МУК 4.1.914-99

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
по измерению концентраций 2-(4-метил-1-пиперазинил)-10-метил-3,4-
диазофенаксазина дигидрохлорида дигидрат (aзaфенa) в воздухе рабочей зоны
методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

    
Дата введения: с момента утверждения

    УТВЕРЖДЕНЫ Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г.Онищенко 30.12.1999 г.
    
    

М.м. 388,3

    Азафен (2-(4-метил-1-пиперазинил)-10-метил-3,4-диазофенаксазина дигидрохлорида дигидрат) - кристаллическое вещество светло-желтого или светло-зеленого цвета. Растворим в воде. Нерастворим в спиртах, хлороформе, эфире. 310-315 °С.
    
    В воздухе находится в виде аэрозоля.
    
    Обладает общетоксическим действием.
    
    ОБУВ в воздухе 0,4 мг/м.
    
    

Характеристика метода

    
    Методика основана на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением  УФ-детектора.
    
    Отбор проб проводится с концентрированием на фильтр.
    
    Нижний предел измерения азафена в хроматографируемом объеме (50 мкл) 0,05 мкг.
    
    Нижний предел измерения концентрации азафена в воздухе 0,2 мг/м (при отборе 25 л воздуха).
    
    Диапазон измеряемых концентраций азафена в воздухе от 0,2 до 4 мг/м.
    
    Определению не мешает присутствие пикалина и диазафеноксазина.
    
    Суммарная погрешность измерения не превышает ±19,57%.
    
    Время выполнения измерения, включая отбор пробы, около 40 минут.
    
    

Приборы, аппаратура, посуда

    
    Микроколоночный жидкостной хроматограф "Милихром" или другие модели с УФ-детектором.
    
    Хроматографическая колонка длиной 100 мм, внутренним диаметром 2 мм, заполненная сорбентом "Силасорб С" с размером зерен 7,0 мкм.
    
    Стеклянная ректификационная колонна длиной 550 мм и внутренним диаметром 20 мм, флегмовое число 5, ТУ 25-1173.131-85 (или другая такого же типа). Насадка - спиральки Левина из нержавеющей стали (2х2х0,2 мм).
    
    Весы аналитические ВЛР-200, ГОСТ 19491-74, или другие того же класса.
    
    Электроаспиратор ЭА-1, ОСТ 95.10052-84
    
    Фильтродержатель, ТУ 95.7205-77
    
    Микроскоп отсчетный типа МПБ-2, ТУ 3-3.824-76
    
    Колбы мерные, вместимостью 100 мл, ГОСТ 1770-74
    
    Пипетки мерные, вместимостью 5 мл, ГОСТ 20292-74*
________________
    * Действуют ГОСТ 29169-91, ГОСТ 29227-91-ГОСТ 29229-91, ГОСТ 29251-91-ГОСТ 29253-91. - Примечание изготовителя базы данных.
         
    Градуированные пробирки с пришлифованными пробками, вместимостью 10 мл, ГОСТ 10515-75
    
    

Реактивы, растворы, материалы

    
     Азафен, ФС 42-1613-81, 99% чистоты
    
    Калий марганцевокислый (калий перманганат), ТУ 20490-75
    
    Ацетонитрил очищенный
    
    Ацетонитрил очищенный получают из ацетонитрила, ТУ 6-09-3534-82, путем ректификации с предварительной химической обработкой, которая заключается в кипячении растворителя с обратным холодильником в присутствии перманганата калия из расчета 1 г перманганата калия на 1 л растворителя. Кипячение проводится до полного перехода перманганата калия в двуокись марганца. Перед ректификацией осадок двуокиси марганца отделяют путем фильтрации через фильтр Шотта N 4. Ректификационная колонна длиной 550 мм и внутренним диаметром 20 мм, флегмовое число 5. Насадка - спиральки Левина из нержавеющей стали (2х2х0,2 мм). Основную фракцию отбирают при температуре 81,6 °С (атмосферное давление) в пределах колебаний ±0,1 °С.
    
    Натрий фосфорнокислый двузамещенный 12-водный, NaHPOx12HO (динатрийфосфат), TУ 4172-76
    
    Калий фосфорнокислый однозамещенный, KHPO (калий дифосфат),  ТУ 4198-75
    
    0,067 М раствор динатрийфосфата готовят растворением 23,877 г натрия фосфорнокислого двузамещенного 12-водного в воде в мерной колбе вместимостью 1 л.
    
    0,067 М раствор калийдифосфата готовят растворением 9,078 г калия фосфорнокислого однозамещенного в воде в мерной колбе вместимостью 1 л.
    
    0,067 М фосфатный буфер (рН 7,8) готовят смешивая 915 мл  0,067 М раствора динатрийфосфата и 85 мл 0,067 М раствор калийдифосфата.
    
    0,005 М фосфатный буфер (рН 7,8) готовят соответствующим разбавлением 0,067 М фосфатного буфера водой.
    
    Фосфатный буфер устойчив при хранении в холодильнике в течение месяца.
    
    Элюент: ацетонитрил - 0,005 М фосфатный буфер (рН 7,8), 5:1
    
    Стандартный раствор N 1 с концентрацией азафена 500 мкг/мл готовят растворением 0,05 г вещества в элюенте в мерной колбе вместимостью 100 мл.
    
    Стандартный раствор N 2 с концентрацией азафена 25 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 1 элюентом.
    
    Растворы используют в день приготовления.
    
    Фильтры аналитические стекловолокнистые, ТУ 8-ЮП-1-77
    
    

Отбор пробы воздуха

    
    Воздух с объемным расходом 5 л/мин аспирируют через аналитический стекловолокнистый фильтр. Для определения 0,5ОБУВ достаточно отобрать 25 л воздуха.
    
    Пробы можно хранить в закрытых сосудах в холодильнике в течение месяца.
    
    

Подготовка к измерению

    
    Хроматографическая колонка промышленного изготовления.
    
    Инжектируют в хроматограф от 0,050 до 1 мкг азафена.
         
    Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:
    

    
    На полученной хроматограмме измеряют площади пиков и строят градуировочный график, выражающий зависимость площади пиков (мм) от содержания азафена в хроматографируемом объеме пробы (мкг).
    
    Построение градуировочных графиков необходимо проводить не менее чем по 6 точкам, выполняя по 5 параллельных измерений для каждого инжектируемого объема. Проверку градуировочных графиков следует проводить при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в месяц.

Проведение измерения

    
    Фильтр с отобранной пробой помещают в пробирку с пришлифованной пробкой, добавляют 5 мл элюента и оставляют на 15 мин при комнатной температуре и периодическом помешивании. Степень десорбции с фильтра 97,5%.
    
    Хроматографирование анализируемого раствора проводят в тех же условиях по отношению к тому же элюенту, что и при построении градуировочного графика.
    
    Количественное определение содержания азафена в хроматографируемом объеме проводят по предварительно построенному градуировочному графику.
    
    

Расчет концентрации

    
    Концентрация азафена "" в воздухе (в мг/м) вычисляют по формуле:
    

,

    
где - содержание азафена в хроматографируемом объеме пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;
            
     - объем пробы, взятой на хроматографирование, мкл;
          
     - общий объем анализируемого раствора, мкл;
            
     - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям, л (см. Приложение 1).