МУК 4.1.1414-03  

     
     
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

     
Измерение концентраций кломазона в воздухе рабочей зоны
методами высокоэффективной жидкостной и газожидкостной хроматографии

     
     
Дата введения 2003-06-30

     
     УТВЕРЖДЕНЫ Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации Г.Г.Онищенко 24 июня 2003 г.
     
     

1. Вводная часть

     
     Фирма-производитель: ФМС (США).
     
     Торговое название: КОММАНД.
     
     Действующее вещество: кломазон
     
     2-(2-хлорбензил)-4,4-диметил-3-изоксалидин-3-он (ИЮПАК)
    
       

          
     Эмпирическая формула: CHClNO                                                  М.м.: 239,7
     
     
     Светло-коричневая вязкая жидкость
     
     Температура плавления: 25 °С.
     
     Температура кипения: 275 °С.
     
     Давление паров при 25 °С: 19,2 мПа.
     
     Коэффициент распределения н-октанол/вода: =2,5.
     
     Хорошо растворим в ацетоне, гексане, этаноле, метаноле, хлороформе, дихлорметане и ацетонитриле; растворимость в воде - 1,10 г/дм.
     
     Стабилен при комнатной температуре не менее 2 лет, при 50 °С - не менее 3 месяцев.
     
     Может присутствовать в воздухе рабочей зоны в виде паров и аэрозоля.
     
     Краткая токсикологическая характеристика. Острая пероральная токсичность () для крыс - 1369 - 2077 мг/кг; острая дермальная токсичность () для крыс - более 2000 мг/кг.
     
     Гигиенические нормативы. ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 1,0 мг/м ОБУВ в атмосферном воздухе - 0,02 мг/м.
     
     Область применения препарата. Кломазон - гербицид избирательного действия, применяемый для борьбы со злаковыми и двудольными сорными растениями в посевах сои и риса при довсходовом или предпосевном внесении.
     
     

2. Методика измерения концентраций кломазона в воздухе рабочей зоны
методами высокоэффективной жидкостной и газожидкостной хроматографии

     
2.1. Основные положения

     
2.1.1. Принцип методики

     
     Методика основана на определении кломазона с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с ультрафиолетовым детектором или газожидкостной хроматографии с детектором постоянной скорости рекомбинации.
     
     Отбор проб воздуха осуществляется концентрированием аэрозоля на бумажные фильтры "синяя лента", паров - на пористый пенополиуретан или в органический растворитель. Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.
     

2.1.2. Избирательность метода

     
     В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии компонентов препаративной формы, а также пестицидов, применяемых при возделывании риса и сои.
     

2.1.3. Метрологическая характеристика метода (=0,95)

     
     Число параллельных определений - 6.
     
     Предел обнаружения в хроматографируемом объеме - 10 нг (измерение по п.2.7.1, ВЭЖХ); 2 нг (измерение по п.2.7.2, ГЖХ).
     
     Предел обнаружения в воздухе (при отборе 20 л) - 0,20 мг/м (ВЭЖХ); 0,1 мг/м (ГЖХ).
     
     Диапазон определяемых концентраций - 0,20-4,0 мг/м (ВЭЖХ); 0,1-2,0 мг/м (ГЖХ).
     
     Среднее значение определения - 93,8%.
     
     Стандартное отклонение () - 5,44%.
     
     Относительное стандартное отклонение () - 2,20%.
     
     Доверительный интервал среднего - 5,66%.
     
     Суммарная погрешность измерения не превышает 17% (ВЭЖХ) и 11% (ГЖХ).
     

2.2. Реактивы, растворы и материалы

     
2.3. Приборы, аппаратура, посуда

     
     Жидкостный хроматограф Милихром с ультрафиолетовым детектором.
     
     Хроматографическая колонка стальная, длиной 64 мм, внутренним диаметром 2 мм, заполненная Силасорбом 600, зернением 5 мкм.
     
     Хроматограф газовый серии "Цвет" или аналогичный, снабженный детектором постоянной скорости рекомбинации (ДПР) с пределом детектирования по линдану 4·10 г/см.
     

