МУК 4.1.1413-03  

     
     
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

     
Измерение концентраций клефоксидима в воздухе рабочей зоны
 методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

     
     
Дата введения 2003-06-30

     
     УТВЕРЖДЕНЫ Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации Г.Г.Онищенко 24 июня 2003 г.
     
     
     Настоящие методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения в воздухе рабочей зоны массовой концентрации клефоксидима в диапазоне 0,5-5,0 мг/м.
     
     Клефоксидим - действующее вещество препарата Аура Плюс, КЭ, (75 г/л), фирма-производитель БАСФ, Германия.
     
     3-гидрокси-5-(цис-тиан-3-ил)-2-{1-[(2/RS)-2-(4-хлорфенокси)пропоксиимино]-бутил}-циклогекс-2-ен-1-он (IUPAC)
    
       

     
     Эмпирическая формула: CHClNОS                                             М.м.: 466,0
     
     Бесцветная вязкая жидкость без запаха. Температура кипения 185 °С (с разложением). Давление паров при 20 °С: 0,17 мПа. Растворимость в органических растворителях при 20 °С (г/л): ацетон и этилацетат - более 700; изопропиловый спирт - 330. Растворимость в воде при 20 °С - 5,31 мг/л. Вещество мгновенно разлагается в водных растворах при рН 5,  - 140 дней (рН 7), более 300 дней (рН 9).
     
     Константа диссоциации рКа 5,91.
     
     Агрегатное состояние в воздухе рабочей зоны - аэрозоль.
     
     Краткая токсикологическая характеристика. Острая пероральная токсичность () для крыс 5000 мг/кг; острая дермальная токсичность () для крыс >4000 мг/кг, острая ингаляционная токсичность () для крыс >5200 мг/м.
     
     Область применения препарата. Клефоксидим - гербицид системного действия из группы ингибиторов биосинтеза жирных кислот, используется для уничтожения однолетних и многолетних злаковых сорняков в посевах риса.
     
     Ориентировочный безопасный уровень воздействия (ОБУВ) клефоксидима в воздухе рабочей зоны - 1 мг/м.
     
     

1. Погрешность измерений

     
     Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью, не превышающей ±25%, при доверительной вероятности 0,95.
     

2. Метод измерения

     
     Измерения концентраций клефоксидима выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на обращенной фазе с ультрафиолетовым детектором.
     
     Концентрирование клефоксидима из воздуха осуществляют на бумажные фильтры "синяя лента", экстракцию с фильтра проводят метанолом.
     
     Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 2 нг.
     
     Определению не мешают компоненты препаративной формы.
     
     

3. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы

     
3.1. Средства измерений

     
     Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.
     

3.2. Реактивы

     
     Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией.
     

3.3. Вспомогательные устройства, материалы

     
     Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.
     
     

4. Требования безопасности

     
     4.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими, легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.005-88.
     
     4.2. При выполнении измерений с использованием жидкостного хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.
     
     

5. Требования к квалификации операторов

     
     К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на жидкостном хроматографе.
     
     

6. Условия измерений

     
     При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
     
     - процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20±5) °С и относительной влажности не более 80%.
     
     - выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.
     
     

7. Подготовка к выполнению измерений

     
     Перед выполнением измерений проводят очистку ацетонитрила (при необходимости), подготовку подвижной фазы для ВЭЖХ, приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, установление градуировочной характеристики, отбор проб.
     

7.1. Очистка ацетонитрила

     
     Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора не менее 1 ч, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия.
     

7.2. Приготовление 0,005 М раствора ортофосфорной кислоты

     
     Для приготовления 0,005 М раствора ортофосфорной кислоты в мерную колбу вместимостью 1000 см помещают 0,35 см ортофосфорной кислоты, доводят водой до метки, тщательно перемешивают.
     

7.3. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ

     
     В мерную колбу вместимостью 1000 см помещают 550 см 0,005 М ортофосфорной кислоты, добавляют 450 см ацетонитрила, перемешивают, фильтруют и дегазируют.
     

7.4. Кондиционирование хроматографической колонки

     
     Промывают колонку подвижной фазой (п.7.3) в течение 30 мин при скорости подачи растворителя 0,4 см/мин до установления стабильной базовой линии.
     

7.5. Приготовление градуировочных растворов

     
     7.5.1. Исходный раствор клефоксидима для градуировки (концентрация 1 мг/см). В мерную колбу вместимостью 100 см помещают 0,1 г клефоксидима, доводят до метки метанолом, тщательно перемешивают. Раствор хранится в холодильнике не более месяца.
     
     Растворы NN 1-5 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного стандартного раствора.
     
     7.5.2. Раствор N 1 клефоксидима для градуировки (концентрация 10 мкг/см). В мерную колбу вместимостью 100 см помещают 1 см исходного стандартного раствора клефоксидима с концентрацией 1 мг/см (п.7.5.1), разбавляют метанолом до метки. Раствор хранится в холодильнике в течение 2 недель.
     
