МУК 4.1.754-99

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

ВЭЖХ определение хлорпропамида в воде

Дата введения: с момента утверждения

   
     Методические указания разработаны Н.И.Юрченко, Н.В.Фаминой, В.Ф.Алещенко (ВНЦ БАВ, Старая Купавна).

     УТВЕРЖДЕНЫ Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации - Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г.Онищенко 10 апреля 1999 г.
     
     
     Настоящие методические указания устанавливают количественный ВЭЖХ анализ воды централизованных систем питьевого водоснабжения для определения в ней содержания хлорпропамида в диапазоне концентраций 0,0005-0,01 мг/дм.
     

     
     N'-(п-хлорбензолсульфонил)-N"-11н-пропилмочевина хлорпропамид) - белый кристаллический порошок без запаха и вкуса. Температура плавления - 126-129 °С, практически не растворим в воде, малорастворим в эфире, растворим в спирте, ацетоне, бензоле, хлороформе, едких щелочах.
     
     Обладает общетоксическим действием. ПДК в воде централизованных систем питьевого водоснабжения - 0,001 мг/дм. Класс опасности - I.
     
     

1. Погрешность метода

     Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью, не превышающей ±13% (), при доверительной вероятности 0,95.
     
     

2. Метод измерений

     Измерения концентраций хлорпропамида выполняют методом ВЭЖХ с использованием УФ-детектора. Концентрирование вещества из воды осуществляют методом твердофазной экстракции с последующим элюированием.
     
     Нижний предел измерений - 0,0005 мг/дм.
     
     Определению не мешают ремантадин, адамантан, бромадамантан.
     
     

3. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы, материалы

3.1. Средства измерений

     
3.2. Вспомогательные устройства

     
3.3. Материалы

     
3.4. Реактивы

     
     
4. Требования безопасности

     4.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТу 12.1.005-88.
     
     4.2. При выполнении измерений с использованием газового хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТом 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.
     
     

5. Требования к квалификации операторов

     К выполнению измерений допускают лиц, имеющих квалификацию не ниже инженера-химика, с опытом работы на газовом хроматографе.
     
     

6. Условия измерений

     При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
     
     6.1. Процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят в нормальных условиях согласно ГОСТу 15150-69 при температуре воздуха 20±10 °С, атмосферном давлении 630-800 мм рт.ст. и влажности воздуха не более 80%.
     
     6.2. Выполнение измерений на газовом хроматографе производят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.
     
     

7. Подготовка к выполнению измерений

     Перед выполнением измерений проводят следующие работы: приготовление растворов, подготовка хроматографической колонки, установление градуировочной характеристики.
     

7.1. Приготовление растворов

     Исходный раствор хлорпропамида для градуировки (1 мг/см). 50 мг хлорпропамида вносят в мерную колбу, вместимостью 50 см, доводят объем до метки смесью 0,5 н раствора уксусной кислоты и этанола в соотношении 1:4 и перемешивают. Раствор устойчив в течение 2 недель при хранении в холодильнике.
     
     Рабочий раствор хлорпропамида для градуировки (0,02 мг/см). 1 см исходного раствора вносят в мерную колбу, вместимостью 50 см, доводят до метки смесью 0,5 н раствора уксусной кислоты и этанола в соотношении 1:4 и перемешивают. Раствор устойчив в течение 2 недель при хранении в холодильнике.
     
     1%-ный раствор уксусной кислоты. 1 см ледяной уксусной кислоты растворяют в 99 см дистиллированной воды. В холодильнике раствор можно хранить неограниченно долго.
     
     Подвижная фаза для хроматографирования. 50 см 1%-ного раствора уксусной кислоты смешивают с 50 см ацетонитрила. Срок хранения раствора - 1 мес. в холодильнике.
     
     0,5 н раствор уксусной кислоты. В мерную колбу, вместимостью 100 см, помещают 30-40 см дистиллированной воды, 3 см уксусной кислоты, доводят объем до метки дистиллированной водой и перемешивают. В холодильнике раствор можно хранить неограниченно долго.
     
     Смесь 0,5 н уксусной кислоты и этанола в соотношении 1:4 для приготовления градуировочных растворов. 30 см 0,5 н раствора уксусной кислоты смешивают со 120 см этанола.
     

7.2. Подготовка колонки для концентрирования

     На дно колонки помещают стеклянную вату, насыпают слой сорбента (30 мм) полисорб-1.
     

