МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ПРИКАЗ

от 3 апреля 2006 года N 105

Об утверждении Ветеринарных правил лабораторной диагностики гриппа А птиц

    
    
    В целях повышения эффективности борьбы с гриппом птиц и в соответствии с пунктом 5.2.11 Положения о Министерстве сельского хозяйства Российской Федерации, утвержденного постановлением Правительства Российской Федерации от 24 марта 2006 года N 164 (Собрание законодательства Российской Федерации, 2006, N 14, ст.1543),
    
приказываю:
    
    Утвердить Ветеринарные правила лабораторной диагностики гриппа А птиц согласно приложению.
    
    

Министр
А.В.Гордеев

    

Зарегистрировано
в Министерстве юстиции
Российской Федерации
27 апреля 2006 года,
регистрационный N 7761

    
Приложение
к приказу Минсельхоза России
от 3 апреля 2006 года N 105

    
    
ВЕТЕРИНАРНЫЕ ПРАВИЛА
лабораторной диагностики гриппа А птиц

    
1. Область применения

    
    1.1. Настоящие Правила устанавливают обязательные требования к организации лабораторной диагностики гриппа А птиц (далее - грипп птиц).
    
    1.2. Положения настоящих правил обязательны для выполнения на территории Российской Федерации органами государственной власти, предприятиями или иными хозяйствующими субъектами, учреждениями, организациями, общественными объединениями, независимо от их подчинения и форм собственности, должностными лицами и гражданами.
    
    

2. Общие положения

    
    2.1. Диагностические лабораторные исследования и серологические тесты по определению напряженности поствакцинального иммунитета (далее - лабораторные тесты) проводят в специализированных ветеринарных учреждениях.
    
    2.2. Лабораторная диагностика гриппа птиц направлена на выявление в исследуемых объектах ветеринарного надзора:
    
    вируса гриппа птиц;
    
    РНК вируса гриппа птиц;
    
    антигенов вируса гриппа птиц;
    
    антител к вирусу гриппа птиц.
    
    2.3. При проведении лабораторных тестов могут быть использованы методы лабораторных исследований, применяющие:
    
    тесты, утвержденные в установленном порядке;
    
    тесты, которые реализуются с использованием тест-систем, зарегистрированных в установленном порядке в Российской Федерации.
    
    

3. Обязательные требования по отбору проб для проведения диагностики гриппа птиц

    
    3.1. Отбор проб крови и патологического материала проводит ветеринарный работник, имеющий специальную подготовку.
    
    3.2. Пробы маркируются и опечатываются. К пробам прилагается сопроводительный документ, содержащий сведения о дате и месте отбора проб, юридическом или физическом лице - владельце птицы и месте его нахождения, виде, возрасте птицы и ее состоянии на момент отбора проб.
    
    3.3. Для проведения исследований осуществляют отбор проб патологического материала (органы, ткани головного мозга, легких, трахеи, селезенки, участков кишечника, почек, сердца) от павшей или убитой с диагностической целью птицы.
    
    3.4. От каждого стада птицы отбирают для исследований 5-10 трупов или патологический материал от 5-10 трупов, клоакальные и/или трахеальные смывы от 10-15 голов, 1-10 сборных проб помета от стада.
    
    У мелких видов птиц для отбора проб используют свежий помет.
    
    Пробу помета рекомендуется отбирать из расчета 1 грамм помета на 60 точек птичника (выгула или вольеры), выбранных по диагонали крест-накрест.
    
    3.5. Пробы крови для определения антител к вирусу гриппа птиц рекомендуется отбирать у 25-30 птиц из стада (партии), из одного птичника (зала) или одного населенного пункта, местности (водоема).
    
    Пробы крови отбирают из подкрыльцовой вены в пробирки, увлажненные физиологическим раствором. Кровь выдерживают до образования сгустка при комнатной температуре или в термостате при 37°С в течение 1-2 часов, затем обводят иглой или пастеровской пипеткой, отслаивая сгусток крови от стенок пробирки, и оставляют на 16-18 часов при температуре 2-4°С. Образовавшуюся прозрачную без признаков гемолиза сыворотку отбирают с помощью пипетки в отдельные чистые пробирки.
    
