 2.7.2, соответственно. Растворы хранятся в холодильнике в течение 10 дней.
    

2.5.4. Построение градуирочного графика

    
    2.5.4.1. Градуировочный график А (измерение по п.2.7.1, ВЭЖХ).
    
    Для построения градуировочного графика в инжектор хроматографа вводят по 5 мкл рабочего стандартного раствора кломазона в хлористом метилене с концентрацией 2,0; 4,0; 10; 20 и 40 мкг/мл.
    
    2.5.4.2. Градуировочный график В (измерение по п.2.7.2, ГЖХ)
    
    Для построения градуировочного графика в испаритель хроматографа вводят по 1 мкл рабочего стандартного раствора кломазона с концентрацией 2,0; 4,0; 10; 20 и 40 мкг/мл.
    
    Осуществляют не менее 5 параллельных измерений. Находят среднее значение высоты хроматографического пика для каждой концентрации. Строят градуировочный график (А или В) зависимости высоты хроматографического пика в мм от концентрации кломазона в растворе в мкг/мл.
    

2.6. Описание определения

    
    Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 мл, заливают 10 мл гексана, оставляют на 5-7 мин, периодически перемешивая. Растворитель сливают, отжимая фильтр стеклянной палочкой. Фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями гексана объемом 10 мл.
    
    При использовании пробоотборной системы 1 экстракт с фильтра объединяют с гексаном из склянки Дрекселя.
    
    При использовании пробоотборной системы 2 трубку с пенополиуретаном помещают в центрифужную пробирку, содержащую 4-5 мл гексана, и прокачивают растворитель несколько раз через трубку с помощью резиновой груши. Экстракт объединяют с экстрактом с фильтра.
    
    Объединенный экстракт упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани 35-40 °С почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха, остаток растворяют в 2 мл хлористого метилена (измерение по п.2.7.1) или 1 мл гексана (измерение по п.2.7.2) и хроматографируют.
    

2.7. Условия хроматографирования

    
2.7.1. ВЭЖХ

    
    Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором Милихром (Россия).
    
    Колонка стальная длиной 64 мм, внутренним диаметром 2 мм, заполненная Силасорбом 600, зернением 5 мкм.
    
    Температура колонки: комнатная.
    
    Подвижная фаза: хлористый метилен - метанол (99,5:0,5, по объему).
    
    Скорость потока элюента: 100 мкл/мин.
    
    Рабочая длина волны: 240 нм.
    
    Чувствительность: 0,4 ед. абсорбции на шкалу.
    
    Объем вводимой пробы: 5 мкл.
    
    Время выхода кломазона: около 4 мин.
    
    Линейный диапазон детектирования: 10-200 нг.
    
    Образцы, дающие пики, большие, чем стандартный раствор с концентрацией 40 мкг/мл, разбавляют хлористым метиленом.
    

2.7.2. ГЖХ

    
    Хроматограф газовый "Цвет-570" с детектором постоянной скорости рекомбинации ионов с пределом детектирования по линдану 4·10 г/см.
    
    2.7.2.1. Колонка стеклянная длиной 1 м, внутренним диаметром 3 мм, заполненная Хроматоном N-AW-GMDS с 5% SE-30 (0,125-0,16 мм).
    
    Рабочая шкала электрометра 64·10 Ом.
    
    Скорость движения ленты самописца 240 мм/ч.
    
    Температура термостата колонки - 170 °С.     
    

                                            
    Скорость газа-носителя (азота) - 30 мл/мин.
    
    Объем вводимой пробы - 1 мкл.
    
    Время выхода кломазона - 1 мин 10 с.
    
    Линейный диапазон детектирования: 2-40 нг.
    
    2.7.2.2. Альтернативная неподвижная фаза - колонка стеклянная, длиной 2 м, внутренним диаметром 3 мм, заполненная Хроматоном N-AW-GMDS с 5% OV-210 (0,16-0,20 мм).
    
    Рабочая шкала электрометра 32·10 Ом.
    
    Скорость движения ленты самописца 240 мм/ч.
    
    Температура термостата колонки - 185 °С     
    

    
    Скорость газа-носителя (азота) - 30 мл/мин.
    
    Объем вводимой пробы - 1 мкл.
    
    Время выхода кломазона - 1 мин 20 с.
    
    Линейный диапазон детектирования: 2-40 нг.
    
    Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 40 мкг/мл, разбавляют гексаном.
    
    Для повышения точности идентификации кломазона при совместном присутствии в пробе -ГХЦГ, имеющего близкое время удерживания, кломазон удаляется из пробы обработкой концентрированной серной кислотой. Повторный анализ пробы позволяет установить вклад кломазона в первичный хроматографический сигнал.
    

2.8. Обработка результатов анализа

    
    Содержание кломазона рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:
    

,

где - содержание кломазона в пробе воздуха, мг/м;

     - концентрация кломазона в хроматографируемом растворе, найденная по калибровочному графику, мкг/мл;
    
     - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл;
    
     - объем пробы воздуха, отобранного для анализа, приведенного к стандартным условиям (давление 760 мм рт.ст., температура 20 °С), дм.
    

,

    
где - температура воздуха при отборе пробы (на входе в аспиратор), °С;
    
     - атмосферное давление при отборе пробы, мм рт.ст.;
    
     - расход воздуха при отборе пробы, дм/мин;
    
     - длительность отбора пробы, мин.
    
    

3. Требования техники безопасности

    
    Необходимо соблюдать все необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях в соответствии с "Правилами устройства, техники безопасности, производственной санитарии противоэпидемиологического режима и личной гигиены при работе в лечебных и санитарно-эпидемиологических учреждениях системы МЗ СССР" (N 2455-81 от 20.10.81), а также требования, изложенные в документации на прибор.
    
    

4. Контроль погрешности измерений

    
    Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями МИ 2335-95 ГСИ "Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа".
    
    

5. Разработчики

    
    Давидюк Е.И. (УкрНИИГИНТОКС, г.Киев).
    
    Юдина Т.В., Федорова Н.Е. (Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф.Эрисмана, г.Мытищи Московской обл.).