     7.5.3. Рабочие растворы NN 2-5 клефоксидима для градуировки (концентрация 0,1-1,0 мкг/см). В 4 мерные колбы вместимостью 100 см помещают по 1,0, 2,5, 5,0 и 10,0 см стандартного раствора N 1 с концентрацией 10 мкг/см (п.7.5.2), доводят до метки подвижной фазой (подготовленной по п.7.3), тщательно перемешивают, получают рабочие растворы NN 2-5 с концентрацией клефоксидима 0,1, 0,25, 0,5 и 1,0 мкг/см, соответственно.
     
     Растворы готовятся и используются в день анализа.
     

7.6. Отбор проб

     
     Отбор проб воздуха проводят в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 "ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны". В течение 15 мин последовательно отбирают 3 пробы, для чего воздух аспирируют в течение 5 мин с объемным расходом 1-5 дм/мин через бумажный фильтр "синяя лента", помещенный в фильтродержатель.
     
     Для измерения концентрации клефоксидима на уровне 0,5 ОБУВ воздуха рабочей зоны необходимо отобрать 1 дм воздуха. Срок хранения отобранных проб, помещенных в полиэтиленовые пакеты, в холодильной камере при 4 °С - 5 дней.
     

7.7. Установление градуировочной характеристики

     
     Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (отн. единицы) от концентрации клефоксидима в растворе (мкг/см), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4 растворам для градуировки NN 2-5.
     
     В инжектор хроматографа вводят по 20 мм каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п.7.7.1. Осуществляют не менее 3 параллельных измерений. Устанавливают площадь пика клефоксидима.
     

7.7.1. Условия хроматографирования

     
     Измерения выполняют при следующих режимных параметрах:
     
     Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором
     
     Колонка стальная длиной 25 см, внутренним диаметром 2,1 мм, содержащая Spherisorb S5 ODS 2, зернением 5 мкм.
     
     Температура колонки: комнатная.
     
     Подвижная фаза: 0,005 М ортофосфорная кислота - ацетонитрил (55:45, по объему).
     
     Скорость потока элюента: 0,4 см/мин.
     
     Рабочая длина волны: 250 нм.
     
     Чувствительность: 0,005 ед. абсорбции на шкалу.
     
     Объем вводимой пробы: 20 мм.
     
     Ориентировочное время выхода клефоксидима: 8,9-9,1 мин.
     
     Линейный диапазон детектирования: 2-20 нг.
     
     Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор клефоксидима с концентрацией 1,0 мкг/см, разбавляют подвижной фазой (подготовленной по п.7.3).
     
     Градуировочный график проверяют ежедневно по анализу 2 стандартных растворов различной концентрации. Если значения площади отличаются более чем на 7% от данных, заложенных в градуировочную характеристику, ее строят заново, используя свежеприготовленные рабочие стандартные растворы.
     
     

8. Выполнение измерений

     
     Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 см, заливают 10 см метанола, помещают на встряхиватель на 10 мин. Растворитель сливают, фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями метанола, объемом 10 см.
     
     Объединенный экстракт упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 35 °С почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха, остаток растворяют в 5 см подвижной фазы (подготовленной по п.7.3) и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в п.7.7.1.
     
     Пробу вводят в инжектор хроматографа не менее двух раз. Устанавливают площадь пика, с помощью градуировочного графика определяют концентрацию клефоксидима в хроматографируемом растворе.
     
     Перед анализом опытной пробы проводят хроматографирование холостой (контрольной) пробы - экстракта неэкспонированного фильтра.
     
     

9. Обработка результатов измерений

     
     Массовую концентрацию клефоксидима в пробе воздуха рабочей зоны , мг/м, рассчитывают по формуле:
     

,

где  - концентрация клефоксидима в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/см;

      - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см;
     
      - объем пробы воздуха, отобранного для анализа, приведенного к стандартным условиям (давление 760 мм рт.ст., температура 20 °С)
     

,

где   - температура воздуха при отборе пробы (на входе в аспиратор), °С;

      - атмосферное давление при отборе пробы, мм рт.ст.;
     
      - расход воздуха при отборе пробы, дм/мин;
     
      - длительность отбора пробы, мин.
     
     Примечание. Идентификация и расчет концентрации клефоксидима в пробах могут быть проведены с помощью программ обработки хроматографических данных с применением компьютера, включенного в аналитическую систему.
     
     

10. Оформление результатов измерений

     
     За результат анализа () принимается среднее арифметическое результатов двух параллельных определений  и  (), расхождение между которыми не превышает значений норматива оперативного контроля сходимости (): .
     

, мг/м,

 где   - норматив оперативного контроля сходимости, мг/м;

      - норматив оперативного контроля сходимости, % (равен 15%).

     Результат количественного анализа представляют в виде:
     
     - результат анализа  (мг/м), характеристика погрешности , %, =0,95 или
     
     -  мг/м, =0,95, где
     

, мг/м.

     
     Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и погрешность.
     
     

11. Контроль погрешности измерений

     
     Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями МИ 2335-95. ГСИ "Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа".
     
     

12. Разработчики

     
     Юдина Т.В., Федорова Н.Е., Волкова В.Н. (Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф.Эрисмана, г.Мытищи Московской обл.).
     
     
     

Текст документа сверен по:
официальное издание
Определение остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах,
сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды:
Сб. методических указаний. Выпуск 3. Часть 7. МУК 4.1.1412-4.1.1415-03. -
М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2005