МУК 4.1.931-99

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
по измерению концентрации 1-фенил-3-метил-5-пиразолона
методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
в воздухе рабочей зоны

    
    
Дата введения: с момента утверждения

    УТВЕРЖДЕНЫ Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г.Онищенко 30.12.1999 г.
    
    

М.м. 174,2

       
    1-фенил-3-метил-5-пиразолон - кристаллическое вещество желтого цвета, хорошо растворим в горячей воде, водных растворах минеральных кислот, в метиловом и этиловом спиртах. 127 °С. 287 °С (при 205 мм рт.ст.). Плотность 1,637 г/см.
    
    В воздухе находится в виде аэрозоля.
    
    Обладает общетоксическим действием.
    
    ОБУВ в воздухе 0,5 мг/м.
    

Характеристика метода

    
    Метод основан на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением УФ-детектора.
    
    Отбор проб проводится с концентрированием на фильтр.
    
    Нижний предел измерения 1-фенил-3-метил-5-пиразолона в хроматографируемом объеме пробы (50 мкл) 0,1 мкг.
    
    Нижний предел измерения 1-фенил-3-метил-5-пиразолона в воздухе 0,25 мг/м (при отборе 40 л воздуха).
    
    Диапазон измеряемых концентраций 1-фенил-3-метил-5-пиразолона в воздухе от 0,25 до 5,0 мг/м.
    
    Определению не мешает присутствие тартразина, дибазола, мешает присутствие этадена, мерадина, аденинсульфата.
    
    Суммарная погрешность измерения не превышает ±20%.
    
    Время выполнения измерения, включая отбор пробы, около 50 минут.
    

Приборы, аппаратура, посуда

    
    Микроколоночный жидкостной хроматограф "Милихром" или другие модели с УФ-детектором.
    
    Хроматографическая колонка длиной 120 мм, внутренним диаметром 2 мм, заполненная сорбентом "Силасорб РН С" с размеров зерен 9,0 мкм
    
    Электроаспиратор ЭА-1, ОСТ 95.10052-84
    
    Фильтродержатель
    
    Микроскоп отсчетный типа МПБ-2, ТУ 3.3-824-78
    
    Стеклянная ректификационная колонна длиной 550 мм и внутренним диаметром 20 мм, флегмовое число 5 (или другая такого же типа)
    
    Колбы мерные, вместимостью 25, 100 мл и 1 л, ГОСТ 1770-74
    
    Пипетки, вместимостью 1, 5, и 10 мл, ГОСТ 20292-74*
________________
    * Действуют ГОСТ 29169-91, ГОСТ 29227-91-ГОСТ 29229-91, ГОСТ 29251-91-ГОСТ 29253-91. - Примечание изготовителя базы данных.
         
    Пробирки с пришлифованными пробками, вместимостью 10 мл, ГОСТ 10515-75
    

Реактивы, растворы, материалы

    
    1-фенил-3-метил-5-пиразолон ГОСТ 9593-74, содержание основного вещества не менее 98%.
    
    Метанол (спирт метиловый), очищенный.
    
    Метанол очищенный получают из метанола, ГОСТ 2222-78Е путем ректификации. Ректификационная колонна длиной 550 мм и внутренним диаметром 20 мм, флегмовое число 5. Насадка - спиральки Левина из нержавеющей стали (2х2х0,2 мм). Основную фракцию отбирают при температуре 64,5 °С (атмосферное давление) в пределах колебаний ±0,1 °С.
    
    Натрий фосфорнокислый двузамещенный 12-водный NaHPOх12HO (динатрийфосфат), ТУ 4172-76
    
    Калий фосфорнокислый однозамещенный, KHPO (калий фосфат), ТУ 4198-75
    
    0,067 М раствор динатрийфосфата готовят растворением 23,986 г натрия фосфорнокислого двузамещенного 12-водного в воде в мерной колбе вместимостью 1 л.
    
    0,067 М раствор калийфосфата готовят растворением 9,078 г калия фосфорнокислого однозамещенного в воде в мерной колбе вместимостью 1 л.
    
    0,067 М фосфатный буфер (рН 6,5) готовят смешивая 311 мл 0,067 М раствора динатрийфосфата и 689 мл 0,067 М раствор калийфосфата.     
    
    0,02 М фосфатный буфер (рН 6,5) готовят соответствующим разбавлением 0,067 М фосфатного буфера (рН 6,5) водой.
    
    Фосфатный буфер устойчив при хранении в холодильнике в течение месяца.
    
    Растворитель: 0,067 М фосфатный буфер (рН 6,5) - метанол, 1:1
    
    Элюент:  0,067 М фосфатный буфер (рН 7,2) - метанол (3:2)
    
    Стандартный раствор N 1 с концентрацией 1-фенил-3-метил-5-пиразолона 500 мкг/мл готовят растворением 0,05 г вещества в растворителе в мерной колбе вместимостью 100 мл.
    
    Стандартный раствор N 2 с концентрацией 1-фенил-3-метил-5-пиразолона 40 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 1 растворителем.
    
    Растворы устойчивы при хранении в холодильнике в течение суток.
    
    Фильтр АФА-ВП-10, ТУ 85-743-80
    

Отбор пробы воздуха

    
    Воздух с объемным расходом 5 л/мин аспирируют через фильтр АФА-ВП-10. Для определения 0,5ОБУВ достаточно отобрать 40 л воздуха.
    
    Пробы можно хранить в закрытых сосудах в холодильнике в течение месяца.
    

Подготовка к измерению

    
    Хроматографическая колонка промышленного изготовления.
    
    Количественный анализ проводят методом абсолютной калибровки с использованием градуировочных растворов, которые готовят с концентрацией от 0,002 до 0,04 мкг/мкл путем соответствующего разбавления стандартного раствора N 2 растворителем.
    
    Растворы используют в день приготовления.
    
    Инжектируют в хроматограф по 50 мкл каждого из градуировочных растворов, что соответствует содержанию от 0,1 до 2 мкг 1-фенил-3-метил-5-пиразолона.
    
    Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:
    

    
    На полученной хроматограмме измеряют площади пиков и строят градуировочный график, выражающий зависимость площади пиков (мм) от содержания 1-фенил-З-метил-5-пиразолона в хроматографируемом объеме пробы (мкг).
    
    Построение градуировочных графиков необходимо проводить не менее чем по 6 точкам, выполняя по 5 параллельных измерений для каждого ижектируемого объема. Проверку градуировочных графиков следует проводить при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в месяц.
         

Проведение измерения

    
    Фильтр с отобранной пробой помещают в пробирку с пришлифованной пробкой, добавляют 5 мл растворителя и оставляют на 30 минут при комнатной температуре и периодическом перемешивании. Степень десорбции с фильтра 97,5%.
    
    50 мкл анализируемого раствора инжектируют в колонку хроматографа.
    
    Хроматографирование анализируемого раствора проводят в тех жe условиях по отношению к тем же элюентам, что и при построении градуировочных графиков.
    
    Количественное определение содержания 1-фенил-3-метил-5-пиразолона в хроматографируемом объеме проводят по предварительно построенному градуировочному графику.
    

Расчет концентрации

    
    Концентрацию 1-фенил-3-метил-5-пиразолона "" в воздухе ( мг/м) вычисляют по формуле:
    

,

    
где - содержание 1-фенил-3-метил-5-пиразолона в хроматографируемом объеме пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;
             
     - объем пробы, взятой на хроматографирование, мл;
           
     - общий объем анализируемого раствора, мл;
         
     - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям, л (см. Приложение 1).