МУК 4.1.1571-03

    
    
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

    

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
по спектрофотометрическому измерению концентраций
3-холест-5,7-диен-3-ола бензоата (бензоата-7- дегидрохолестерина)
и 3-холест-5-ен-3-ола бензоата (бензоата холестерина)
в воздухе рабочей зоны

    
    
Дата введения: с момента утверждения

    
    
    УТВЕРЖДЕНЫ Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г.Онищенко 29 июня 2003 г.
    
    

    
Бензоат 7- дегидрохолестерина

         
Бензоат холестерина

    
    Бензоат 7- дегидрохолестерин - белый кристаллический порошок, без запаха и вкуса. Температура плавления 134 °С. Растворим в жирах и органических растворителях, нерастворим в воде.
    
    В воздухе находится в виде аэрозоля.
    
    Бензоат 7- дегидрохолестерин является малотоксичным веществом, не обладает раздражающим действием на кожу и слизистые оболочки глаз кроликов. Обладает специфическим влиянием на липидный обмен.
    
    ПДК бензоат 7- дегидрохолестерина в воздухе 1 мг/м. 3 класс опасности.
    
    Бензоат холестерина - белый кристаллический порошок, без запаха и вкуса. Температура плавления 147 °С. Растворим в жирах и органических растворителях, нерастворим в воде.
    
    В воздухе находится в виде аэрозоля.
    
    Бензоат холестерина является малотоксичным веществом, не обладает раздражающим действием на кожу и слизистые оболочки глаз кроликов. Специфическое влияние на липидный обмен менее выражено.
    
    ПДК бензоат холестерина в воздухе 4 мг/м. 3 класс опасности.
    

Характеристика метода

    
    Определение основано на образовании окрашенного комплексного соединения при взаимодействии холестерина с уксусным ангидридом и серной кислотой в хлороформе с последующим фотометрическим измерением продукта реакции при длине волны 675 нм.
    
    Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.
    
    Нижний предел измерения содержания бензоат 7- дегидрохолестерина в анализируем объеме раствора 40 мкг.
    
    Нижний предел измерения бензоат 7- дегидрохолестерина в воздухе 0,5 мг/м (при отборе 80 л воздуха).
    
    Диапазон измеряемых концентраций бензоат 7- дегидрохолестерина в воздухе от 0,5 до 10,0 мг/м.
    
    Определению не мешают: остаточные количества органических растворителей, мешают: холестерин и бензоат холестерина.
    
    Нижний предел измерения содержания бензоат холестерина в анализируемом объеме раствора 80 мкг.
    
    Нижний предел измерения бензоат холестерина в воздухе 2 мг/м (при отборе 40 л воздуха).
    
    Диапазон измеряемых концентраций бензоат холестерина в воздухе от 2 до 20 мг/м.
    
    Определению не мешают: остаточные количества органических растворителей; мешают - холестерин и бензоат 7- дегидрохолестерина.
    
    Суммарная погрешность измерения не превышает 20%
    

Приборы, аппаратура, посуда

    
    Спектрофотометр Specord М-40, Carl Zess.
    
    Весы аналитические ВЛА-200, ГОСТ 24104-88Е.
    
    Аспирационное устройство, модель 822, ТУ 64-1-862-82.
    
    Колбы мерные, вместимостью 25, 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74Е.
    
    Пипетки, вместимостью 1, 2, 5 и 10 мл, ГОСТ 29227-91.
    
    Пробирки колориметрические с пришлифованными пробками, вместимостью 10 мл, ГОСТ 25336-82Е.
    
    Бюксы, вместимостью 10 мл, ГОСТ 7148-70.
    
    Роторный испаритель ИP-1M, ТУ 25-11-917-74.
    
    Колбы грушевидные, вместимостью 25 мл, ГОСТ 9737-70.
    
    Воронки химические, ГОСТ 8613-75.
    
    Баня водяная лабораторная, МРТУ 64-186-23-68.
    
    Стеклянные палочки.
    

Реактивы, растворы, материалы

    
    Бензоат 7- дегидрохолестерина, СТП 0431-507-92.
    
    Бензоат холестерина, содержание основного вещества не менее 99,0%.
    
    Спирт этиловый, ректификат, ГОСТ 5963-67*, 95% и в смеси с хлороформом в соотношении (3:2).
_______________
    * Действует ГОСТ Р 51723-2001. - Примечание изготовителя базы данных.