     
2.4. Отбор проб

     
     Отбор проб воздуха рабочей зоны следует осуществлять в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 "ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны".
     
     Воздух со скоростью 1 л/мин пропускают через систему 1, состоящую из последовательно соединенных фильтродержателя с фильтром "синяя лента" и склянку Дрекселя с 50 мл н-гексана, охлаждаемую льдом, или систему 2, состоящую из фильтродержателя с фильтром "синяя лента" и стеклянной трубки, заполненной измельченным пенополиуретаном.
     
     Для измерения 0,5 ОБУВ следует отобрать 8 (ВЭЖХ) или 4 л (ГЖХ) воздуха.
     
     Отобранные пробы можно хранить в холодильнике не более 5 дней.
     

2.5. Подготовка к определению

     
2.5.1. Метод ВЭЖХ

     
2.5.1.1. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ

     
     В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают с помощью пипетки 0,5 мл метанола, доливают до метки хлористым метиленом, перемешивают, фильтруют.
     

2.5.1.2. Кондиционирование колонки

     
     Промыть колонку для ВЭЖХ смесью хлористый метилен-метанол (99,5:0,5, по объему) в течение 30 мин при скорости подачи растворителя 100 мкл/мин.
     

2.5.2. Метод ГЖХ. Подготовка и кондиционирование колонки

     
     Готовую насадку (5% SE-30 на Хроматоне N-AW-GMDS) засыпают в стеклянную колонку, уплотняют под вакуумом, колонку устанавливают в термостате хроматографа, не подсоединяя к детектору, и стабилизируют в токе азота при температуре 250 °С в течение 10-12 ч.
     

2.5.3. Приготовление стандартных растворов

     
     Стандартный раствор кломазона с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 0,0100 г вещества в хлористом метилене (измерение по п.2.7.1) или гексане (измерение по п.2.7.2) в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранится в холодильнике в течение месяца.
     
     Рабочие стандартные растворы с концентрацией 2,0; 4,0; 10; 20 и 40 мкг/мл готовят из раствора, содержащего 100 мкг/мл кломазона, соответствующим последовательным разбавлением хлористым метиленом или гексаном при измерении по п.2.7.1 или 2.7.2, соответственно. Растворы хранятся в холодильнике в течение 10 дней.
     

2.5.4. Построение градуирочного графика

     
     2.5.4.1. Градуировочный график А (измерение по п.2.7.1, ВЭЖХ).
     
     Для построения градуировочного графика в инжектор хроматографа вводят по 5 мкл рабочего стандартного раствора кломазона в хлористом метилене с концентрацией 2,0; 4,0; 10; 20 и 40 мкг/мл.
     
     2.5.4.2. Градуировочный график В (измерение по п.2.7.2, ГЖХ)
     
     Для построения градуировочного графика в испаритель хроматографа вводят по 1 мкл рабочего стандартного раствора кломазона с концентрацией 2,0; 4,0; 10; 20 и 40 мкг/мл.
     
     Осуществляют не менее 5 параллельных измерений. Находят среднее значение высоты хроматографического пика для каждой концентрации. Строят градуировочный график (А или В) зависимости высоты хроматографического пика в мм от концентрации кломазона в растворе в мкг/мл.
     

2.6. Описание определения

     
     Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 мл, заливают 10 мл гексана, оставляют на 5-7 мин, периодически перемешивая. Растворитель сливают, отжимая фильтр стеклянной палочкой. Фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями гексана объемом 10 мл.
     
     При использовании пробоотборной системы 1 экстракт с фильтра объединяют с гексаном из склянки Дрекселя.
     
     При использовании пробоотборной системы 2 трубку с пенополиуретаном помещают в центрифужную пробирку, содержащую 4-5 мл гексана, и прокачивают растворитель несколько раз через трубку с помощью резиновой груши. Экстракт объединяют с экстрактом с фильтра.
     
     Объединенный экстракт упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани 35-40 °С почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха, остаток растворяют в 2 мл хлористого метилена (измерение по п.2.7.1) или 1 мл гексана (измерение по п.2.7.2) и хроматографируют.
     

2.7. Условия хроматографирования

     
2.7.1. ВЭЖХ

     
     Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором Милихром (Россия).
     
