МУК 4.1.1353-03

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение массовых концентраций
3-[3-(4-бром-[1,1-бифенил]-4ил)-1,2,3,4-тетрагидро-1-
нафталенил]-4-гидрокси-2Н-1-бензопиран-2-он (бродифакума)
методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
в воздухе рабочей зоны

Дата введения: с момента утверждения

    РАЗРАБОТАНЫ НИИ медицины труда РАМН (Е.Н.Грицун, А.В.Кудряшов); НПЦ "Родемос" (В.С.Лапко).
    
    УТВЕРЖДЕНЫ Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации Г.Г.Онищенко 16 мая 2003 г.
    
    

1. Область применения

    Настоящие методические указания устанавливают количественный анализ воздуха рабочей зоны на содержание бродифакума методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в диапазоне концентраций 0,0005-0,005 мг/м.
    
    

2. Характеристика вещества

    2.1. Структурная формула     
    

    2.2. Эмпирическая формула CHBrO.
    
    2.3. Молекулярная масса 523,45.
    
    2.4. Регистрационный номер CAS 56073-10-0.
    
    2.5. Физико-химические свойства.
    
    Бродифакум - кристаллический порошок белого цвета, 228-232 °С, не растворим в воде, эфире, гексане, хорошо растворим в хлороформе, ацетоне, этаноле.
    
    Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль.
    
    2.6. Токсикологическая характеристика.
    
    Бродифакум является антикоагулянтом (нарушает свертываемость крови, повышает проницаемость сосудов).
    
    Ориентировочный безопасный уровень воздействия (ОБУВ) бродифакума в воздухе рабочей зоны 0,001 мг/м.
    
    

3. Погрешность измерений

    Методика обеспечивает выполнение измерений бродифакума с погрешностью, не превышающей ±13% при доверительной вероятности 0,95.
    
    

4. Метод измерений

    Измерение массовой концентрации бродифакума выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с УФ-детектированием при длине волны 280 нм.
    
    Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.
    
    Нижний предел измерения содержания бродифакума в анализируемом объеме пробы - 0,01 мкг.
    
    Нижний предел измерения концентрации бродифакума в воздухе 0,0005 мг/м (при отборе 240 дм воздуха).
    
    Измерению не мешают сопутствующие вещества: бромадиалон, дифенацин, хлорфасинон.
    
    

5. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы,
реактивы, растворы

    При выполнении измерений применяют следующие средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы, растворы.
    

5.1. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы

    
5.2. Реактивы растворы

    
    Допускается использование других средств измерения, вспомогательного оборудования, материалов и реактивов с техническими и метрологическими характеристиками и квалификацией не хуже утвержденных в разделе.
    
    

6. Требования безопасности

    6.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работы с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.005-88.
    
    6.2. При проведении анализов горючих и вредных веществ должны соблюдаться требования противопожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-76.
    
    6.3. При выполнении измерений с использованием жидкостного хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.
    
    

7. Требования к квалификации оператора

    К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются лица  с высшим и среднеспециальным образованием, прошедшие обучение работе на жидкостном хроматографе.
    
    

8. Условия измерений

    8.1. Приготовление растворов и подготовку проб к анализу проводят при температуре воздуха (20±5) °С, атмосферном давлении 84,0-106,6 кПа и относительной влажности воздуха не более 80%.
    
    8.2. Выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.
    
    

9. Подготовка к выполнению измерений

    Перед выполнением измерений проводят следующие работы: приготовление растворов, подготовку жидкостного хроматографа, установление градуировочной характеристики, отбор проб.
    

9.1. Приготовление раствора

    9.1.1. Основной стандартный раствор бродифакума в хлороформе с концентрацией 1 мг/см готовят растворением 26,3 мг бродифакума (с учетом % содержания основного вещества) в мерной колбе вместимостью 25 см. Раствор устойчив в течение недели при хранении в холодильнике.
    
    9.1.2. Стандартный раствор N 1 с концентрацией 40 мкг/см готовят разведением 1 см основного стандартного раствора хлороформом в мерной колбе, вместимостью 25 см. Раствор устойчив в течение недели при хранении в холодильнике.
    
    9.1.3. Градуировочные растворы с концентрацией бродифакума от 0,4 до 4,0 мкг/см готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 1 хлороформом. Растворы устойчивы в течение недели при хранении в холодильнике.
    
    9.1.4. Состав элюента: А-ацетонитрил: метанол =1:1
    
    В-ортофосфорная кислота (0,1%, по объему). Ортофосфорную кислоту 0,1%-ную (по объему) готовят следующим образом: к 99,9 см бидистиллированной воды приливают 0,1 см ортофосорной кислоты.
    
    А:В=95:5 (по объему).
    

9.2. Подготовка прибора

    Подготовку жидкостного хроматографа проводят в соответствии с руководством по его эксплуатации.
    

9.3. Установление градуировочной характеристики

    Градуировочную характеристику устанавливают методом абсолютной градуировки. Для этого вводят в хроматограф по 25 мм каждого градуировочного раствора.
    
