МУК 4.1.1235-03

    
    МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение концентраций фенамидона в воздухе рабочей зоны
методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

    
Дата введения 2003-07-01

    
    
    УТВЕРЖДЕНЫ Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации Г.Г.Онищенко 16 марта 2003 г.
    

1. Вводная часть

    
    Фирма производитель: Байер КропСайенс (Германия).
    
    Торговое название: Сектин (Секур).
    
    Действующее вещество: фенамидон.
    
    (+)-(4S)-4-метил-2-метилтио-4-фенил-(1Н)-1-фениламино-2-мидазолин-5-он (ИЮПАК).
    
    Структурная формула:     
    

                                                           
    Бесцветное кристаллическое вещество без запаха.
    
    Температура плавления: 137 °С.
    
    Давление паров при 20 °С: 3,4х10 Па.
    
    Коэффициент распределения н-октанол/вода: =-2,8.
    
    Растворимость при 20 °С (г/л): вода - 25, ацетон - 250, дихлорметан - 330, гексан - 0,001, метанол - 12, ацетонитрил - 86.
    
    Стабильность к гидролизу - 22 дня (рН 9), более месяца (рН 5-7).
    
    Может присутствовать в воздухе рабочей зоны в виде аэрозоля.
    
    Краткая токсикологическая характеристика. Острая пероральная токсичность () для крыс - 5000 мг/кг; острая дермальная токсичность () для крыс - более 2000 мг/г; острая ингаляционная токсичность () для крыс - 2,1 мг/дм воздуха.
    
    Гигиенические нормативы: ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 1,0 мг/м.
    
    Область применения препарата. Фенамидон - специфический системный фунгицид широкого спектра действия. Высокоэффективен против возбудителей фитофтороза картофеля и томатов, ложной мучнистой росы огурцов и лука. Обычно применяется в смеси с препаратами контактного действия. В настоящее время проходит регистрационные испытания смесевой препарат Сектин, ВДГ (100 г фенамидона + 500 г манкоцеба в 1 кг препарата) при норме расхода фунгицида 1,25 кг/га и 3-4-кратной обработке за сезон.
    
    Фенамидон весьма лабильное соединение и достаточно быстро метаболизируется в растениях и объектах окружающей среды. В воде и растениях фенамидон разрушается с образованием 5-метил-5-фенил-3-фениламиноимидазолидин-2,4-диона (RPA 405862), в почве до 5-метил-2-метилтио-5-фенил-3,5-дигидроимидазол-4-она (RPA 408056).
    
    

2. Методика измерения концентраций фенамидона в воздухе рабочей зоны
методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

   
2. 1. Основные положения

    
2.1.1. Принцип методики

    
    Методика основана на определении вещества с помощью обращенно-фазной высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с ультрафиолетовым детектором.
    
    Отбор проб воздуха осуществляется концентрированием аэрозоля на бумажные фильтры "синяя лента". Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.
    

2.1.2. Избирательность метода

    
    В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии компонентов препаративной формы, в т.ч. манкоцеба.
    

2.1.3. Метрологическая характеристика метода (=0,95)

    
    Число параллельных определений - 6.
    
    Предел обнаружения в хроматографируемом объеме - 2 нг.
    
    Предел обнаружения в воздухе при отборе 20 дм воздуха - 0,01 мг/м.
    
    Диапазон определяемых концентраций - 0,01-0,1 мг/м.
    
    Среднее значение определения - 93,08%.
    
    Стандартное отклонение (S) - 2,57%.
    
    Относительное стандартное отклонение (DS) - 1,13%.
    
    Доверительный интервал среднего - 2,90%.
    
    Суммарная погрешность измерения не превышает 20%.
    
    

2.2. Реактивы, растворы и материалы

    
    
2.4. Отбор проб

    
    Отбор проб воздуха рабочей зоны следует осуществлять в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 "ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны".
    
    Воздух со скоростью 4 л/мин пропускают через фильтр "синяя лента", помещенный в фильтродержатель.
    
    Для измерения концентрации вещества на уровне 0,01 мг/м следует отобрать 20 л воздуха.
    
    Фильтры с отобранными пробами, помещенные в герметически закрываемые склянки, можно хранить в холодильнике при 4-6 °С в течение 7 дней.
    
    

2.5. Подготовка к определению

    
2.5.1. Очистка растворителей

    
    Органические растворители перед началом работы очищают, сушат и перегоняют в соответствии с типовыми методиками. Хлористый метилен встряхивают с небольшими порциями концентрированной серной кислоты до тех пор, пока свежая порция кислоты не перестанет окрашиваться. Затем растворитель последовательно промывают водой, 2%-ным раствором гидроксида натрия и снова водой, после чего сушат над гидроксидом натрия и перегоняют.
    
