МУК 4.1.193-96

    
    
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


Методические указания
по измерению концентраций аллергена клещевины
в воздухе рабочей зоны

    
    Дата введения: с момента утверждения

    
    
    РАЗРАБОТАНЫ НИИ санитарии, гигиены и профзаболеваний и НИИ химии растительных веществ, г.Ташкент.
    
    УТВЕРЖДЕНЫ и.о. Председателя Госкомсанэпиднадзора России - заместителем Главного государственного санитарного врача Российской Федерации Г.Г.Онищенко 8 июня 1996 г.
    
    
    Аллерген клещевины - прозрачная жидкость соломенного цвета. Содержание белкового азота в пределах 0,08-0,12 мг/см.
    
    В воздухе находится в виде аэрозоля.
    
    Аллерген.
    
    ПДК в воздухе рабочей зоны не установлена.
    
    

Характеристика метода

    
    Определение аллергена клещевины основано на реакции пассивной гемагглютинации эритроцитов под действием аллергена клещевины.
    
    Нижний предел измерения содержания аллергена клещевины в анализируемой пробе - 0,2 мкг.
    
    Нижний предел измерения концентрации аллергена клещевины в воздухе - 0,001 мг/м (при отборе 400 л воздуха).
    
    Диапазон измеряемых концентраций в воздухе от 0,001 до 0,1 мг/м.
    
    Измерению не мешают: альдегиды, кетоны.
    
    Суммарная погрешность измерения не превышает ±25%.
    
    Время выполнения измерения, включая отбор проб, - около 2 ч.
    

Приборы, аппаратура, посуда

Реактивы, растворы, материалы

_____________
    * Вероятно ошибка оригинала. Следует читать ГОСТ 4233-77. - Примечание .

Отбор пробы воздуха

    
    Воздух с объемным расходом 20 л/мин аспирируют через фильтр АФА-ВП-10 помещенный в фильтродержатель.
    
    Для определения 0,001 мг/м необходимо отобрать 400 л воздуха.
    
    Срок хранения отобранных проб - 1 месяц.
    
    

Подготовка к измерению

    Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан и заливают 3 мл 0,9%-ного раствора хлористого натрия, оставляют на 10-15 мин периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения, затем фильтр отжимают и удаляют.
    
    Степень десорбции вещества с фильтра - 98%.
    
    Полученный раствор сливают в коническую пробирку, затем центрифугируют в течение 3 мин при 3000 об/мин.
    

Проведение измерения

    
    В первые 24 лунки 1 и 2-го рядов планшета для иммунологических реакций вносят по 0,05 мл физиологического раствора. В первую лунку добавляют 0,05 мл эталонного раствора аллергена клещевины с концентрацией 0,1 мг/мл. Тщательно перемешивают автоматическим дозатором. Затем отбирают из этой лунки 0,05 мл раствора и переносят его в следующую лунку. Эту операцию повторяют до 24-й лунки. Из последней лунки отбирают 0,05 раствора и помещают в пробирку с 0,1 М раствором соляной кислоты для инактивации. Затем в каждую лунку добавляют по 0,05 мл 1%-ной суспензии опытных эритроцитов.
    
    Во все лунки III-IV и V рядов вносят по 0,05 мл физиологического раствора.
    
    В первую лунку III ряда вносят 0,05 мл исследуемой пробы, перемешивают дозатором, отбирают 0,05 мл и переносят во вторую лунку. Эту операцию повторяют до 36-й лунки.
    
    Из последней лунки отбирают 0,05 мл раствора и помещают в пробирку с 0,1 М раствором соляной кислоты для инактивации. Затем, во все лунки с исследуемой пробой, добавляют по 0,05 мл 1%-ной суспензии опытных эритроцитов.
    
    С первой по 24-ю лунку VI и VII рядов планшета вносят по 0,05 мл физиологического раствора.
    
    Затем в первую лунку VI-го ряда вносят 0,05 мл экстракта пробы и проводят последовательное разведение аналогично разведению исследуемой пробы в III-VI и V рядах.
    
    Затем во все лунки вносят по 0,05 мл 1%-ной суспензии контрольных эритроцитов, планшет встряхивают в горизонтальной плоскости на поверхности стола и термостатируют при температуре 37 °С в течение 40-60 мин. Затем проводят учет результатов.
    
    Концентрацию аллергена клещевины определяют по номеру последней лунки в рядах I и II, в которой прошла гемагглютинация. Отмечают также лунки, в которых прошла гемагглютинация опытных эритроцитов экстрактом пробы в рядах с III по V и контрольных эритроцитов экстрактом пробы в рядах VI и VII.
    
    При обнаружении гемагглютинации в рядах VI и VII значение характеризующее номер последней лунки, в которой прошла гемагглютинация вычисляют от значения, характеризующего номер лунки в рядах с III по V, в которой прошла гемагглютинация.
    
    При отсутствии гемагглютинации в рядах VI и VII (что бывает при отсутствии в пробе рицина) операция корректировки номера лунки в рядах с III по V не производится.
    
    В таблице, используя уточненное значение номера лунки в рядах с III по V-й, находят коэффициент разбавления экстракта пробы, вызвавшего гемагглютинацию опытных эритроцитов. Концентрацию аллергена клещевины в данной лунке рядов III-V принимают равной концентрации аллергена клещевины в последней лунке с положительной реакцией гемагглютинации в рядах I-II (по эталонному раствору аллергена клещевины).
    
    

Таблица

Расчет концентрации

    Концентрацию аллергена клещевины "" в воздухе рабочей зоны (в мг/м) рассчитывают по формуле:
    

, где

    
     - концентрация аллергена клещевины в стандартном растворе, взятом для анализа, мг/мл;
    
     - титр стандартного раствора аллергена клещевины;
    
      - общий объем исследуемого раствора, мл;
    
     - объем раствора пробы, взятой для анализа, мл;
    
     - концентрация аллергена клещевины в последней лунке с экстрактом пробы, в которой прошла гемагглютинация, мг/мл;
    
     - коэффициент разбавления в данной лунке;
    
     - объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, м.
    
    
    
Текст документа сверен по:
официальное издание
Измерение концентраций вредных веществ
в воздухе рабочей зоны: Сборник методических указаний
МУК 4.1.100-96-МУК 4.1.197-96. Вып.29. -
М.: Информационно-издательский центр Минздрава России, 1998