МУК 4.1.1612-03

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
по газохроматографическому измерению концентраций
17-этинилэстратриен-1,3,5(10)-диола-3,17В (этинилэстрадиол)
в воздухе рабочей зоны

Дата введения: с момента утверждения

     УТВЕРЖДЕНЫ Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г.Онищенко 29 июня 2003 г.
     
     

          
     
     Этинилэстрадиол (17-этинилэстратриен-1,3,5(10)-диол-3,17В) - белый или кремовато-белый мелкокристаллический порошок.
     
     =181-186 °C. Практически не растворим в воде, растворим в спирте, ацетоне, хлороформе, тетрагидрофуране, диэтиловом эфире и растительных маслах.
     
     В воздухе находится в виде аэрозоля.
     
     Высокоопасное вещество (I класс опасности).
     
     В воздухе рабочей зоны не должен присутствовать.
     
     

Характеристика метода

     Определение этинилэстрадиола основано на использовании газовой хроматографии на приборе с электронно-захватным детектором с предварительным превращением этинилэстрадиола в его бис-трифторацетат.
     
     Отбор проб проводится с концентрированием на фильтр.
     
     Предел измерения содержания этинилэстрадиола 0,0025 мкг в анализируемой пробе.
     
     Предел измерения концентрации этинилэстрадиола в воздухе - 0,0001 мг/м (при отборе 2400 л воздуха).
     
     Диапазон измеряемых концентраций в воздухе от 0,0001 до 0,01 мг/м.
     
     Определению этинилэстрадиола не мешают эстрон и тестостерон.
     
     Время выполнения измерения, включая отбор проб, 1 час.
     
     Суммарная погрешность измерения не превышает ±20%.
     
     

Приборы, аппаратура и посуда

     Газовый хроматограф "Агат" с электронно-захватным детектором.
     
     Колонка хроматографическая стеклянная длиной 1,5 м и внутренним диаметром 2 мм.
     
     Весы аналитические ВЛА-200, ГОСТ 24104-88E*.
______________
     * На территории Российской Федерации действует ГОСТ 24104-2001. - Примечание изготовителя базы данных.
     
     Микрошприц вместимостью 10 мкл МШ-10, ТУ 2.833-106.
     
     Пробирки колориметрические вместимостью 10 мл, ГОСТ 1770-74E.
     
     Колбы мерные вместимостью 25 и 100 мл, ГОСТ 1770-74Е.
     
     Пипетки вместимостью 1, 2, 5 и 10 мл, ГОСТ 29227-91.
     
     Ротационный испаритель ИР-1М с набором колб, TУ 25-11-917-76.
     
     Аппарат для встряхивания пробирок АВ-30С, ТУ 64-1-2451-785.
     
     Электроаспиратор с расходомером ЭА-2С-М1, ТУ 2.840.016.
     
     Фильтродержатель ТУ 95-72-05-77.
     
     Допускается применение других приборов и вспомогательного оборудования с техническими и метрологическими характеристиками не хуже указанных выше.
     
     

Реактивы, растворы и материалы

     Этинилэстрадиол, содержание основного вещества не менее 99%.
     
     Тетрагидрофуран, х.ч., ТУ 6-09-3686-77.
     
     Трифторуксусный ангидрид, х.ч., ТУ 6-09-4135-75.
     
     Пиридин, х.ч., ГОСТ 13647-78.
     
     Фильтры АФА-ВП-10, ТУ 95-743-80.
     
     Азот газообразный в баллонах, о.с.ч., ГОСТ 9293-74.
     
     Хроматон N-AW c 5% фазы SE-30 - сорбент для хроматографической колонки с дисперсностью 0,1┘..*-0,20 мм.
________________
     * Брак оригинала. - Примечание изготовителя базы данных.
     
     Раствор трифторуксусного ангидрида в тетрагидрофуране готовят путем разведения 10 мл трифторуксусного ангидрида в 100 мл свежеперегнанного тетрагидрофурана. Раствор хранят не более недели.
     
     Основной стандартный раствор этинилэстрадиола с концентрацией 0,1 мг/мл готовят растворением 10 мг этинилэстрадиола в мерной колбе вместимостью 100 мл в тетрагидрофуране.
     
     Градуировочные растворы этинилэстрадиола с концентрацией от 0,05 мкг/мл до 5,0 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением основного стандартного раствора тетрагидрофураном.
     
     Срок хранения растворов в холодильнике 2 недели.
     
     Стандартные градуировочные растворы этинилэстрадиола с концентрациями 0,0001, 0,001, 0,002, 0,004, 0,01 мг/мл готовят путем соответствующего разведения основного стандартного раствора тетрагидрофураном.
     
     Срок хранения растворов в холодильнике 2 недели.
     
     

Отбор пробы воздуха

     Воздух с объемным расходом 100 л/мин аспирируют через фильтр, закрепленный в фильтродержателе, снабженный металлической сеткой. Для определения этинилэстрадиола на уровне 0,0001 мг/м следует отобрать 2400 л воздуха. Экспонированный фильтр складывают в 4 раза и помещает в бюкс с притертой крышкой. Фильтр хранят в холодильнике не более недели.
     
     

Подготовка к измерению

     Хроматографическую колонку заполняют сорбентом и кондиционирует в токе газа-носителя (скорость газа-носителя 50 л/мин) при отключенном детекторе, постепенно повышая температуру от 50 до 280 °С со скоростью 2 град/мин и выдерживают при 280 °С в течение 24 часов. После этого колонку присоединяют к детектору, снижают температуру до рабочей.
     
     В пробирки с притертыми пробками отбирают по 7 мл градуировочных растворов, добавляет 1 мл 10%-ного раствора трифторуксусного ангидрида в тетрагидрофуране и несколько капель пиридина. В результате реакции ацилирования образуется трифторацетат этинилэстрадиола с выходом 100%.
     
     Смесь выдерживают при комнатной температуре в течение 5 минут, затем переносят в колбу ротационного испарителя и отгоняют растворитель при комнатной температуре.
     
     Сухой остаток растворяют в 0,5 мл свежеприготовленного тетрагидрофурона и вводят по 5 мкл каждого градуировочного раствора в испаритель хроматографа через самоуплотняющуюся мембрану.
     
     На основании полученных данных строят градуировочную кривую, выражающую зависимость высоты пика (мм) от содержания вещества в градуировочном растворе (мкг).
     
     Построение градуировочного графика необходимо проводить по 5 точкам, проводя 5 параллельных определений для каждой концентрации.     
     

Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб

Проведение измерения

     Фильтр с отобранной пробой помещают в пробирку, заливают 3 мл свежеприготовленного тетрагидрофурана и встряхивает в течение 5 минут. Раствор сливают, отжимая фильтр стеклянной палочкой, затем операцию повторяют еще 2 раза, используя для экстракции по 2 мл тетрагидрофурана. Степень десорбции с фильтра 98%. Экстракты объединяют. Далее анализ проводят аналогично градуировочным растворам.
     
     

Расчет концентрации

     Концентрацию этинилэстрадиола "" в воздухе (в мг/м) рассчитывают по формуле:
     

,

где  - содержание трифторацетата этинилэстрадиола в хроматографируемом объеме, найденное по градуировочному графику, мкг;
     
      - общий объем раствора пробы, мл;
     
      - объем раствора пробы, взятый для хроматографирования, мл;
     
      - объем воздуха (л), отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям (см. Приложение 1).