Курсы

USD ЦБ 03.12 30.8099 -0.0387
EUR ЦБ 03.12 41.4824 -0.0244

Индексы

DJIA 03.12 12019.4 -0.01
NASD 03.12 2626.93 0.03
RTS 03.12 1545.57 -0.07

отправить на печать

МУК 4.1.0.336-96

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение концентрации холестерина методом высокоэффективной
жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны

Дата введения: с момента утверждения

    РАЗРАБОТАНЫ 2 МОЛГМИ, г.Москва

    УТВЕРЖДЕНЫ и.о. Председателя Госкомсанэпиднадзора России - заместителем Главного государственного санитарного врача Российской Федерации Г.Г.Онищенко 8 июня 1996 года

М. м. 386,64

    Холестерин (10--(холест-5-ен-3-ол) - кристаллическое вещество белого цвета. Хорошо растворим в диоксане и гексане. Растворим в изопропиловом спирте. Не растворим в воде, метиловом и этиловом спиртах. 149 °С.

    В воздухе находится в виде аэрозоля.

    Обладает общетоксическим действием.

    ОБУВ в воздухе - 1 мг/м.

Характеристика метода

    Метод основан на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением УФ-детектора.

    Отбор проб производится с концентрированием на фильтр.

    Нижний предел измерения холестерина в хроматографируемом объеме пробы (50 мкл) - 0,2 мкг.

    Нижний предел измерения холестерина в воздухе (при отборе 40 л воздуха) - 0,5 мг/м.

    Диапазон измеряемых концентраций холестерина в воздухе от 0,5 до 10 мг/м.

    Определению не мешает динитробензонат эргокальциферола.

    Суммарная погрешность измерения не превышает ±20%.

    Время выполнения измерения, включая отбор пробы, - около 40 мин.

Приборы, аппаратура, посуда

Микроколоночный жидкостный хроматограф "Милихром" или другие модели с УФ-детектором
Хроматографическая колонка длиной 120 мм, внутренним диаметром 2 мм, заполненная сорбентом "Силасорб 600" с размером зерен 7,0 мкм (ЧСФР)
Электроаспиратор ЭА-1	ОСТ 95.10052-84
Фильтродержатель
Колбы мерные, вместимостью 100 мл	ГОСТ 1770-74
Пипетки, вместимостью 1, 10 мл	ГОСТ 20292-74
Пробирки с пришлифованными пробками, вместимостью 10 мл	ГОСТ 10515-75

Реактивы, растворы, материалы

Холестерин, фармакопейный
Гексан, х.ч.	ТУ 6-09-3375-78

    Гексан очищенный получают из гексана путем ректификации. Ректификационная колонка длиной 550 мм и внутренним диаметром 20 мм, флегмовое число 5. Насадка - спиральки Левина из нержавеющей стали (2х2х0,2 мм). Основную фракцию отбирают при температуре 69 °С (атмосферное давление) в пределах колебаний ±0,1°С.

Изопропанол, х. ч.

ТУ 9805-76

    Изопропанол очищенный получают из изопропанола путем ректификации. Ректификационная колонка длиной 550 мм и внутренним диаметром 20 мм, флегмовое число 5. Насадка - спиральки Левина из нержавеющей стали (2х2х0,2 мм). Основную фракцию отбирают при температуре 82,4 °С (атмосферное давление) в пределах колебаний ±0,1 °С.

    Элюент: гексан-изопропанол (50:1).

    Основной стандартный раствор с концентрацией холестерина 200 мкг/мл готовят растворением 0,02 г вещества в элюенте в мерной колбе вместимостью 100 мл.

    Раствор устойчив при хранении в холодильнике в течение недели.

Фильтры аналитические стекловолокнистые

ТУ 8-ЮП-1-77

Отбор пробы воздуха

    Воздух с объемным расходом 10 л/мин аспирируют через аналитический стекловолокнистый фильтр. Для определения 0,5 ОБУВ достаточно отобрать 40 л воздуха.

    Пробы можно хранить в закрытых сосудах в холодильнике в течение месяца.

Подготовка к измерению

    Хроматографическая колонка промышленного изготовления.

    Инжектируют в хроматограф от 0,2 до 4 мкг из основного стандартного раствора.

    Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:

температура термостата колонки	+20 °С;
скорость подачи элюента гексан:изопропанол (50:1)	200 мкл/мин;
длина волны УФ-детектора	212 нм;
скорость движения диаграммной ленты	6 мм/мин;
чувствительность детектора	0,2-0,8;
диапазон измерения самописца	100 мВ;
максимальный объем вводимой пробы	50 мкл;
время удерживания холестерина	5 мин 15 с;
элюирующий объем	1050 мкл;
эффективность колонки по холестерину	4600 тт.

    На полученной хроматограмме измеряют площади пиков и строят градуировочную кривую, выражающую зависимость площади пиков (мм) от содержания холестерина в хроматографируемом объеме пробы (мкг).

    Построение градуировочного графика необходимо проводить не менее чем по 6 точкам, выполняя по 5 параллельных измерений для каждого инжектируемого объема. Проверку градуировочного графика следует проводить при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в месяц.

Проведение измерения

    Фильтр с отобранной пробой помещают в пробирку с пришлифованной пробкой, добавляют 5 мл элюента и оставляют на 15 мин при комнатной температуре, периодически перемешивая. Степень десорбции с фильтра 96,5%.

    Хроматографирование анализируемого раствора проводят в тех же условиях по отношению к тому же элюенту, что и при построении градуировочного графика.

    Количественное определение содержания холестерина в хроматографируемом объеме проводят по предварительно построенному градуировочному графику.

Расчет концентрации

    Концентрацию холестерина "" в воздухе (мг/м) вычисляют по формуле:

, где

     - содержание холестерина в хроматографируемом объеме, найденное по градуировочному графику, мкг;

     - объем раствора пробы, взятой для анализа, мл;

     - общий объем анализируемого раствора, мл;

     - объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, л (см. приложение 1).



Текст документа сверен по:
официальное издание
Измерение концентраций вредных
веществ в воздухе рабочей зоны:
Сборник методических указаний.
МУК 4.1.0.272-4.1.0.340-96. Вып.31. -
М.: Федеральный центр Госсанэпиднадзора
Минздрава России, 1999