    Гpaдyировочный график строят в координатах: количество введенного бродифакума (мкг) - площадь пика (приборные единицы). Градуировку выполняют по 6 точкам, проводя 5 параллельных определений для каждой концентрации согласно табл.1
    
    

Таблица 1

Растворы для установления градуировочной характеристики при определении бродифакума

    
    Проверку градуировочного графика проводят не реже 1 раза в 3 месяца и при изменении условий анализа.
    

9.4. Отбор проб воздуха

    Воздух с объемным расходом 20 дм/мин аспирируют через фильтр "синяя лента", помещенный в фильтродержатель. Для измерения ОБУВ бродифакума следует отобрать 240 дм воздуха.
    
    Отобранные пробы могут храниться в течение месяца в пробирках с притертыми пробками.
    
    

10. Выполнение измерения

    Фильтр с отобранной пробой помещают в химический стакан вместимостью 25 см и дважды экстрагируют хлороформом по 5 см. Экстракты объединяют и переносят в остродонную колбу и упаривают на ротационном испарителе досуха при температуре 40 °С. Степень десорбции бродифакума с фильтра 98%. Сухой остаток растворяют в 0,3 см хлороформа. Хроматографический анализ проб выполняют в тех же условиях, что и хроматографирование градуировочных растворов.
    
    Количественное содержание бродифакума в хроматографируемом объеме (в мкг) определяют по предварительно построенному градуировочному графику.
    
    

11. Вычисление результатов измерения

    Концентрацию бродифакума в воздухе (, мг/м) вычисляют по формуле:
    

, где

     - содержание бродифакума в хроматографируемом объеме, найденное по градуировочному графику, мкг;
    
     - общий объем раствора пробы, мм;
    
     - объем раствора пробы, взятой для анализа, мм;
    
     - объем воздуха, отобранного для анализа (дм) и приведенного к стандартным условиям (прилож.1).
    
    

12. Оформление результатов анализа

    Результат количественного анализа представляют в виде:
    

() мг/м, , значение мг/м, где

     - характеристика погрешности.
    
     - значение массовой концентрации анализируемого компонента в пробе.
    
    

13. Контроль погрешности методики КХА

    Значения характеристики погрешности, норматива оперативного контроля погрешности и норматива оперативного контроля воспроизводимости приведены в табл.2.
    
    

Таблица 2

    
    
    Метрологические характеристики приведены в виде зависимости от значения массовой концентрации анализируемого компонента в пробе ();
    

13.1. Оперативный контроль погрешности

    Оперативный контроль погрешности выполняют в одной серии с КХА рабочих проб.
    
    Образцами для контроля являются реальные пробы воздуха рабочей зоны. Объем отобранной для контроля пробы должен соответствовать удвоенному объему, необходимому для проведения анализа по методике.
    
    После отбора пробы экстракт с фильтра делят на две равные части, первую из которых анализируют в точном соответствии с прописью методики и получают результат анализа исходной рабочей пробы (). Вторую часть разбавляют соответствующим растворителем в два раза и снова делят на две равные части, первую из которых анализируют в точном соответствии с прописью методики, получая результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза (). Во вторую часть делают добавку анализируемого компонента () до массовой концентрации исходной рабочей пробы () (общая концентрация не должна выходить за верхнюю границу диапазона измерения) и анализируют в точном соответствии с прописью методики, получая результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза, с добавкой (). Результаты анализа исходной рабочей пробы , рабочей пробы, разбавленной в два раза () и рабочей пробы, разбавленной в два раза с добавкой () получают по возможности в одинаковых условиях, т.е. их получает один аналитик с использованием одного набора мерной посуды, одной партии реактивов и т.д.
    
    Решение об удовлетворительной погрешности принимают при выполнении условия:
    

, где

     - результат анализа рабочей пробы;
    
     - результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза;
    
     - результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза, с добавкой анализируемого компонента;
    
     - величина добавки анализируемого компонента;
    
     - норматив оперативного контроля погрешности.
    

мг/м

13.2. Оперативный контроль воспроизводимости

    Образцами для контроля являются реальные пробы воздуха рабочей зоны. Объем отобранной для контроля пробы должен соответствовать удвоенному объему, необходимому для проведения анализа по методике. После отбора пробы экстракт с фильтра делят на две равные части и анализируют в точном соответствии с прописью методики, максимально варьируя условия проведения анализа, т.е. получают два результата анализа в разных лабораториях или в одной, используя при этом разные наборы мерной посуды, разные партии реактивов. Два результата анализа не должны отличаться друг от друга на величину допускаемых расхождений между результатами анализа:
    

, где

     - результат анализа рабочей пробы;
    
     - результат анализа этой же пробы, полученный в другой лаборатории или в этой же, но другим аналитиком с использованием другого набора мерной посуды и других партий реактивов;
    
     - допустимые расхождения между результатами анализа одной и той же пробы.
    

мг/м

    При превышении норматива оперативного контроля воспроизводимости эксперимент повторяют. При повторном превышении указанного норматива , выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля, и устраняют их.
    
    

14. Нормы затрат времени на анализ

    Для проведения серии анализов из 6 проб требуется 1 ч 30 мин.



Текст документа сверен по:
Измерение концентраций вредных веществ
в воздухе рабочей зоны: Методические указания.
Вып.41. МУК 4.1.1352-4.1.1370-03. -
М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии
Роспотребнадзора, 2006