    Ацетонитрил сушат над пентоксидом фосфора и перегоняют; отогнанный растворитель повторно перегоняют над углекислым калием.
    

2.5.2. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ

    
    Отмеряют 630 мл ацетонитрила, переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл, добавляют 370 мл бидистиллированной воды, перемешивают, фильтруют и дегазируют.
    

2.5.3. Кондиционирование колонки

    
    Промыть колонку для ВЭЖХ смесью ацетонитрил-вода (63:37, по объему) при скорости подачи растворителя 1 мл/мин в течение 30-45 мин до получения стабильной базовой линии.
    

2.5.4. Приготовление стандартных растворов

    
    Основной стандартный раствор фенамидона с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 0,010 г вещества, содержащего 99,5% д.в., в ацетонитриле в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранится в холодильнике не более месяца.
    
    Рабочие стандартные растворы с концентрациями 0,04; 0,08; 0,2 и 0,4 мкг/мл готовят из основного стандартного раствора фенамидона соответствующим последовательным разбавлением подвижной фазой для ВЭЖХ (п.2.5.2). Рабочие растворы хранят при температуре не выше 4 °С не более 7 дней.
    

2.5.5. Построение калибровочного графика

    
    Для построения калибровочного графика в инжектор хроматографа вводят по 50 мкл рабочего стандартного фенамидона с концентрацией 0,04; 0,08; 0,2 и 0,4 мкг/мл.
    
    Осуществляют не менее 5 параллельных измерений. Находят среднее значение высоты хроматографического пика для каждой концентрации. Строят калибровочный график зависимости высоты хроматографического пика в мм от концентрации фенамидона в растворе в мкг/мл.
    
    

2.6. Описание определения

    
    Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 мл, заливают 10 мл хлористого метилена, помещают на встряхиватель на 4-5 мин. Растворитель сливают, отжимая фильтр стеклянной палочкой. Фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями хлористого метилена объемом 7-8 мл.
    
    Объединенный экстракт упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 35 °С, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха, остаток растворяют в 5 мл подвижной фазы для ВЭЖХ (п.2.5.2), фильтруют или центрифугируют для удаления взвеси и хроматографируют.
    
    

2.7. Условия хроматографирования

    
    Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором Altex (США).
    
    Колонка стальная, длиной 20 см, внутренним диаметром 4 мм, содержащая Lichrosorb RP-18, зернением 5 мкм.
    
    Температура колонки: комнатная.
    
    Подвижная фаза: ацетонитрил-вода (63:37, по объему).
    
    Скорость потока элюента: 0,7 мл/мин.
    
    Рабочая длина волны: 240 нм.
    
    Чувствительность: 0,02 ед. абсорбции на шкалу.
    
    Объем вводимой пробы: 50 мкл.
    
    Время удерживания фенамидона: около 6 мин.
    
    Линейный диапазон детектирования: 2-20 нг.
    
    Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 0,4 мкг/мл, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ (п.2.5.2).
    
    Альтернативная неподвижная фаза
    
    Хроматографическая колонка стальная (15х4 мм), заполненная Kromasil 100A-C18 (5 мкм).
    
    Скорость потока элюента: 0,6 мл/мин.
    
    Условия хроматографирования: те же.
    
    Время удерживания фенамидона: около 6 мин.
    
    

2.8. Обработка результатов анализа

    
    Содержание фенамидона рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:
    

, где

    
     - содержание фенамидона в пробе воздуха, мг/м;
    
     - концентрация фенамидона в хроматографируемом растворе, найденная по калибровочному графику, мкг/мл;
    
     - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл;
    
     - объем пробы воздуха, отобранного для анализа, приведенный к стандартным условиям (давление 760 мм рт.ст., температура 20 °С), дм.
    
    

3. Требования техники безопасности

    
    Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами.
    
    

4. Контроль погрешности измерений

    
    Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями МИ 2335-95. ГСИ. Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа.
    
    

5. Разработчики

    
    Дубовая Л.В., Макеев А.М., к. биол. н.
    
    ВНИИ фитопатологии, 143050, Московская обл., п/о Большие Вяземы, тел. 592-92-20.
    
    
    
Текст документа сверен по:
официальное издание
Определение остаточных количеств пестицидов
в пищевых продуктах, сельскохозяйственном
сырье и объектах окружающей среды:     
Сб. методических указаний. - М.: Федеральный центр
госсанэпиднадзора Минздрава России, 2004