МУК 4.1.1571-03

     
     
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

     

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
по спектрофотометрическому измерению концентраций
3-холест-5,7-диен-3-ола бензоата (бензоата-7- дегидрохолестерина)
и 3-холест-5-ен-3-ола бензоата (бензоата холестерина)
в воздухе рабочей зоны

     
     
Дата введения: с момента утверждения

     
     
     УТВЕРЖДЕНЫ Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г.Онищенко 29 июня 2003 г.
     
     

     
Бензоат 7- дегидрохолестерина

          
Бензоат холестерина

     
     Бензоат 7- дегидрохолестерин - белый кристаллический порошок, без запаха и вкуса. Температура плавления 134 °С. Растворим в жирах и органических растворителях, нерастворим в воде.
     
     В воздухе находится в виде аэрозоля.
     
     Бензоат 7- дегидрохолестерин является малотоксичным веществом, не обладает раздражающим действием на кожу и слизистые оболочки глаз кроликов. Обладает специфическим влиянием на липидный обмен.
     
     ПДК бензоат 7- дегидрохолестерина в воздухе 1 мг/м. 3 класс опасности.
     
     Бензоат холестерина - белый кристаллический порошок, без запаха и вкуса. Температура плавления 147 °С. Растворим в жирах и органических растворителях, нерастворим в воде.
     
     В воздухе находится в виде аэрозоля.
     
     Бензоат холестерина является малотоксичным веществом, не обладает раздражающим действием на кожу и слизистые оболочки глаз кроликов. Специфическое влияние на липидный обмен менее выражено.
     
     ПДК бензоат холестерина в воздухе 4 мг/м. 3 класс опасности.
     

Характеристика метода

     
     Определение основано на образовании окрашенного комплексного соединения при взаимодействии холестерина с уксусным ангидридом и серной кислотой в хлороформе с последующим фотометрическим измерением продукта реакции при длине волны 675 нм.
     
     Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.
     
     Нижний предел измерения содержания бензоат 7- дегидрохолестерина в анализируем объеме раствора 40 мкг.
     
     Нижний предел измерения бензоат 7- дегидрохолестерина в воздухе 0,5 мг/м (при отборе 80 л воздуха).
     
     Диапазон измеряемых концентраций бензоат 7- дегидрохолестерина в воздухе от 0,5 до 10,0 мг/м.
     
     Определению не мешают: остаточные количества органических растворителей, мешают: холестерин и бензоат холестерина.
     
     Нижний предел измерения содержания бензоат холестерина в анализируемом объеме раствора 80 мкг.
     
     Нижний предел измерения бензоат холестерина в воздухе 2 мг/м (при отборе 40 л воздуха).
     
     Диапазон измеряемых концентраций бензоат холестерина в воздухе от 2 до 20 мг/м.
     
     Определению не мешают: остаточные количества органических растворителей; мешают - холестерин и бензоат 7- дегидрохолестерина.
     
     Суммарная погрешность измерения не превышает 20%
     

Приборы, аппаратура, посуда

     
     Спектрофотометр Specord М-40, Carl Zess.
     
     Весы аналитические ВЛА-200, ГОСТ 24104-88Е.
     
     Аспирационное устройство, модель 822, ТУ 64-1-862-82.
     
     Колбы мерные, вместимостью 25, 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74Е.
     
     Пипетки, вместимостью 1, 2, 5 и 10 мл, ГОСТ 29227-91.
     
     Пробирки колориметрические с пришлифованными пробками, вместимостью 10 мл, ГОСТ 25336-82Е.
     
     Бюксы, вместимостью 10 мл, ГОСТ 7148-70.
     
     Роторный испаритель ИP-1M, ТУ 25-11-917-74.
     
     Колбы грушевидные, вместимостью 25 мл, ГОСТ 9737-70.
     
     Воронки химические, ГОСТ 8613-75.
     
     Баня водяная лабораторная, МРТУ 64-186-23-68.
     
     Стеклянные палочки.
     

Реактивы, растворы, материалы

     
     Бензоат 7- дегидрохолестерина, СТП 0431-507-92.
     
     Бензоат холестерина, содержание основного вещества не менее 99,0%.
     
     Спирт этиловый, ректификат, ГОСТ 5963-67*, 95% и в смеси с хлороформом в соотношении (3:2).
_______________
     * Действует ГОСТ Р 51723-2001. - Примечание изготовителя базы данных.