    Отбор крови допускается проводить с помощью иглы и шприца (или вакуумной пробирки).
    
    Рекомендуется проводить центрифугирование проб крови для получения сыворотки в течение 10-15 минут при 1000 об/мин для осаждения свободных эритроцитов.
    
    Для серодиагностики используют парные пробы сывороток крови, полученные от больных или инфицированных птиц, в начале заболевания и через 4-10 дней.
    
    3.6. Пробы транспортируются во влагонепроницаемой таре, в контейнере с хладоэлементами или в термосе со льдом. Допускается однократное замораживание сывороток.
    

    При транспортировке проб соблюдают установленные ветеринарно-санитарные правила и меры безопасности, предъявляемые к транспортировке биологических материалов, содержащих инфекционные агенты 3-й группы патогенности.
    
    3.7. Если немедленное исследование проб невозможно, допускается сохранять образцы на протяжении 4 дней при температуре 4°С.
    
    При необходимости для увеличения срока хранения диагностические образцы и/или изолят помещают в морозильную камеру с температурой -80°С.
    
    

4. Методы и сроки проведения лабораторных исследований

    
    4.1. Для установления диагноза на грипп птиц допускается применение следующих методов:
    
    а) для выявления вируса гриппа птиц - биопроба на СПФ (свободных от патогенной микрофлоры) - цыплятах с обязательным последующим подтверждением специфичности биологической реакции;
    
    б) для выделения вируса гриппа птиц - метод выделения вируса на СПФ - куриных эмбрионах или в культуре клеток;
    
    в) для обнаружения антигенов вируса гриппа птиц:
    
    иммуноферментный анализ (ИФА) для обнаружения одного или нескольких белков вируса;
    
    иммунопреципитация (двойная иммунодиффузия по Оухтерлони (далее - РДП) или иммуноэлектроосмофорез (далее - ИЭОФ);
    
    иммунохроматографические методы (далее - ИХА);
    
    радиоиммунный анализ (далее - РИА);
    
    непрямая гем- и латексагглютинация;
    
    реакция связывания комплемента (далее - РСК);
    
    г) для обнаружения гемагглютинина (гемагтлютинирующей активности) вируса гриппа птиц:
    
    реакция гемагтлютинации (далее - РГА) с подтверждением специфичности в реакции торможения гемагглютинации (РТГА);
    
    ИФА на основе моноспецифических сывороток или моноклональных антител к вирусному гемагглютинину;
    
    д) для обнаружения РНК вируса:
    
    полимеразная цепная реакция (далее - ПЦР);
    
    ПЦР с последующим секвенированием ее продуктов;
    
    Дот-блот и блот гибридизация нуклеиновых кислот;
    
    е) для обнаружения антител к вирусу гриппа птиц:
    
    ИФА;
    
    РДП и ИЭОФ;
    
    ИХА;
    
    РИА;
    
    РТГА;
    
    РСК;
    
    ж) для субтипирования вируса по гемагглютинину и нейраминидазе:
    
    РТГА;
    
    сиквенс к ДНК или ПЦР-продукта;
    
    ПЦР;
    
    Дот-блот и блот гибридизация нуклеиновых кислот;
    
    ИФА на основе моноспецифических сывороток или моноклональных антител к вирусному гемагглютинину;
    
    з) для субтипирования противовирусных антител по гемагглютинину:
    
    РТГА;
    
    ИФА на основе моноспецифических сывороток или моноклональных антител к вирусному гемагтлютинину.
    
    4.2. Применение иных тестов допускается для получения предварительных результатов.
    

    4.3. Методы проведения лабораторных исследований реализуются на основе утверждаемых в установленном порядке методик проведения обязательных диагностических исследований.
    
    4.4. Сроки проведения лабораторных исследований устанавливаются в зависимости от метода исследования и не могут превышать 1 месяца.

Текст документа сверен по:

Бюллетень нормативных актов
федеральных органов
исполнительной власти,
N 19, 08.05.2006