МУК 4.1.816-99

    
    
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

    
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
по измерению концентрации верапамила
[5 (3,4-диметоксифенилэтил)-метиламино-2(3,4-диметоксифенил)-2-
-изопропилвалеронитрил гидрохлорид] в воздухе рабочей зоны
методом жидкостной хроматографии

Дата введения: с момента утверждения

    
    
    УТВЕРЖДЕНЫ Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г.Онищенко 30.12.1999 г.
    
    

CHNO·HCl

М.м.=491,07

         
    Верапамил - кристаллическое вещество белого цвета, без запаха. Растворим в воде, этаноле, хлороформе, нерастворим в эфире.
    
    Температура плавления 142-143 °С. В воздухе находится в виде аэрозоля.
    
    Верапамил обладает чрезвычайно сильным раздражающим действием, оказывает влияние на зрение.
    
    ОБУВ в воздухе 0,2 мг/м.
    
    

Характеристика метода

    
    Определение основано на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением спектрофотометрического детектора.
    
    Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.
    
    Нижний предел измерения - 0,008 мкг в анализируемой пробе раствора (1 мкл).
    
    Нижний предел измерения в воздухе - 0,1 мг/м (при отборе 80 л воздуха).
    
    Диапазон определяемых концентраций - 0,1-1,25 мг/м.
    
    Суммарная погрешность измерения не превышает ±23,5%.
    
    Определению верапамила не мешают бензол, толуол, ксилолы, кумол, анилин.
    
    Длительность анализа, включая отбор проб, 2 часа.
    
    

Реактивы, растворы и материалы

    
    Верапамил, содержание основного вещества 99,5%.
    
    Раствор верапамила в дистиллированной воде, 1 мг/мл.
    
    Этанол, 96°, ГОСТ 5962-67*.
_______________
    * На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 51652-2000. - Примечание изготовителя базы данных.
         
    Ацетонитрил для жидкостной хроматографии, ОП-3, ос.ч., ТУ 6-09-14-2167-84.
    
    Аммония ацетат, х.ч., ГОСТ 3117-68.
    
    0,1 М раствор аммония ацетата (в 1 л дистиллированной воды растворяется 7,7083 г аммония ацетата).
    
    Элюент - ацетонитрил: 0,1 М аммония ацетат (85:15).
    
    Фильтры АФА-ВП-40 ТУ 95.7181-76.
    
    

Приборы, аппаратура и посуда

    
    Хроматограф жидкостный микроколоночный "Милихром" (ПО "Научприбор", г.Орел).
    
    Аппарат для встряхивания пробирок АВ-30С, ТУ 61-1.24-51-78.
    
    Аспирационное устройство.
    
    Испаритель вакуумный ИР-1M, ТУ-25-11-917-76.
    
    Пробирки ПГКШ-5, ГОСТ 1770-74.
    
    Пикнометр ПЖ 2-25-КШ 7/16, ГОСТ 22254-77Е.
    
    Пипетки вместимостью 1; 2; 5 мл, ГОСТ 20292-74* КЛО.
________________
    * Действуют ГОСТ 29169-91, ГОСТ 29227-91-ГОСТ 29229-91, ГОСТ 29251-91-ГОСТ 29253-91. - Примечание изготовителя базы данных.
         
    Фильтродержатель с мембранным капроновым фильтром (25 мм; 0,2 мкм; МО КНПО "Диагностикум").
    
    Металлическая колонка 80x2 мм (заполнена сорбентом силасорб РН С), 5 мкм.
    
    

Отбор пробы воздуха

    
    Воздух с объемным расходом 5 л/мин аспирируют через фильтр АФА-ВП-40, помещенный в фильтродержателе (срок хранения отобранных проб в темном прохладном месте - до 5 дней). Для определения 1/2ОБУВ достаточно отобрать 80 л воздуха.
    
    

Подготовка к измерению

    
    Разбавлением исходного стандартного раствора (1 мг/мл) готовятся градуировочные растворы с концентрацией 8-100 мкг/мл. Срок хранения растворов в темном прохладном месте - 2 недели. По 1 мкл каждого градуировочного раствора вводят в хроматограф.
    
    Калибровочный график строится в координатах - по оси абсцисс - количество вещества в анализируемой пробе (мкг), по оси ординат - площадь пика (мм). Значения площадей пиков определяют по 7 измерениям. Градуировочный график строят каждый раз после приготовления новой серии градуировочных растворов и проверяют его перед исследованием проб воздуха.
    
    Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:
    
    Адсорбент: Силасорб SPHC (5 мкм).
    
    Элюент: смесь 0,1 М раствора аммония ацетата и ацетонитрила в соотношении 15:85.
    
    Скорость подачи элюента 100 мкл/мин.
    
    Длина волны детекции 278 нм.
    
    Диапазон чувствительности детектора 0,4 А.
    
    Чувствительность шкалы электрометра 50 мв.
    
    Скорость движения диаграммной ленты 180 мм/час.
    
    Время удерживания верапамила 3 мин 32 сек.
    
    

Проведение измерения

    
    Фильтр с пробой помещают в пробирку с 3 мл этилового спирта и встряхивают 5 минут. Раствор декантируют, фильтр еще два раза встряхивают с 3 мл этанола. Объединенный спиртовый экстракт упаривают на вакуумном испарителе до 1 мл, фильтруют через фильтр с диаметром пор 0,2 мкм и исследуют на жидкостном хроматографе. 1 мкл полученного раствора вводят в хроматограф аналогично градуировочным растворам.
    
    Количественное определение верапамила в хроматографируемом растворе проводят по предварительно построенному градуировочному графику.
    
    

Расчет концентрации

    
    Концентрацию вещества в воздухе мг/м рассчитывают по формуле:
    

,

где - содержание вещества по калибровочному графику, мкг;
              
     - объем пробы, взятый для анализа, мл;
              
     - общий объем пробы, мл;
              
     - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к нормальным условиям (л) (см. Приложение 1).