МУК 4.1.1406-03  

    
    
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

    
    
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

    
Измерение концентраций абамектина
методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны

    
    
Дата введения 2003-06-30

    
    
    УТВЕРЖДЕНЫ Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации Г.Г.Онищенко 24 июня 2003 г.
    
    
    Настоящие методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения в воздухе рабочей зоны массовой концентрации абамектина в диапазоне 0,01-0,25 мг/м.
    
    Абамектин - действующее вещество препарата Вертимек, фирма-производитель "Сингента" (Швейцария).
    
    Смесь 5-О-деметилавермектина А (авермектин В) и 5-О-деметил-25-де(1-метилпропил)-25-(1-метилэтил)авермектина А (авермектин В) в соотношении 4:1 (С.А.).
    
    

         
    
    Авермектин В - СНО, молекулярная масса 873,1.
    
    Авермектин В - CHO, молекулярная масса 859,1.
    
    Кристаллическое вещество белого или желтовато-белого цвета, без запаха. Температура плавления: 150-155 °С (с разложением). Давление паров при 20 °С: менее 20 нПа. Растворимость в органических растворителях при 21 °С (г/л): ацетон - 100; метанол - 19,5; этанол - 20; хлороформ - 25; циклогексан - 6. Растворимость в воде при 20 °С - 7-10 мкг/л. Вещество не гидролизуется в водном растворе при рН 5-9.
    
    Агрегатное состояние в воздухе рабочей зоны - аэрозоль.
    
    Область применения препарата вертимек
    
    Препарат изготовляется в виде эмульгоконцентрата, содержащего 1,8% абамектина. Он может применяться в качестве инсектоакарицида широкого спектра действия для уничтожения членистоногих, включая клещей и насекомых, на хлопчатнике, картофеле, табаке, сое, яблонях, грушах, овощных и декоративных культурах в течение вегетационного периода. Вертимек проходит регистрационные испытания в России и странах СНГ с нормой расхода 300-750 мл/га на картофеле и в яблоневых садах.
    
    

1. Погрешность измерений

    
    Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью, не превышающей ±25%, при доверительной вероятности 0,95.
    
    

2. Метод измерения

    
    Измерения концентраций абамектина выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на обращенной фазе с флуоресцентным детектором после превращения абамектина во флуорогенное производное.
    
    Концентрирование абамектина из воздуха осуществляют на бумажные фильтры "синяя лента", экстракцию с фильтра проводят этанолом.
    
    Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.
    
    Определению не мешают компоненты препаративной формы, а также пестициды, применяемые при возделывании яблонь, картофеля и декоративных культур.
    
    

3. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы

    
3.1. Средства измерений

    
    Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.
    

3.2. Реактивы

    
    Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией.
    

3.3. Вспомогательные устройства, материалы

    
    Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.
    
    

4. Требования безопасности

    
    4.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими, легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.005.
    
    4.2. При выполнении измерений с использованием жидкостного хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019 и инструкцией по эксплуатации прибора.
    
    

5. Требования к квалификации операторов

    
    К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на жидкостном хроматографе.
    
    

6. Условия измерений

    
    При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
    
    - процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20±5) °С и относительной влажности не более 80%.
    
    - выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.
    
    

7. Подготовка к выполнению измерений

    
    Перед выполнением измерений проводят очистку ацетонитрила (при необходимости), подготовку подвижной фазы для ВЭЖХ, приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, установление градуировочной характеристики, отбор проб.
    

7.1. Очистка ацетонитрила

    
    Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора не менее 1 ч, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия.
    

7.2. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ

    
    В мерную колбу вместимостью 1000 см помещают 950 см метанола, добавляют 50 см бидистиллированной или деионизированной воды, перемешивают, фильтруют и дегазируют.
    

7.3. Кондиционирование хроматографической колонки

    
    Промывают колонку подвижной фазой (приготовленной по п.7.2) при скорости подачи растворителя 1 см/мин до установления стабильной базовой линии.
    

7.4. Приготовление реактива для дериватизации

    
    Смешивают трифторуксусный ангидрид и свежеперегнанный ацетонитрил в объеме 1:2. Реактив годен к употреблению в течение рабочего дня.
    

7.5. Приготовление градуировочных растворов

    
7.5.1. Исходный раствор абамектина для градуировки (концентрация 100 мкг/см)

    
    В мерную колбу вместимостью 100 см помещают 0,011 г абамектина, доводят до метки ацетонитрилом, тщательно перемешивают. Раствор можно хранить в морозильной камере не более 2 месяцев (температура не выше -10 °С).
    
    Растворы NN 1-5 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного стандартного раствора.
    

7.5.2. Раствор N 1 абамектина для градуировки (концентрация 1 мкг/см)

    
    В мерную колбу вместимостью 100 см помещают 1 см исходного стандартного раствора абамектина с концентрацией 100 мкг/см (п.7.5.1), разбавляют ацетонитрилом до метки. Раствор хранится в морозильной камере в течение 10-ти дней.
    

7.5.3. Рабочие растворы N 2-5 абамектина для градуировки (концентрация 0,01-0,1 мкг/см)

    
    В 4 мерные колбы вместимостью 100 см помещают по 1,0; 2,0; 5,0 и 10,0 см стандартного раствора N 1 с концентрацией 1 мкг/см (п.7.5.2), доводят до метки ацетонитрилом, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы NN 2-5 с концентрацией абамектина 0,01; 0,02; 0,05 и 0,10 мкг/см, соответственно.
    
    Растворы хранятся в морозильной камере не более 2 недель.
    

7.6. Отбор проб

    
    Отбор проб воздуха проводят в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 "ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны". В течение 15 мин последовательно отбирают 7 проб, для чего воздух аспирируют в течение 2 мин с объемным расходом 2 дм/мин через бумажный фильтр "синяя лента", помещенный в фильтродержатель.
    