     Колонка стальная длиной 64 мм, внутренним диаметром 2 мм, заполненная Силасорбом 600, зернением 5 мкм.
     
     Температура колонки: комнатная.
     
     Подвижная фаза: хлористый метилен - метанол (99,5:0,5, по объему).
     
     Скорость потока элюента: 100 мкл/мин.
     
     Рабочая длина волны: 240 нм.
     
     Чувствительность: 0,4 ед. абсорбции на шкалу.
     
     Объем вводимой пробы: 5 мкл.
     
     Время выхода кломазона: около 4 мин.
     
     Линейный диапазон детектирования: 10-200 нг.
     
     Образцы, дающие пики, большие, чем стандартный раствор с концентрацией 40 мкг/мл, разбавляют хлористым метиленом.
     

2.7.2. ГЖХ

     
     Хроматограф газовый "Цвет-570" с детектором постоянной скорости рекомбинации ионов с пределом детектирования по линдану 4·10 г/см.
     
     2.7.2.1. Колонка стеклянная длиной 1 м, внутренним диаметром 3 мм, заполненная Хроматоном N-AW-GMDS с 5% SE-30 (0,125-0,16 мм).
     
     Рабочая шкала электрометра 64·10 Ом.
     
     Скорость движения ленты самописца 240 мм/ч.
     
     Температура термостата колонки - 170 °С.     
     

                                             
     Скорость газа-носителя (азота) - 30 мл/мин.
     
     Объем вводимой пробы - 1 мкл.
     
     Время выхода кломазона - 1 мин 10 с.
     
     Линейный диапазон детектирования: 2-40 нг.
     
     2.7.2.2. Альтернативная неподвижная фаза - колонка стеклянная, длиной 2 м, внутренним диаметром 3 мм, заполненная Хроматоном N-AW-GMDS с 5% OV-210 (0,16-0,20 мм).
     
     Рабочая шкала электрометра 32·10 Ом.
     
     Скорость движения ленты самописца 240 мм/ч.
     
     Температура термостата колонки - 185 °С     
     

     
     Скорость газа-носителя (азота) - 30 мл/мин.
     
     Объем вводимой пробы - 1 мкл.
     
     Время выхода кломазона - 1 мин 20 с.
     
     Линейный диапазон детектирования: 2-40 нг.
     
     Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 40 мкг/мл, разбавляют гексаном.
     
     Для повышения точности идентификации кломазона при совместном присутствии в пробе -ГХЦГ, имеющего близкое время удерживания, кломазон удаляется из пробы обработкой концентрированной серной кислотой. Повторный анализ пробы позволяет установить вклад кломазона в первичный хроматографический сигнал.
     

2.8. Обработка результатов анализа

     
     Содержание кломазона рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:
     

,

где  - содержание кломазона в пробе воздуха, мг/м;

      - концентрация кломазона в хроматографируемом растворе, найденная по калибровочному графику, мкг/мл;
     
      - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл;
     
      - объем пробы воздуха, отобранного для анализа, приведенного к стандартным условиям (давление 760 мм рт.ст., температура 20 °С), дм.
     

,

     
где  - температура воздуха при отборе пробы (на входе в аспиратор), °С;
     
      - атмосферное давление при отборе пробы, мм рт.ст.;
     
      - расход воздуха при отборе пробы, дм/мин;
     
      - длительность отбора пробы, мин.
     
     

3. Требования техники безопасности

     
     Необходимо соблюдать все необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях в соответствии с "Правилами устройства, техники безопасности, производственной санитарии противоэпидемиологического режима и личной гигиены при работе в лечебных и санитарно-эпидемиологических учреждениях системы МЗ СССР" (N 2455-81 от 20.10.81), а также требования, изложенные в документации на прибор.
     
     

4. Контроль погрешности измерений

     
     Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями МИ 2335-95 ГСИ "Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа".
     
     

5. Разработчики

     
     Давидюк Е.И. (УкрНИИГИНТОКС, г.Киев).
     
     Юдина Т.В., Федорова Н.Е. (Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф.Эрисмана, г.Мытищи Московской обл.).