- USD ЦБ 03.12 30.8099 -0.0387
- EUR ЦБ 03.12 41.4824 -0.0244
Краснодар:
|
погода |
МУК 4.1.196-96
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Методические указания
по измерению концентраций рицина в воздухе рабочей зоны
Дата введения: с момента утверждения
РАЗРАБОТАНЫ НИИ санитарии, гигиены и профзаболеваний и НИИ химии растительных веществ, г.Ташкент.
УТВЕРЖДЕНЫ и.о. Председателя Госкомсанэпиднадзора России - заместителем Главного государственного санитарного врача Российской Федерации Г.Г.Онищенко 8 июня 1996 г.
Рицин - белый порошок с кремовым оттенком, содержание протеина - не менее 80%, содержание воды - не более 8%. М.м. 58-60 тыс., растворим в 9%-ном растворе хлористого натрия, по титру агглютинации должен соответствовать 1:16 - 1:32.
В воздухе находится в виде аэрозоля.
Аллерген.
ПДК в воздухе рабочей зоны не установлена.
Характеристика метода
Определение основано на учете реакции агглютинации эритроцитов под действием рицина.
Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.
Нижний предел измерения содержания рицина в анализируемой пробе - 2,5 мкг.
Нижний предел измерения концентрации рицина в воздухе - 0,006 мг/м (при отборе 400 л воздуха).
Диапазон измеряемых концентраций в воздухе от 0,006 до 0,6 мг/м.
Измерению не мешают: кетоны, альдегиды.
Суммарная погрешность измерения не превышает ±25%.
Время выполнения измерения, включая отбор проб, - около 2 ч.
Приборы, аппаратура, посуда
Аспирационное устройство |
|
Фильтродержатель |
|
Цетрифуга |
|
Весы аналитические |
|
Термостат суховоздушный, обеспечивающий поддержание температуры |
|
Планшет для иммунологических реакций с V-образным профилем лунок |
ТУ 64-2-278-79 |
Автоматическая микропипетка-дозатор |
|
Посуда лабораторная |
Реактивы, растворы, материалы
Набор для определения рицина в клещевидном шроте |
ТУ |
Концентрат рицина и 1%-ная суспензия формалинизированных эритроцитов кролика в физиологическом растворе |
|
Стандартный раствор рицина с концентрацией 1 мг/мл готовят растворением концентрата рицина (содержимого флакона) в 1 мл 0,9%-ного раствора хлористого натрия.
Натрий хлористый, х.ч., 0,9%-ный раствор |
ГОСТ 4233-87* |
Кислота соляная, х.ч., 0,1 М раствор |
ГОСТ 3118-77 |
Фильтры АФА-ВП-10 |
ТУ 95743-80 |
Бумага фильтровальная |
ГОСТ 12026-76 |
_____________
* Вероятно ошибка оригинала. Следует читать ГОСТ 4233-77. - Примечание .
Отбор пробы воздуха
Воздух с объемным расходом 20 л/мин аспирируют через фильтр АФА-ВП-10 помещенный в фильтродержатель.
Для определения 0,006 мг/м необходимо отобрать 400 л воздуха.
Срок хранения отобранных проб - 1 месяц.
Подготовка к измерению
Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан и заливают 5 мл 0,9%-ного раствора хлористого натрия, оставляют на 10-15 мин, периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения, затем фильтр отжимают и удаляют.
Степень десорбции вещества с фильтра - 98%. Полученный раствор сливают в коническую пробирку, затем центрифугируют в течение 3 мин при 3000 об/мин.
Проведение измерения
В первые 20 лунок планшета для иммунологических реакций вносят по 0,02 мл физиологического раствора. В первую лунку добавляют 0,02 мл стандартного раствора рицина с концентрацией 1 мг/мл, тщательно перемешивают автоматическим дозатором. Затем отбирают из этой лунки 0,02 мл раствора и переносят его в следующую лунку. Эту операцию повторяют до 20-й лунки. Из последней лунки отбирают 0,02 мл раствора и помещают в пробирку с 0,1 М раствором соляной кислоты для детоксикации. Затем в каждую лунку добавляют по 0,02 мл 1%-ной суспензии эритроцитов.
С первой по восьмую лунку третьего ряда планшета вносят по 0,02 мл физиологического раствора.
В первую лунку третьего ряда вносят по 0,02 мл исследуемой пробы, перемешивают дозатором, отбирают 0,02 мл и переносят во вторую лунку. Эту операцию повторяют до восьмой лунки.
Из восьмой лунки отбирают 0,02 мл раствора и помещают в пробирку с 0,1 М раствором соляной кислоты для детоксикации. Затем во все лунки с исследуемой пробой добавляют по 0,02 мл 1%-ной суспензии эритроцитов.
Планшет встряхивают в горизонтальной плоскости на поверхности стола и термостатируют при температуре 37 °С в течение 40-50 минут. Затем проводят учет результатов.
Концентрацию рицина определяют по последней лунке, в которой прошла гемагглютинация. Признаком отсутствия агглютинации является оседание эритроцитов в виде "пуговицы" с резко очерченными краями.
По номеру последней лунки (в первых 2 рядах), в которой произошла реакция гемагглютинации со стандартным раствором рицина, находят концентрацию рицина в данной лунке (см. таблицу).
Таблица
Номер лунок |
Коэффициент разбавления |
Концентрация рицина в экстракте, мг/мл |
1 |
2 |
5,0·10 |
2 |
4 |
2,5·10 |
3 |
8 |
1,3·10 |
4 |
16 |
6,2·10 |
5 |
32 |
3,1·10 |
6 |
64 |
1,5·10 |
7 |
128 |
7,8·10 |
8 |
256 |
3,9·10 |
9 |
512 |
1,9·10 |
10 |
1024 |
9,8·10 |
11 |
2048 |
4,9·10 |
12 |
4096 |
2,4·10 |
13 |
8192 |
1,2·10 |
14 |
16384 |
6,1·10 |
15 |
32768 |
3,0·10 |
16 |
75536 |
1,5·10 |
17 |
151072 |
7,6·10 |
18 |
302144 |
3,8·10 |
19 |
604288 |
1,9·10 |
20 |
1208576 |
9,5·10 |
По номеру последней лунки, (в третьем ряду) в которой прошла реакция гемагглютинации с исследуемой пробой, находят показатель разведения в данной лунке по таблице. Концентрацию рицина в этой лунке принимают равной концентрации рицина в последней лунке с положительной реакцией гемагглютинации в 1-2 ряду (по стандартному раствору рицина).
Расчет концентрации
Концентрацию рицина "" в воздухе рабочей зоны (в мг/м) рассчитывают по формуле:
, где
- концентрация рицина в стандартном растворе, взятом для анализа, мг/мл;
- титр стандартного раствора рицина;
- общий объем раствора пробы, мл;
- объем раствора пробы, взятой для анализа, мл;
- концентрация рицина в последней лунке с исследуемой пробой, в которой прошла гемагглютинация, мг/мл;
- коэффициент разбавления в данной лунке;
- объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, м (см. приложение 1).
Текст документа сверен по:
официальное издание
Измерение концентраций вредных веществ
в воздухе рабочей зоны: Сборник методических указаний
МУК 4.1.100-96-МУК 4.1.197-96. Вып.29. -
М.: Информационно-издательский центр Минздрава России, 1998