МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
НА ОПРЕДЕЛЕНИЕ МЕТА-НИТРОБЕНЗОАТА ЦИКЛОГЕКСИЛАМИНА
(ИНГИБИТОРА Ц-2) МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ В ВОЗДУХЕ

     
     
     УТВЕРЖДЕНЫ Заместителем Главного государственного санитарного врача СССР А.И.Заиченко N 1585-77 31 января 1977 г.
     
     

I. Общая часть

     
     1. Метод основан на хроматографировании мета-нитробензоата циклогексиламина в тонком слое окиси алюминия с последующим проявлением хроматограмм одним из проявляющих реагентов:
     
     1), реактивом Драгендорфа в сернокислой среде; 2), диазотированным п-нитроанилином; 3), диазотированной сульфаниловой кислотой. Количество ингибитора определяют путем визуального сравнения и окраски пятен пробы и стандартных растворов.
     
     2. Чувствительность определения 5 мкг в хроматографируемом объеме.
     
     3. Определению не мешают ингибиторы на основе дициклогексиламина. Мешают циклогексиламин и ингибиторы на основе циклогексиламина с  близким к  ингибитора Ц-2.
     
     4. Предельно допустимая концентрация ингибитора Ц-2 в воздухе (рекомендуемая) - 10 мг/м.
     
     

II. Реактивы и аппаратура

     
     5. Применяемые реактивы и растворы
     
     Мета-нитробензоат циклогексиламина (ингибитор Ц-2).
     
     Стандартный раствор Ц-2 с содержанием 100 мкг/мл, готовят растворением препарата в смеси этилового спирта и диэтилового эфира в соотношении 1:1.
     
     Окись алюминия для хроматографии, А-2, МРТУ 6-09-5296-68.
     
     Гипс медицинский, ГОСТ 4746-49, подсушенный при температуре 100-110 °С в течение 3-х - 4-х часов.
     
     Хлороформ, ГОСТ 3160-51.
     
     Спирт этиловый, ГОСТ 5962-67*
_______________
     * На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 51652-2000. - Примечание .
          
     Диэтиловый эфир.
     
     Кислота серная, ГОСТ 4204-66, 40% раствор
     
     Натр едкий, ГОСТ 4328-66, 5% раствор
     
     Висмут азотнокислый, основной, ГОСТ 4110-48.
     
     Кислота уксусная, ГОСТ 61-75.
     
     Калий йодистый, ГОСТ 4232-65.
     
     Кислота сульфаниловая, ГОСТ 5821-69.
     
     Натрий углекислый, ГОСТ 83-63, 5% раствор.
     
     Натрий азотистокислый, ГОСТ 4197-66 (нитрит натрия).
     
     Кислота соляная, ГОСТ 3118-67.
     
     П-Нитроанилин, ГОСТ 4398-59.
     
     Реактивы для проявления хроматограмм:
     
     N 1. Реактив Драгендорфа в сернокислой среде готовят следующим образом: к раствору, содержащему 850 мг основного азотнокислого висмута в 40 мл воды и 10 мл уксусной кислоты прибавляют раствор - 8 г йодистого калия в 20 мл воды. Для проявления хроматограмм к 2 мл полученной смеси прибавляют 6 мл 40%-ного раствора серной кислоты.
     
     N 2. Щелочной раствор диазотированной сульфаниловой кислоты. 4 г сульфаниловой кислоты растворяют в 60 мл 5% раствора углекислого натрия, прибавляют 2 г нитрита натрия и полученный раствор медленно приливают к 20 мл 20% раствора соляной кислоты, помещенной в лед, при этом энергично перемешивают. Выпавший осадок диазотированной сульфаниловой кислоты отмывают на воронке Бюхнера этиловым спиртом и сушат фильтровальной бумагой. Хранят в темном месте.
     
     N 3. Диазотированный п-нитроанилин. Растворяют 0,7 г п-нитроанилина в 9 мл концентрированной соляной кислоты и разбавляют до 100 мл водой. Непосредственно перед употреблением к этому раствору добавляют 1% раствор нитрита натрия и 5%-ный раствор бикарбоната натрия в соотношении 1:1:2.
     
     6. Применяемые посуда и приборы
     

     Пластинки стеклянные, размером 9х12 см.
     
     Пластинки покрывают сорбционной массой, для приготовления которой смешивают в фарфоровой ступке 50 г алюминия и 5 г гипса медицинского (оба компонента предварительно просеивают через сито 100 меш или капроновую ткань). Смесь растирают пестиком в течение 3-5 минут. Затем переносят в коническую колбу емкостью 200 мл, приливают 70-75 мл воды и взбалтывают в течение 15-20 минут. Полученной массой покрывают 12-14 пластинок. Сушат пластинки при комнатной температуре 12-24 часа. Хранят в затемненном эксикаторе.
     
