МУК 4.1.0.374-96

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Фотометрическое измерение концентраций каталазы в воздухе рабочей зоны

Дата введения: с момента утверждения

    РАЗРАБОТАНЫ Киевским госуниверситетом, Украина.

    УТВЕРЖДЕНЫ и.о. Председателя Госкомсанэпиднадзора России - заместителем Главного государственного санитарного врача Российской Федерации Г.Г.Онищенко 8 июня 1996 г.

    
    Каталаза представляет собой темно-зеленый кристаллический порошок. Оптимальные условия проявления ферментативной активности: Т - 35-45 °С; рН - 6,0-7,0. Хорошо растворима в воде.
    
    В воздухе находится в виде аэрозоля.
    
    Является малоопасным веществом, обладает умеренным кумулятивным и слабым раздражающим действием.
    
    ПДК в воздухе - 5 мг/м.
    

Характеристика метода

    Метод основан на реакции взаимодействия остаточных количеств пероксида водорода (после взаимодействия фермента) с молибдатом аммония и последующим фотометрическим измерением окрашенного продукта реакции при длине волны  =415 нм. Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.
    
    Нижний предел измерения в анализируемом объеме - 0,5 мкг.
    
    Нижний предел измерения в воздухе 0,5 мг/м (при отборе 5 л воздуха).
    
    Диапазон измеряемых концентраций от 0,5 до 50 мг/м.
    
    Измерению мешают: неорганические вещества, содержащие фосфор, а также азид, гидроксиламид, цианистый водород.
    
    Суммарная погрешность измерения не превышает ±10%.
    
    Время выполнения измерения, включая отбор проб - 50 мин.
    

Приборы, аппаратура, посуда

Реактивы, растворы, материалы

    Стандартный раствор каталазы. 10 мг каждого стандартного образца препарата с различной активностью растворяют в 100 мл дистиллированной воды. При отсутствии набора стандартов каталазы различной активности стандартные растворы соответствующей активности готовят из раствора фермента в 1000 единиц активности, разводя этот раствор в 200; 40; 20; 10; 5; 2,5; 2,0 раза. Для анализа берут по 0,1 мл каждого раствора, что соответствует 0,5; 2,5; 5,0; 10; 20; 40 и 50 ед. активности.
    

Отбор проб воздуха

    Воздух с объемным расходом 5 л/мин аспирируют через фильтр "синяя лента", закрепленный в фильтродержателе. Для измерения 0,5 ПДК следует отобрать не более 5 л воздуха.
    
    Пробы могут сохраняться в течение 7 дней в холодильнике.
    

Подготовка к измерению

    Градуировочные растворы (устойчивы 2 часа) готовят согласно таблице.
    
    

Таблица

Шкала градуировочных растворов

    
    
    Для построения градуировочного графика исходные растворы смешивают и прогревают 1 мин при 37 °С, затем добавляют пероксид водорода и инкубируют 3 мин при 37 °С (рН 6,8). Реакцию останавливают внесением 1,0 мл 10 н серной кислоты, затем добавляют 1,0 мл 0,02 М раствора молибдата аммония. После каждого добавления растворы перемешивают. Через 20 мин измеряют оптическую плотность на фотоэлектроколориметре при длине волны 415 нм. Измерение оптической плотности растворов проводят в кюветах с толщиной поглощающего слоя 10 мм по отношению к раствору сравнения не содержащего каталазу. Искомую оптическую плотность градуировочных растворов находят по разности оптических плотностей раствора сравнения и анализируемого раствора.
    
    Строят градуировочный график: на ось ординат наносят значения разности оптических плотностей градуировочных растворов, на ось абсцисс - соответствующие им концентрации препарата в мкг с известной активностью.
    
    Проверку градуировочного графика проводят 1 раз в месяц или в случае использования новой партии реактивов.
    

Проведение измерения

    Фильтр с отобранной пробой переносят в бюкс, заливают 5 мл дистиллированной воды и оставляют на 10 мин, периодически перемешивая. Полученный раствор прогревают при 37 °С в течение 1 мин. Затем добавляют 1 мл 3%-ного раствора пероксида водорода и инкубируют 3 мин при 37 °С (рН 6,8). Останавливают реакцию внесением 1,0 мл 10 н серной кислоты. Затем добавляют 1,0 мл 0,02 М раствора молибдата аммония. После каждого добавления реактива следует хорошо перемешать смесь. Через 20 мин измеряют оптическую плотность полученного анализируемого раствора, по сравнению с контрольным раствором, которым является вытяжка с чистого фильтра, обработанная одновременно и аналогично пробе. Искомую оптическую плотность пробы находят по разности оптических плотностей контрольного и анализируемого растворов.
    
    Количественное определение концентрации каталазы в анализируемой пробе проводят по предварительно построенному градуировочному графику.
    

Расчет концентрации

    Концентрацию вещества () в воздухе (мг/м) вычисляют по формуле:     

, где

     - содержание каталазы в анализируемом объеме пробы, мкг;
    
     - объем раствора пробы, мл;
    
     - объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, л (см. приложение 1).
    
    
         

Текст документа сверен по:
официальное издание

Измерение концентраций вредных
веществ в воздухе рабочей зоны:
Сборник методических указаний.
МУК 4.1.0.341-4.1.0.405-96. Выпуск 32. -
М.: Федеральный центр Госсанэпиднадзора
Минздрава России, 1999