МУК 4.1.1608-03

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
по хроматографическому измерению концентраций N-{4-[2-(5-хлор-2-метоксибензамидо)-этил]-бензол-сульфонил}-
N'- циклогексилмочевины (глибенкламид) в воздухе рабочей
зоны методом тонкослойной хроматографии

Дата введения: с момента утверждения

     УТВЕРЖДЕНЫ Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г.Онищенко 29 июня 2003 г.
          

          
     
     Глибенкламид - белый или белый со слабым кремовым оттенком тонкодисперсный порошок без запаха, горького вкуса, легко растворим в диметилформамиде, умеренно растворим в хлороформе, растворим в этиловом спирте, практически не растворим в воде. Температура плавления 167-171 °С.
     
     В воздухе находится в виде аэрозоля.
     
     Обладает гипогликемическим действием.
     
     ОБУВ в воздухе - 0,01 мг/м.     
     

Характеристика метода

     Определение основано на хроматографировании пробы в тонком слое силикагеля восходящим методом в смеси растворителей хлороформ-гептан-ацетон-кислота уксусная ледяная (60:20:20:2), проявлении хроматограммы ультрафиолетовым светом и обнаружении глибенкламида в виде темных пятен.
     
     Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.
     
     Нижний предел измерения содержания глибенкламида в анализируемом объеме раствора 1 мкг.
     
     Нижний предел измерения концентраций глибенкламида в воздухе 0,005 мг/м (при отборе 300 л воздуха).
     
     Диапазон измеряемых концентраций в воздухе от 0,005 до 0,050 мг/м.
     
     Определению не мешает 4-[2-(5-хлор-2-метоксибензамидо)этил]-бензолсульфонамид и циклогексилизоцианат.
     
     Суммарная погрешность измерения не превышает ±18%.
     
     Время выполнения измерения, включая отбор проб, 3 часа.
     
     

Приборы, аппаратура, посуда

     Ртутно-кварцевая лампа ПРК-2 или ПРК-4, ТУ 16-535-230-74.
     
     Аспирационное устройство, ГОСТ 17.2.6.01-86*.
______________
     * На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 51945-2002. - Примечание изготовителя базы данных.
     
     Фильтродержатели, ТУ 95.72.05-77.
     
     Хроматографическая камера, ГОСТ 25336-82Е.
     
     Водяная баня, ТУ 64-1-2850-76.
     
     Чашки фарфоровые диаметром 40-50 мл, ГОСТ 9147-80Е.
     
     Бюксы вместимостью 10 мл, ГОСТ 25336-82Е.
     
     Колбы мерные вместимостью 25 мл, ГОСТ 1770-74 .
     
     Пипетки вместимостью 1, 5 мл, ГОСТ 29227-91.
     
     Микропипетки с оттянутым концом вместимостью 0,1 мл, ГОСТ 1770-74Е.
     
     Хроматоскоп.
     
     

Реактивы, растворы, материалы

     Глибенкламид, ВФС 42-1184-82.
     
     Спирт этиловый, ГОСТ 5962-67*.
______________
     * На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 51723-2001. - Примечание изготовителя базы данных.
     
     Хлороформ, ГОСТ 20015-74*.
______________
     * Действует ГОСТ 20015-88. - Примечание изготовителя базы данных.
         
     Гептан, ГОСТ 25828-83.
     
     Ацетон, ГОСТ 2603-79.
     
     Кислота уксусная ледяная, ГОСТ 61-75.
     
     Стандартный раствор N 1 с концентрацией глибенкламида 1 мг/мл готовят растворением 0,025 г глибенкламида в этиловом спирте в мерной колбе вместимостью 25 мл.
     
     Стандартный раствор N 2 с концентрацией глибенкламида 200 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 1 этиловым спиртом. Растворы устойчивы в течение 2 час при хранении в темном месте.
     
     Фильтры AФA-ВП-10, ТУ 95-743-80.
     
     Хроматографические пластинки Силуфол УФ-254 (15х15 см).
     
     

Отбор пробы воздуха

     Воздух с объемным расходом 20 л/мин аспирируют через фильтр АФА-ВП-10, помещенный в фильтродержатель. Для измерения 0,5 ОБУВ достаточно отобрать 300 л воздуха. Отобранные пробы хранят в темном месте не более месяца.
     
     

Проведение измерения

     Фильтр с отобранной пробой помещают в бюкс, заливают 4 мл этилового спирта и растворяют пробу в течение 2 мин, периодически помешивая стеклянной палочкой. Степень десорбции глибенкламида с фильтра составляет 98,5%. Затем, отжав фильтр стеклянной палочкой, извлекают его, переносят раствор в фарфоровую чашку и выпаривают на водяной бане. Сухой остаток растворяют в 0,15 мл этилового спирта.
     
     На хроматографической пластинке отмечают стартовую линию на расстоянии 1,5 см от нижнего края пластинки и при помощи микропипетки на середину стартовой линии наносят 0,1 мл пробы в одну точку так, чтобы размер пятен не превышал 10 мм и слой сорбента при этом не нарушался. Справа и слева от пробы на расстоянии 1,5-2 см наносят, как описано выше, 0,005; 0,010; 0,020; 0,030; 0,040 и 0,050 мл стандартного раствора N 2 глибенкламида, что соответствует 1, 2, 4, 6, 8 и 10 мкг препарата.
     
     Пластинку с нанесенными растворами помещают в хроматографическую камеру, на дно которой за 30 мин до хроматографирования налита смесь растворителей хлороформ-гептан-ацетон-кислота уксусная ледяная (60:20:20:2). После того как фронт растворителя достигнет верхнего края пластинки, ее вынимают из камеры и сушат на воздухе. При облучении пластинки УФ-светом глибенкламид проявляется в виде темных пятен на белом фоне.
     
     Количественное определение проводят путем сравнения интенсивности окраски и размера пятна пробы с пятнами стандартных растворов глибенкламида.
     
     

Расчет концентрации

     Концентрацию глибенкламида () в воздухе в мг/м вычисляют по формуле:
     

,

где  - содержание глибенкламида, найденное в анализируемом объеме пробы, мкг;
     
      - общий объем пробы, мл;
     
     - объем пробы, взятый для анализа, мл;
     
     - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям, л (см. Приложение 1).