МУК 4.1.931-99

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
по измерению концентрации 1-фенил-3-метил-5-пиразолона
методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
в воздухе рабочей зоны

     
     
Дата введения: с момента утверждения

     УТВЕРЖДЕНЫ Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г.Онищенко 30.12.1999 г.
     
     

М.м. 174,2

        
     1-фенил-3-метил-5-пиразолон - кристаллическое вещество желтого цвета, хорошо растворим в горячей воде, водных растворах минеральных кислот, в метиловом и этиловом спиртах.  127 °С.  287 °С (при 205 мм рт.ст.). Плотность 1,637 г/см.
     
     В воздухе находится в виде аэрозоля.
     
     Обладает общетоксическим действием.
     
     ОБУВ в воздухе 0,5 мг/м.
     

Характеристика метода

     
     Метод основан на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением УФ-детектора.
     
     Отбор проб проводится с концентрированием на фильтр.
     
     Нижний предел измерения 1-фенил-3-метил-5-пиразолона в хроматографируемом объеме пробы (50 мкл) 0,1 мкг.
     
     Нижний предел измерения 1-фенил-3-метил-5-пиразолона в воздухе 0,25 мг/м (при отборе 40 л воздуха).
     
     Диапазон измеряемых концентраций 1-фенил-3-метил-5-пиразолона в воздухе от 0,25 до 5,0 мг/м.
     
     Определению не мешает присутствие тартразина, дибазола, мешает присутствие этадена, мерадина, аденинсульфата.
     
     Суммарная погрешность измерения не превышает ±20%.
     
     Время выполнения измерения, включая отбор пробы, около 50 минут.
     

Приборы, аппаратура, посуда

     
     Микроколоночный жидкостной хроматограф "Милихром" или другие модели с УФ-детектором.
     
     Хроматографическая колонка длиной 120 мм, внутренним диаметром 2 мм, заполненная сорбентом "Силасорб РН С" с размеров зерен 9,0 мкм
     
     Электроаспиратор ЭА-1, ОСТ 95.10052-84
     
     Фильтродержатель
     
     Микроскоп отсчетный типа МПБ-2, ТУ 3.3-824-78
     
     Стеклянная ректификационная колонна длиной 550 мм и внутренним диаметром 20 мм, флегмовое число 5 (или другая такого же типа)
     
     Колбы мерные, вместимостью 25, 100 мл и 1 л, ГОСТ 1770-74
     
     Пипетки, вместимостью 1, 5, и 10 мл, ГОСТ 20292-74*
________________
     * Действуют ГОСТ 29169-91, ГОСТ 29227-91-ГОСТ 29229-91, ГОСТ 29251-91-ГОСТ 29253-91. - Примечание изготовителя базы данных.
          
     Пробирки с пришлифованными пробками, вместимостью 10 мл, ГОСТ 10515-75
     

Реактивы, растворы, материалы

     
     1-фенил-3-метил-5-пиразолон ГОСТ 9593-74, содержание основного вещества не менее 98%.
     
     Метанол (спирт метиловый), очищенный.
     
     Метанол очищенный получают из метанола, ГОСТ 2222-78Е путем ректификации. Ректификационная колонна длиной 550 мм и внутренним диаметром 20 мм, флегмовое число 5. Насадка - спиральки Левина из нержавеющей стали (2х2х0,2 мм). Основную фракцию отбирают при температуре 64,5 °С (атмосферное давление) в пределах колебаний ±0,1 °С.
     
     Натрий фосфорнокислый двузамещенный 12-водный NaHPOх12HO (динатрийфосфат), ТУ 4172-76
     
     Калий фосфорнокислый однозамещенный, KHPO (калий фосфат), ТУ 4198-75
     
     0,067 М раствор динатрийфосфата готовят растворением 23,986 г натрия фосфорнокислого двузамещенного 12-водного в воде в мерной колбе вместимостью 1 л.
     
     0,067 М раствор калийфосфата готовят растворением 9,078 г калия фосфорнокислого однозамещенного в воде в мерной колбе вместимостью 1 л.
     
     0,067 М фосфатный буфер (рН 6,5) готовят смешивая 311 мл 0,067 М раствора динатрийфосфата и 689 мл 0,067 М раствор калийфосфата.     
     
     0,02 М фосфатный буфер (рН 6,5) готовят соответствующим разбавлением 0,067 М фосфатного буфера (рН 6,5) водой.
     
     Фосфатный буфер устойчив при хранении в холодильнике в течение месяца.
     
     Растворитель: 0,067 М фосфатный буфер (рН 6,5) - метанол, 1:1
     
     Элюент:  0,067 М фосфатный буфер (рН 7,2) - метанол (3:2)
     
     Стандартный раствор N 1 с концентрацией 1-фенил-3-метил-5-пиразолона 500 мкг/мл готовят растворением 0,05 г вещества в растворителе в мерной колбе вместимостью 100 мл.
     
     Стандартный раствор N 2 с концентрацией 1-фенил-3-метил-5-пиразолона 40 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 1 растворителем.
     
     Растворы устойчивы при хранении в холодильнике в течение суток.
     
     Фильтр АФА-ВП-10, ТУ 85-743-80
     

Отбор пробы воздуха

     
     Воздух с объемным расходом 5 л/мин аспирируют через фильтр АФА-ВП-10. Для определения 0,5ОБУВ достаточно отобрать 40 л воздуха.
     
     Пробы можно хранить в закрытых сосудах в холодильнике в течение месяца.
     

Подготовка к измерению

     
     Хроматографическая колонка промышленного изготовления.
     
     Количественный анализ проводят методом абсолютной калибровки с использованием градуировочных растворов, которые готовят с концентрацией от 0,002 до 0,04 мкг/мкл путем соответствующего разбавления стандартного раствора N 2 растворителем.
     
     Растворы используют в день приготовления.
     
     Инжектируют в хроматограф по 50 мкл каждого из градуировочных растворов, что соответствует содержанию от 0,1 до 2 мкг 1-фенил-3-метил-5-пиразолона.
     
     Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:
     

     
     На полученной хроматограмме измеряют площади пиков и строят градуировочный график, выражающий зависимость площади пиков (мм) от содержания 1-фенил-З-метил-5-пиразолона в хроматографируемом объеме пробы (мкг).
     
     Построение градуировочных графиков необходимо проводить не менее чем по 6 точкам, выполняя по 5 параллельных измерений для каждого ижектируемого объема. Проверку градуировочных графиков следует проводить при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в месяц.
          

Проведение измерения

     
     Фильтр с отобранной пробой помещают в пробирку с пришлифованной пробкой, добавляют 5 мл растворителя и оставляют на 30 минут при комнатной температуре и периодическом перемешивании. Степень десорбции с фильтра 97,5%.
     
     50 мкл анализируемого раствора инжектируют в колонку хроматографа.
     
     Хроматографирование анализируемого раствора проводят в тех жe условиях по отношению к тем же элюентам, что и при построении градуировочных графиков.
     
     Количественное определение содержания 1-фенил-3-метил-5-пиразолона в хроматографируемом объеме проводят по предварительно построенному градуировочному графику.
     

Расчет концентрации

     
     Концентрацию 1-фенил-3-метил-5-пиразолона "" в воздухе ( мг/м) вычисляют по формуле:
     

,

     
где  - содержание 1-фенил-3-метил-5-пиразолона в хроматографируемом объеме пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;
              
      - объем пробы, взятой на хроматографирование, мл;
            
      - общий объем анализируемого раствора, мл;
          
      - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям, л (см. Приложение 1).