МУК 4.1.268-96

     
     
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Хроматографическое измерение концентраций В-экзотоксина (турингина-1)
в воздухе рабочей зоны

     
     
Дата введения - с момента утверждения

     УТВЕРЖДЕНЫ и.о. Председателя Госкомсанэпиднадзора России - заместителем Главного государственного санитарного врача Российской Федерации Г.Г.Онищенко 8 июня 1996 года
     
     

     CHONP
     
     В-экзотоксин - (турингин-1) - биологический препарат применяется в сельском и лесном хозяйстве против колорадского жука, паутинного клеща, хлопковых совок и др. вредителей растений.
     
     Представляет собой порошок от коричневого до светло-бежевого цвета, растворим в воде и не растворим в органических растворителях. Действующим началом турингина является В-экзотоксин, содержание которого в препарате в среднем - ±1%. В воздухе находится в виде аэрозоля.
     
     ПДК в воздухе - 1 мг/м.
     

Характеристика метода

     
     Определение основано на хроматографическом разделении препарата, в тонком слое силикагеля (силуфол-UV 254) с последующим спектрометрическим измерением концентраций.
     
     Отбор проб производится с концентрированием на фильтр АФА-ВП-20.
     
     Нижний предел измерения в анализируемой пробе - 3 мкг.
     
     Нижний предел измерения в воздухе - 0,06 мг/м (при отборе 45 л воздуха).
     
     Диапазон измеряемых концентраций в воздухе - от 0,06 до 2 мг/м.
     
     Граница суммарной погрешности измерения ±20%.
     
     Определению не мешает присутствие полупродуктов производства экзотоксина.
     

Реактивы, растворы, материалы

     
     Основной стандартный раствор N 1 готовят растворением 100 мг экзотоксина в 100 мл дистиллированной воды, получают раствор, содержащий 1 мг/мл экзотоксина.
     
     Стандартный раствор N 2 готовят путем разбавления основного стандартного раствора N 1 или растворением 10 мг экзотоксина в 10 мл дистиллированной воды получают раствор, содержащий 0,1 мг/мл или 100 мг/мл экзотоксина.
     
     Срок хранения растворов - 5 суток.
     
     Приготовление рабочих растворов с содержанием экзотоксина 15,05; 50, 100, 300, 500 мкг/мл - (см. табл.).
     

Приборы, аппаратура, посуда

     

Отбор пробы воздуха

     
     Воздух со скоростью 15 л/мин аспирируют через фильтр АФА-ВП-20, закрепленный в фильтродержателе.
     
     Для определения 1/2 ПДК достаточно отобрать 6 л воздуха. После отбора пробы фильтры складывают загрязненной стороной внутрь, помещают в пакеты и доставляют в лабораторию.
     
     Срок хранения отобранных проб - 5 суток.
     

Условия анализа

     
     Фильтры с отобранной пробой помещают в химический стакан, затем промывают дважды 2-3 мл дистиллированной воды тщательно отжимают фильтр стеклянной палочкой и сливают в фарфоровую чашку, которую устанавливают на водяную баню. Выпаривают содержимое до сухого остатка и растворяют в 0,2-0,3 мл воды и всю пробу количественно с помощью микропипетки наносят на стартовую линию хроматографической пластинки в одну точку с помощью микропипетки или микрошприца так, чтобы диаметр пятна не превышал 0,5 см. Остаток в чашке еще 2 раза тщательно смывают по 0,1 мл дистиллированной водой и наносят в центр того же пятна. На стартовую линию той же пластинки в различные точки, расположенные друг от друга на расстоянии 2 см, наносят по 0,2 мл рабочих растворов, содержащих 15, 50, 100, 300 и 500 мкг/мл экзотоксина, что соответствует 3; 10; 20; 60; 100 мкг препарата. Пластинку с нанесенными растворами помещают в хроматографическую камеру, которую за 30 мин до хроматографирования заливают смесью: пропанол, ацетон, вода в соотношении 15:5:1. После поднятия фронта подвижного растворителя на 10 см, пластинку вынимают и оставляют на несколько мин до его испарения. Затем под хроматоскопом обнаруживают зоны локализации препаратов, проявляющиеся в виде сине-фиолетовых пятен на голубом фоне с величиной =0,78 при использовании пластинок "Силуфол''-UV 254. Под УФ-светом (=254 нм) зоны локализации препарата проявляется в виде желтоватых пятен на светлом фоне с величиной =0,68.
     

Расчет концентраций

     
     Количественное определение проводят путем сравнения площадей пятен стандартных растворов и проб. Между количеством препарата и площадью его пятен на пластинке существует прямая пропорциональная зависимость.
     
     При большом содержании препарата в пробе следует использовать для анализа меньшую часть анализируемого экстракта.
     
     Содержание экзотоксина () в воздухе (мг/м) вычисляют по формуле:
     

,

     
где  - количество экзотоксина, найденное в анализируемом объеме пробы, мкг;
     
      - общий объем пробы, мл;
     
      - объем пробы, взятой для анализа, мл;
     
      - объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, л (см. приложение 1).
     
     

Количественная оценка результатов анализа методом
УФ-спектрофотометрирования

     
     Полученные на хроматограмме пятна пробы и стандарта снимают осторожно скальпелем и высыпают слой сорбента в центрифужные пробирки. Затем в пробирки добавляют по 4 мл дистиллированной воды и центрифугируют при 3000 об/мин в течение 5-10 мин.
     
     Недостаточный прозрачный раствор осторожно пипеткой отсасывают в прямоугольные кварцевые кюветы с =10 мм и измеряют оптическую плотность раствора на спектрофотометре при длине волны 240 нм.
     
     Количественное определение экзотоксина в пробе проводят по калибровочному графику.
     
     Для построения калибровочного графика готовят шкалу стандартов в соответствии с таблицей.
     
     

Таблица

Шкала стандартов

     
     
     Стандартные растворы наносят на чистую хроматографическую пластинку и обрабатывают аналогично пробам.
     
     Измеряют величину оптической плотности стандартных растворов на спектрофотометре при длине волны 240 нм и по полученным средним данным из пяти определений строят калибровочный график "количество препарата (мкг) - оптическая плотность".
     
     Концентрацию экзотоксина (мг/м) воздуха () вычисляют по формуле:
     

,

     
где  - количество экзотоксина, найденное в анализируемом объеме пробы по калибровочному графику, мкг;
     
      - анализируемый объем воздуха, приведенного к нормальным условиям, л.
          
     Методические указания разработаны НИИ гигиены труда и профзаболеваний, г.Ташкент.
     
     
     
Текст документа сверен по:
официальное издание
Измерение концентраций вредных
веществ в воздухе рабочей зоны:
Сб. методических указаний. Вып.30. -
М.: Федеральный центр госсанэпиднадзора
Минздрава России, 2000