    Срок хранения отобранных проб, помещенных в полиэтиленовые пакеты, в морозильной камере при температуре не выше -10 °С - 5 дней.
    

7.7. Установление градуировочной характеристики

    
    Градуировочную характеристику, выражающую зависимость высоты пика от концентрации абамектина в растворе (мкг/см), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4 растворам флуорогенного производного абамектина для градуировки.
    
    Для построения градуировочной характеристики в градуированные пробирки вместимостью 5 см вносят по 1 см каждого из 4 рабочих растворов абамектина NN 2-5 и проводят их дериватизацию по п.8.2.
    
    В инжектор хроматографа вводят по 50 мм каждого полученного раствора флуорогенного производного абамектина и анализируют в условиях хроматографирования по п.7.7.1. Осуществляют не менее 3 параллельных измерений.
    

7.7.1. Условия хроматографирования

    
    Измерения выполняют при следующих режимных параметрах:
    
    жидкостной хроматограф с флуоресцентным детектором;
    
    колонка стальная длиной 15 см, внутренним диаметром 4,0 мм, содержащая Диасорб-130-CT, зернением 8 мкм;
    
    температура колонки: комнатная;
    
    подвижная фаза: метанол-вода (95:5, по объему);
    
    скорость потока элюента: 1,5 см/мин;
    
    длина волны: возбуждение - 365 нм,
                             
                           эмиссия - 470 нм;
    
    чувствительность детектора: 2;
    
    объем вводимой пробы: 50 мм;
    
    ориентировочное время выхода флуорогенного производного абамектина: 6,6-7,3 мин;
    
    линейный диапазон детектирования: 0,5-5,0 нг.
    
    Образцы, дающие пики, большие чем стандартный раствор абамектина с концентрацией 0,1 мкг/см, разбавляют подвижной фазой (подготовленной по п.7.2).
    
    Градуировочный график проверяют ежедневно по анализу 2 стандартных растворов различной концентрации. Если значения высоты отличаются более чем на 12% от данных, заложенных в градуировочную характеристику, ее строят заново, используя свежеприготовленные рабочие стандартные растворы.
    
    

8. Выполнение измерений

    
8.1. Экстракция абамектина

    
    Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 см, заливают 10 см этанола, выдерживают 4-5 минут, периодически перемешивая. Растворитель сливают в мерный цилиндр, отжимая фильтр стеклянной палочкой. Фильтр затем повторно обрабатывают порцией этанола объемом 10 см.
    
    Объединенный экстракт доводят этанолом до объема 20 см, отбирают аликвоту 5 см, переносят в грушевидную колбу и упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 30 °С досуха, остаток подвергают дериватизации по п.8.2.
    

8.2. Получение флуорогенного производного абамектина

    
    Сухой остаток, полученный по п.8.1, растворяют в 1 см ацетонитрила, приливают 0,1 см 1-N-метилимидазола и содержимое перемешивают. Смесь охлаждают до 0-5 °С (лед с водой), добавляют по каплям 0,3 см реактива для дериватизации, подготовленного по п.7.4, перемешивают и выдерживают в течение 10 мин при комнатной температуре. К полученной смеси добавляют 3,6 см ацетонитрила (общий объем раствора 5 см) и 50 мм полученного раствора анализируют по п.7.7.1.
    
    Пробу вводят в инжектор хроматографа не менее двух раз. Устанавливают высоту пика, с помощью градуировочного графика определяют концентрацию абамектина в хроматографируемом растворе.
    
    Перед анализом опытной пробы проводят хроматографирование холостой (контрольной) пробы - экстракта неэкспонированного фильтра.
    
    

9. Обработка результатов измерений

    
    Массовую концентрацию абамектина в пробе воздуха рабочей зоны , мг/м, рассчитывают по формуле:
    

,

    
где - концентрация абамектина в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной высоты хроматографического пика, мкг/см;
    
     - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см;
    
     - объем пробы воздуха, отобранный для анализа, приведенный к стандартным условиям (давление 760 мм рт.ст., температура 20 °С), дм.
    

,

    
где - температура воздуха при отборе пробы (на входе в аспиратор), °С,

     - атмосферное давление при отборе пробы, мм рт.ст.
    
     - расход воздуха при отборе пробы, дм/мин,
    
     - длительность отбора пробы, мин.
    
    Примечание. Идентификация и расчет концентрации абамектина в пробах могут быть проведены с помощью программ обработки хроматографических данных с применением компьютера, включенного в аналитическую систему.
    
    

10. Оформление результатов измерений

    
    За результат анализа () принимается среднее арифметическое результатов двух параллельных определений и (), расхождение между которыми не превышает значений норматива оперативного контроля сходимости (): .
    

, мг/м,

    
где - норматив оперативного контроля сходимости, мг/м;
    
     - норматив оперативного контроля сходимости,  % (равен 15%).
    
    Результат количественного анализа представляют в виде:
    
    - результат анализа (мг/м), характеристика погрешности , %, =0,95 или мг/м, =0,95, где
    

, мг/м

    
    Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и погрешность.
    
    

11. Контроль погрешности измерений

    
    Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями МИ 2335-95 "ГСИ. Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа".
    
    

12. Разработчики

    
    Макеев А.М., Чверткина Л.В., Чкаников Д.И. (ВНИИ фитопатологии); Юдина Т.В., Федорова Н.Е. (Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф.Эрисмана).



Текст документа сверен по:
официальное издание
Определение остаточных количеств пестицидов
в пищевых продуктах, сельскохозяйственном
сырье и объектах окружающей среды:
Сборник методических указаний. Выпуск 3. Часть 5. -
М.: Федеральный центр гигиены
и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2006