     Камера хроматографическая с крышкой.
     
     Пульверизаторы стеклянные.
     
     Микропипетки, ГОСТ 1770-64, емкостью 0,1 мл.
     
     Пипетки, ГОСТ 20292-74, емкостью 1, 5 и 10 мл.
     
     Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, емкостью 100 мл.
     
     Колбы конические, емкостью 50 и 200 мл.
     
     Воронки стеклянные.
     
     Ступка фарфоровая с пестиком.
     
     Камера для опрыскивания.
     
     Аспирационное устройство.
     
     Патроны для фильтров.
     
     Фильтры АФА-ХА-18.
     
     

III. Отбор пробы воздуха

     
     Воздух, содержащий пары ингибитора Ц-2 протягивают со скоростью 0,3-0,5 л/мин через поглотительный прибор с 5 мл этилового спирта. Для анализа следует отобрать 2 л воздуха.
     
     Воздух, содержащий аэрозоль препарата отбирают со скоростью 3-5 л/мин через фильтр АФА-ХА-18. При наличии в воздухе паров и аэрозоля ингибитора пробы воздуха отбирают в одной и той же точке в поглотительный прибор, заполненный этиловым спиртом и одновременно на фильтр.
     
     

IV. Описание определения

     
     Переносят 2 мл пробы из поглотительного прибора в колориметрическую пробирку, приливают 2 мл диэтилового эфира и испаряют до объема 0,1 мл при температуре 20-25 °С.
     
     Фильтр с пробой переносят в стакан и заливают 5 мл смеси - этиловый спирт: диэтиловый эфир 1:1 и оставляют на 2 часа. Затем фильтр извлекают, отжимают стеклянной палочкой и промывают на воронке еще 5 мл смеси над стаканом с первоначальной экстрактивной жидкостью. Для анализа берут 1/3 экстрактивной жидкости и испаряют при температуре 20-25 °С до объема 0,1 мл. Упаренные экстракты проб наносят количественно на хроматографическую пластинку. Пробирки промывают дважды небольшими порциями растворителя (по 0,1-0,2 мл), нанося каждый раз промывную жидкость микропипеткой в центр первоначальных пятен. На расстоянии 1,5-2 см от проб наносят стандартный раствор Ц-2 в количествах: 0,005; 0,01; 0,015 мл, что соответствует 5, 10, 15 мкг препарата. (Прямолинейная зависимость между концентрацией препарата, размерами и интенсивностью окраски пятен наблюдается в интервале 5-50 мкг).
     
     Пластинку помещают в камеру для хроматографирования, предварительно заполненную смесью: этиловый спирт:хлороформ:вода - 4:3:1 в таком количестве, чтобы поставленная вертикально пластинка была погружена в подвижный растворитель на 0,5 см. После того, как растворитель поднимется по слою сорбента на 10 см (фронт растворителя), пластинку вынимают из камеры, оставляют на воздухе до полного удаления следов растворителя и проявляют хроматограммы. При проявлении хроматограмм реактивом Драгендорфа в среде серной кислоты Ц-2 проявляется тотчас же после обработки в виде красно-фиолетового пятна на кремовом фоне с  0,58-0,68. Величина и интенсивность окраски пятна находятся в прямой пропорциональной зависимости от концентрации препарата. Со временем интенсивность окраски пятна уменьшается. При обработке хроматограмм диазотированным п-нитроанилином или щелочным раствором диазотированной сульфаниловой кислоты ингибитор проявляется в виде желтого пятна на белом фоне, непосредственно после обработки хроматограмм ( 0,58-0,68). В указанном варианте идентификацию Ц-2 проводят после фиксации хроматограмм в сушильном шкафу при температуре 50-60 °С в течение 1-2 минут. Окраска пятна сохраняется 2 суток.
     
     Концентрацию мета-нитробензоата циклогексиламина () в мг/м воздуха вычисляют по формуле:
     

,

     
где  - количество Ц-2, найденное в хроматографическом объеме пробы, мкг;
     
      - общий объем пробы, мл;
     
      - объем пробы, взятый для анализа, мл;
     
      - объем исследуемого воздуха, приведенный к стандартным условиям по формуле (см. приложение 1), л.
     
     
     
Текст документа сверен по:
Методические указания на определение
вредных веществ в воздухе: Сборник. Вып.XIV.
/ Министерство здравоохранения СССР. - М., 1979