МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
по фотометрическому измерению концентраций
канамицина в воздухе рабочей зоны

     
     
     УТВЕРЖДЕНЫ заместителем Главного государственного санитарного врача СССР М.И.Наркевичем 10 октября 1991 г. N 5974-91
     
     
     Представляет собой комплекс антибиотиков канамицина А, В, С, основным из которых является канамицин А (90%).     
     

     
     Канамицин А - 4,6-диамино-2-гидрокси-1,3-циклогексен-3,6-диамино-3,6(дидеокси-альфа-Д-глюкозид) сульфат. Порошок или пористая масса белого цвета, без запаха и вкуса, гигроскопичен. Хорошо растворим в воде (645-770 мг/мл), практически нерастворим в 95% спирте, эфире, хлороформе. Стабилен в твердом состоянии и в растворах. Температура плавления 250 °С.
     
     В воздухе находится в виде аэрозоля.
     
     Обладает ото- и нефротоксическим действием. Слабый аллерген.
     
     ПДК в воздухе - 0,1 мг/м.
     
     

Характеристика метода

     
     Определение основано на измерении оптической плотности окрашенного в желтый цвет дигидролютидинового производного, образующегося в результате конденсации аминогруппы молекулы канамицина с ацетил-ацетоном и формальдегидом при 343 нм.
     
     Отбор проб производится с концентрированием на фильтр.
     
     Нижний предел измерения содержания вещества в анализируемом объеме раствора 5 мкг.
     
     Нижний предел измерения содержания вещества в воздухе - 0,05 мг/м (при отборе 200 л воздуха).
     
     Диапазон измеряемых концентраций в воздухе от 0,05 до 1,0 мг/м.
     
     Определению не мешает присутствие стрептомицина. Мешает присутствие гентамицина, мономицина, сизомицина, неомицина, амикацина, тобрамицина, апрамицина.
     
     Суммарная погрешность измерения не превышает 10%.
     
     Время проведения измерения, включая отбор проб, 60 минут.
     
     

Приборы, аппаратура, посуда

     
     Спектрофотометр.
     
     рН-метр.
     
     Аспирационное устройство.
     
     Фильтродержатели, ТУ 95.72-0577.
     
     Водяная баня.
     
     Секундомер, ГОСТ 5072-79.
     
     Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, вместимостью 50, 100, 500 и 1000 мл.
     
     Пробирки с пришлифованными пробками, ГОСТ 10515-75, вместимостью 10 мл.
     
     Цилиндры мерные, ГОСТ 1770-74, вместимостью 50 мл.
     
     Пипетки, ГОСТ 20292-74, вместимостью 1, 2, 5 мл.
     
     Стаканы химические, ГОСТ 19908-85, вместимостью 50 мл.
     
     Воронки с пористой пластинкой N 1-ПС-1.
     
     Насос водоструйный.
     
     

Реактивы, растворы, материалы

     
     Канамицин.
     
     Ацетил-ацетон, ГОСТ 10259-78, ч.д.а., перегнанный при 135,5-138 °С.
     
     Формалин, ГОСТ 1625-75, 30% раствор в воде.
     
     Кислота фосфорная, конц., ГОСТ 5653-75, х.ч.
     
     Кислота уксусная, ледяная, ГОСТ 61-75, х.ч.
     
     Кислота борная, ГОСТ 9656-75, ч.д.а.
     
     Смесь фосфорной, уксусной и борной кислот (раствор А) готовят в мерной колбе на 1000 мл, помещая последовательно такие количества перечисленных кислот, чтобы содержание каждой составляло 0,2 М концентрацию, и доводят до метки водой.
     
     Натрия гидроксид, ГОСТ 4328-77, х.ч., 1,0 М раствор (раствор Б).
     
     Буферная смесь рН 2,56, готовят, смешивая 1000 мл раствора А с 150 мл раствора Б.
     
     Реактив С: к 50 мл буферной смеси добавляют 4,0 мл ацетилацетона, 10,0 мл раствора формальдегида, перемешивают, доводят до 150 мл буферной смесью. Устойчив 7 дней.
     
     Стандартный раствор N 1 с концентрацией канамицина 50 мкг/мл готовят, растворяя точную навеску стандартного образца антибиотика в воде. Раствор устойчив 2 недели.
     
     Фильтры АФА-ВП-20.
     
     

Отборы пробы воздуха

     
     Воздух с объемным расходом 20 л/мин аспирируют через фильтр АФА-ВП-20. Для измерения 1/2 ПДК следует отобрать 200 л воздуха. Срок хранения отобранных проб 1 месяц.
     
     

Подготовка к измерению

     
     Градуировочные растворы (устойчивы 2 часа) готовят согласно таблице 29.
     
     

Таблица 29

     
Шкала градуировочных растворов

     
     
     Во все пробирки шкалы добавляют по 2,5 мл реактива С и нагревают в кипящей водяной бане 15 минут, охлаждают при комнатной температуре. Измеряют на спектрофотометре оптическую плотность растворов при длине волны 343 нм. Измерения проводят в кюветах с толщиной поглощающего слоя 10 мм по отношению к раствору сравнения, не содержащему определяемого вещества (раствор N 1 по таблице).
     
     Строят градуировочный график: на ось ординат наносят значения оптических плотностей градуировочных растворов, на ось абсцисс - соответствующие им величины содержания вещества в градуировочных растворах (в мкг).
     
     Проверку градуировочного графика проводят 1 раз в 3 месяца или в случае использования новой партии реактивов.
     
     

Проведение измерения

     
     Фильтр с отобранной пробой помещают в химический стакан, заливают 5 мл дистиллированной воды, выдерживают при перемешивании 15-20 минут. При необходимости раствор фильтруют через воронку с пористой пластинкой. Для анализа в пробирку с пришлифованной пробкой отбирают 2,5 мл раствора антибиотика и обрабатывают аналогично градуировочным растворам. Оптическую плотность полученного анализируемого раствора измеряют по отношению к контрольному, который готовят одновременно и аналогично пробам.
     
     Количественное измерение содержания канамицина в мкг во взятой аликвоте проводят по предварительно построенному градуировочному графику.
     
     

Расчет концентрации

     
     Концентрацию канамицина "" в воздухе (в мг/м) вычисляют по формуле:
     

, где

     
      - содержание канамицина в анализируемом объеме раствора пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;
     
      - объем раствора пробы, взятый для анализа, мл;
     
      - общий объем раствора пробы, мл;
     
      - объем воздуха (в л), отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям (см. Приложение 1).
     
     
     
Текст документа сверен по:
Методические указания по измерению концентрации
вредных веществ в воздухе рабочей зоны:
Сб. методических указаний. Вып.28. -
М.: Информационно-издательский центр
Госкомсанэпиднадзора Российской Федерации, 1993