МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ СОДЕРЖАНИЯ
КСИЛИДИНА НА КОЖЕ

     
     
     УТВЕРЖДЕНЫ заместителем Главного государственного санитарного врача СССР В.И.Чибураевым 28 сентября 1989 г. N 5117-89
     
     

     Технический продукт ксилидин представляет собой смесь изомеров с температурой кипения 214-226 °С.
     
     Ксилидин - жидкость со специфическим запахом, хорошо растворим в этаноле, эфире и некоторых других органических растворителях, плохо растворим в воде.
     
     

1. Характеристика методики

     
     Определение основано на хроматографировании ксилидина в тонком слое сорбента, с последующим проявлением хроматограмм -диметиламинобензальдегидом. В качестве смывающей жидкости используют этиловый спирт.
     
     Диапазон измеряемого содержания - 0,024 мг/см- 0,72 мг/см.
     
     Определению не мешают толуидин и анилин.
     
     Граница суммарной погрешности измерения не превышает ±20%.
     
     ПДУ ксилидина на коже - 0,08 мг/см.
     
     

2. Реактивы, растворы и материалы

     
     Этиловый спирт, ректификат, ГОСТ 5962-67*.
_______________
     * На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 51652-2000. - Примечание изготовителя базы данных.

     
     -Диметиламинобензальдегид, 1% раствор.
     
     Бензол, х.ч.
     
     Основной раствор ксилидина: в мерную колбу на 25 мл вносят 10-15 мл этилового спирта и взвешивают на аналитических весах. Добавляют 0,1-0,2 мл ксилидина и вновь взвешивают. По разности в весе определяют количество ксилидина. Объем доводят до метки этиловым спиртом и вычисляют содержание ксилидина в 1 мл.
     
     Раствор устойчив в течение двух недель.
     
     Стандартный раствор N 1, содержащий 10 мг/мл ксилидина, готовят соответствующим разбавлением основного раствора этиловым спиртом. Раствор готовят перед употреблением.
     
     Материал для смыва - вата, которую следует проверить на чистоту. В случае загрязнения ее надо предварительно прокипятить в дистиллированной воде, затем промыть этиловым спиртом и вновь горячей дистиллированной водой, просушить.
     
     

3. Приборы, аппаратура, посуда

     
     Спектрофотометр.
     
     Теплоэлектровентилятор.
     
     Пробирки колориметрические с притертыми пробками высотой 120 мм, внутренним диаметром 15 мм.
     
     Камера хроматографическая размером (22х25х12) см.
     
     Колбы мерные вместимостью 25 и 50 мл, ГОСТ 1770-74.
     
     Микропипетки, ГОСТ 20292-74*, вместимостью 0,1-0,2 мл.
_______________
     * Действуют ГОСТ 29169-91, ГОСТ 29227-91-ГОСТ 29229-91, ГОСТ 29251-91-ГОСТ 29253-91. - Примечание изготовителя базы данных.     

     
     Пипетки, ГОСТ 20292-74, вместимостью 1, 2 и 10 мл.
     
     Воронки стеклянные 3,0-3,5 см.
     
     Линзы плоско-выпуклые (+10 Д).
     
     Баня водяная.
     
     

4. Проведение измерения  

Условия проведения смыва

     
     Смыв с кожных покровов проводится способом обмыва.
     
     Для этого в фарфоровую чашку наливают 30 мл этилового спирта. Ватным тампоном (0,3 г), смоченным в смывающей жидкости, обмывают участок кожного покрова (100 см) сверху вниз. При этом тампон несколько раз обмакивают в жидкость. Смыв переносят в склянку. Одновременно проводят контрольный смыв с кожи у рабочих, не контактирующих с ксилидином.
     

Условия анализа

     
     Стеклянной палочкой ватный тампон тщательно промывают в смывной жидкости, переносят в воронку с фильтром, через который эту жидкость фильтруют в цилиндр. Затем вату промывают еще 10 мл этилового спирта (дробными порциями). Жидкость присоединяют к основному смыву и доводят общий объем пробы до 40 мл. На анализ берут 0,01 мл смыва (при большом содержании ксилидина - 0,005 мл).
     
     Пробу наносят на хроматографическую пластинку, которую помещают в хроматографическую камеру, предварительно заполненную бензолом. Бензол наливают в таком количестве, чтобы нижний край пластинки был погружен в растворитель на 1 см ниже линии старта. После того как растворитель поднимется по слою сорбента на 13 см (фронт растворителя), пластинку вынимают и снова подвергают хроматографированию, повторяя эту операцию 5 раз.
     
     Хроматограммы проявляют 1% раствором -диметиламинобензальдегида в этиловом спирте. Ксилидин проявляется в виде пятен желтого цвета с 0,23-0,27. Через 30 мин интенсивность окраски пятен измеряют на спектрофотометре СФ-10 при 430-435 нм. Для этого на входе лучей в интегрирующий шар, справа и слева по ходу их, ставят плоско-выпуклую линзу с оптической силой +10 Д (концентрируя световой поток до размеров 6,5х15 мм). Определяют отражения по всей площади окрашенной зоны. В качестве фона для сравнения берут хроматографические пластинки, обработанные таким же образом холостой пробой, т.е. смывом с кожи лиц, не контактирующих с ксилидином. Записывают отражение фона. Затем вместо правого, по ходу лучей, эталона помещают измеряемый образец и записывают его спектр отражения. Находят минимальное значение длины волны (для ксилидина 430-435 нм) и при этой длине волны вычисляют для каждой концентрации коэффициенты отражения  по формуле:
     

.

     
     Затем для каждой величины концентрации вычисляют значение функции отражения по формуле:
     

;

.

     
     Количество ксилидина в пробе находят по градуировочному графику, построенному на логарифмической бумаге и отражающему зависимость от количества ксилидина (мкг).
     
     Определение методом стандартных серий проводят путем сравнения интенсивности окраски зон проб ксилидина с окраской нанесенных на пластинку стандартных растворов.
     
     Градуировочный график и шкалу стандартов для визуального определения строят в условиях анализа пробы.
     
     Для этого из стандартного раствора N 1 готовят серию стандартных растворов с содержанием ксилидина 0,06 мг/мл, 0,09 мг/мл, 0,12 мг/мл, 0,15 мг/мл, 0,18 мг/мл. На хроматографическую пластинку наносят по 0,01 мл каждого из растворов, что соответствует содержанию ксилидина 0,6-0,9-1,2-1,5-1,8 мкг. Шкалу стандартов обрабатывают аналогично пробам.
     
     Содержание ксилидина (мг/см)  вычисляют по формуле:
     

,

     
где  - количество искомого вещества во всей пробе, мг;

     
      - площадь исследуемой части тела, см.