    
    Кислота серная, ГОСТ 4204-77, х.ч., 1 н раствор.
    
    Хлороформ, ГОСТ 20015-74, х.ч.
    
    Уксусный ангидрид, ГОСТ 5815-77, ч.
    
    Стандартный раствор N 1 бензоат 7- дегидрохолестерина концентрацией 1000 мкг/мл готовят растворением 0,1400 г вещества в смеси этанол-хлороформ (3:2) в мерной колбе вместимостью 100 мл. Раствор устойчив в течение недели при хранении в холодильнике.
    
    Стандартный раствор N 2 с концентрацией бензоат 7- дегидрохолестерина 200 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 1 смесью этанол-хлороформ (3:2). Раствор устойчив в течение недели при хранении в холодильнике.
    
    Стандартный раствор N 1 бензоат холестерина концентрацией 1000 мкг/мл готовят растворением 0,1000 г вещества в смеси этанол-хлороформ (3:2) в мерной колбе вместимостью 100 мл. Раствор устойчив в течение недели при хранении в холодильнике.
    
    Стандартный раствор N 2 с концентрацией бензоат холестерина 200 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 1 смесью этанол-хлороформ (3:2). Раствор устойчив в течение недели при хранении в холодильнике.
    
    Фильтры АФА-ВП-10, ТУ 85-743-80.
    
    

Отбор проб воздуха

    
    Воздух с объемным расходом 10 л/мин аспирируют через фильтр АФА-ВП-10. Для измерения 1/2 ПДК бензоат 7- дегидрохолестерина следует отобрать 80 л воздуха, для измерения 1/2 ПДК бензоат холестерина 40 л воздуха.
    
    

Подготовка к измерению

    
    Градуировочные растворы (устойчивы в течение 7 часов) готовят согласно таблице:
    
    

Таблица

    
Шкала градуировочных растворов бензоат 7- дегидрохолестерина

    
    
Таблица

    
Шкала градуировочных растворов бензоат холестерина

    
    
    Градуировочные растворы перемешивают, затем переносят в грушевидные колбы и упаривают досуха под вакуумом при температуре водяной бани 60-70 °С. Сухой остаток растворяют в 4 мл хлороформа, добавляют по 1 мл уксусного ангидрида и 0,1 мл концентрированной серной кислоты и перемешивают. Через 20 минут после стояния пробирок в темном месте проводят фотометрирование.
    
    Измеряют оптическую плотность полученных растворов при длине волны 675 нм. Измерения проводят в кюветах с толщиной поглощающего слоя 10 мм по отношению к контрольной пробе, не содержащей определяемого вещества (раствор N 1 по таблице).
    
    Строят градуировочный график: на ось ординат наносят значения оптических плотностей градуировочных растворов, на ось абсцисс - соответствующие им величины содержания вещества в градуировочном растворе (мкг).
    
    Проверка градуировочного графика проводится 1 раз в 3 месяца или в случае использования новой партии реактивов.
    

Проведение измерения

    
    Фильтр с отобранной пробой переносят в бюкс, заливают 5 мл растворителя (смеси этанола:хлороформ в соотношении 3:2) и оставляют на 15 минут, периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения вещества. Затем фильтр тщательно отжимают и удаляют. Степень десорбции бензоат 7-дегидрохолестерина с фильтра 96%, а бензоат холестерина - 96,7%.
    
    Раствор переносят в грушевидную колбу и упаривают досуха под вакуумом при температуре водяной бани 60-70 °С. Сухой остаток растворяют в 4 мл хлороформа, добавляют по 1 мл уксусного ангидрида и 0,1 мл концентрированной серной кислоты и перемешивают. Через 20 минут после стояния пробирок в темном месте проводят фотометрирование. Оптическую плотность полученных растворов пробы измеряют аналогично градуировочным растворам по сравнению с контролем, который готовят одновременно и аналогично пробе, используя чистый фильтр.
    
    Количественное определение содержания веществ (в мкг) в анализируемой пробе проводят по предварительно построенному градуировочному графику.
    
    

Расчет концентрации

    
    Концентрацию веществ "" в воздухе (в мг/м) вычисляют по формуле:
    

,

    
где - содержание вещества в анализируемом объеме раствора пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;
    
     - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям, л (см. Приложение 1).