7.3. Установление градуировочной характеристики

     Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (мм) от концентрации хлорпропамида (мг/дм), устанавливают методом абсолютной градуировки на 5 сериях градуировочных растворов. Каждую серию, состоящую из 7 градуировочных растворов, готовят в мерных колбах, вместимостью 2 дм. Для этого в каждую колбу помещают рабочий раствор в соответствии с табл.1 и доводят объем дистиллированной водой до метки.
     
     

Таблица 1

Растворы для установления градуировочной характеристики
при определении концентрации хлорпропамида

     
     
     2 дм каждого градуировочного раствора подкисляют 0,5 н уксусной кислотой до рН 4,4, пропускают через стеклянную колонку для концентрирования со скоростью 20 см/мин, затем элюируют 10 см смеси 0,5 н уксусной кислоты и этанола в соотношении 1:4 двумя порциями по 5 см. Фильтрат помещают в грушевидную колбу, вместимостью 50 см, и упаривают досуха под вакуумом при температуре 50-60 °С. Сухой остаток растворяют в 1 см смеси 1%-ной уксусной кислоты и ацетонитрила (1:1). 10 см раствора хроматографируют при следующих условиях:
     

     
     На полученной хроматограмме измеряют площади пиков (мм) хлорпропамида и по средним результатам из 5 серий строят градуировочную характеристику.
     

7.4. Отбор проб

     Отбор проб воды проводят согласно ГОСТу 24481-80* в полиэтиленовую посуду. Объем пробы - 4 дм, срок хранения - 72 ч.
_______________
     * На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 51593-2000. - Примечание изготовителя базы данных.

8. Выполнение измерений

     2 дм анализируемой воды подкисляют 0,5 н раствором уксусной кислоты до рН 4,4, затем пропускают через стеклянную концентрирующую колонку. Анализ проводят в условиях построения градуировочной характеристики (п.7.3). На хроматограмме рассчитывают площади пиков.
     
     Перед обработкой любых результатов необходимо проанализировать "холостую пробу" дистиллированной воды по п.8, чтобы убедиться в отсутствии помех и загрязнений.
     
     

9. Обработка (вычисление) результатов измерений

     Концентрацию анализируемого вещества () определяют по градуировочной характеристике (мг/дм).
     
     Вычисляют среднее значение концентрации хлорпропамида в воде:
     

.

     
     Рассчитывают относительную разницу результатов 2 параллельных измерений 1 пробы:
     

,

     
где  - оперативный контроль сходимости, равный 18,3%.
     
     

10. Оформление результатов измерения

     Средние значения результатов измерения содержания формальдегида в 2 параллельных пробах оформляют протоколом по форме:     
     

Протокол N
количественного химического анализа хлорпропамида в воде

     
Результаты химического анализа

     
     
Руководитель лаборатории:

Исполнитель:
     
     

11. Контроль погрешности измерений

     11.1. Контроль сходимости. Выполняют по п.9. При превышении норматива оперативного контроля сходимости эксперимент повторяют. При повторном превышении норматива выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля, и устраняют их.
     
     11.2. Оперативный контроль погрешности. Проводится при смене реактивов, после ремонта прибора. Образцами для контроля являются реальные пробы питьевой воды, к которым делаются добавки измеряемых веществ в виде раствора. Отбирают 2 пробы воды и к 1 из них делают добавку таким образом, чтобы содержание определяемых веществ увеличилось по сравнению с исходным на 50-150%, так, чтобы концентрация в пробе не выходила за верхний диапазон. Каждую пробу анализируют в точном соответствии с прописью методики и получают результат анализа исходной рабочей пробы -  и рабочей пробы и с добавкой - . Результаты анализа исходной рабочей пробы -  и с добавкой -  получают по возможности в одинаковых условиях, т.е. их получает 1 аналитик с использованием 1 набора мерной посуды, 1 партии реактивов и т.д.
     
     Результаты контроля признаются удовлетворительными, если выполняется условие:
     

,

     
где  - добавка вещества, мкг/дм;
          
      - норматив оперативного контроля погрешности, мг/дм.
     
     При внешнем контроле (0,95) принимают:
     

,

     
где  и  - характеристика погрешности для исходной пробы и пробы с добавкой, мг/дм:
     

 и

     При внутрилабораторном контроле (0,90) принимают:
     

.