     
     Кислота серная, ГОСТ 4204-77, х.ч., 1 н раствор.
     
     Хлороформ, ГОСТ 20015-74, х.ч.
     
     Уксусный ангидрид, ГОСТ 5815-77, ч.
     
     Стандартный раствор N 1 бензоат 7- дегидрохолестерина концентрацией 1000 мкг/мл готовят растворением 0,1400 г вещества в смеси этанол-хлороформ (3:2) в мерной колбе вместимостью 100 мл. Раствор устойчив в течение недели при хранении в холодильнике.
     
     Стандартный раствор N 2 с концентрацией бензоат 7- дегидрохолестерина 200 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 1 смесью этанол-хлороформ (3:2). Раствор устойчив в течение недели при хранении в холодильнике.
     
     Стандартный раствор N 1 бензоат холестерина концентрацией 1000 мкг/мл готовят растворением 0,1000 г вещества в смеси этанол-хлороформ (3:2) в мерной колбе вместимостью 100 мл. Раствор устойчив в течение недели при хранении в холодильнике.
     
     Стандартный раствор N 2 с концентрацией бензоат холестерина 200 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 1 смесью этанол-хлороформ (3:2). Раствор устойчив в течение недели при хранении в холодильнике.
     
     Фильтры АФА-ВП-10, ТУ 85-743-80.
     
     

Отбор проб воздуха

     
     Воздух с объемным расходом 10 л/мин аспирируют через фильтр АФА-ВП-10. Для измерения 1/2 ПДК бензоат 7- дегидрохолестерина следует отобрать 80 л воздуха, для измерения 1/2 ПДК бензоат холестерина 40 л воздуха.
     
     

Подготовка к измерению

     
     Градуировочные растворы (устойчивы в течение 7 часов) готовят согласно таблице:
     
     

Таблица

     
Шкала градуировочных растворов бензоат 7- дегидрохолестерина

     
     
Таблица

     
Шкала градуировочных растворов бензоат холестерина

     
     
     Градуировочные растворы перемешивают, затем переносят в грушевидные колбы и упаривают досуха под вакуумом при температуре водяной бани 60-70 °С. Сухой остаток растворяют в 4 мл хлороформа, добавляют по 1 мл уксусного ангидрида и 0,1 мл концентрированной серной кислоты и перемешивают. Через 20 минут после стояния пробирок в темном месте проводят фотометрирование.
     
     Измеряют оптическую плотность полученных растворов при длине волны 675 нм. Измерения проводят в кюветах с толщиной поглощающего слоя 10 мм по отношению к контрольной пробе, не содержащей определяемого вещества (раствор N 1 по таблице).
     
     Строят градуировочный график: на ось ординат наносят значения оптических плотностей градуировочных растворов, на ось абсцисс - соответствующие им величины содержания вещества в градуировочном растворе (мкг).
     
     Проверка градуировочного графика проводится 1 раз в 3 месяца или в случае использования новой партии реактивов.
     

Проведение измерения

     
     Фильтр с отобранной пробой переносят в бюкс, заливают 5 мл растворителя (смеси этанола:хлороформ в соотношении 3:2) и оставляют на 15 минут, периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения вещества. Затем фильтр тщательно отжимают и удаляют. Степень десорбции бензоат 7-дегидрохолестерина с фильтра 96%, а бензоат холестерина - 96,7%.
     
     Раствор переносят в грушевидную колбу и упаривают досуха под вакуумом при температуре водяной бани 60-70 °С. Сухой остаток растворяют в 4 мл хлороформа, добавляют по 1 мл уксусного ангидрида и 0,1 мл концентрированной серной кислоты и перемешивают. Через 20 минут после стояния пробирок в темном месте проводят фотометрирование. Оптическую плотность полученных растворов пробы измеряют аналогично градуировочным растворам по сравнению с контролем, который готовят одновременно и аналогично пробе, используя чистый фильтр.
     
     Количественное определение содержания веществ (в мкг) в анализируемой пробе проводят по предварительно построенному градуировочному графику.
     
     

Расчет концентрации

     
     Концентрацию веществ "" в воздухе (в мг/м) вычисляют по формуле:
     

,

     
где  - содержание вещества в анализируемом объеме раствора пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;
     
      - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям, л (см. Приложение 1).