МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
по хроматографическому измерению концентраций бициклата
в воздухе рабочей зоны

     
     
     УТВЕРЖДЕНЫ заместителем Главного государственного санитарного врача СССР А.И.Заиченко 12 декабря 1988 г. N 4899-88
     
     

М. м. 250,5

          
     Жидкость - желтого цвета, температура кипения 64°С (0,075 мм рт.ст.). Давление паров 7,5·10 мм рт.ст. при 20 °С. Хорошо растворим в ацетоне, метаноле, ксилоле (при 25 °С 1000 г/л), хуже растворим в н-гексане (130 г/л). Растворимость в воде 2,2 г/л.
     
     В воздухе находится в виде паров и аэрозоля.
     
     Бициклат относится к высокотоксичным фосфорорганическим пестицидам, опасным при попадании на кожу. Кумулятивный эффект проявляется слабо.
     
     В механизме токсического действия этого пестицида ведущее значение имеет угнетение функции нервной системы, печени и почек.
     
     ПДК бициклата в воздухе 0,5 мг/м.
     
     

Характеристика метода

     
     Метод основан на использовании газожидкостной (с пламенно-фотометрическим детектором) и тонкослойной хроматографии.
     
     Отбор проб с концентрированием - бумажный фильтр "синяя лента", ацетон-вода 7:3.
     
     Нижний предел измерения в хроматографируемом объеме 0,005 мкг (ГЖХ), 2 мкг (ТСХ).
     
     Нижний предел измерения в воздухе 0,1 мг/м (ГЖХ), 0,2 мг/м (ТСХ), (при отборе 10 л воздуха).
     
     Диапазон измеряемых концентраций - 0,1-1 мг/м.
     
     Измерению не мешают наполнители технического препарата.
     
     Суммарная погрешность определения ±23%.
     
     Время выполнения измерения, включая отбор проб, - 2 часа.
     
     

А. Газохроматографический метод

Приборы, аппаратура, посуда

     
     Хроматограф с пламенно-фотометрическим (ПФД) детектором по фосфору (тип Цвет-164 и др.).
     
     Микрошприц МШ, на 10 мкл.
     
     Колонка стеклянная, длина 1 м, диаметр 3 мм.
     
     Аспирационное устройство.
     
     Поглотительные приборы с пористой пластинкой N 1.
     
     Ротационный испаритель с набором колб марки ИР-1 и ТУ 25-11-91776.
     
     Фильтры бумажные "синяя лента", ТУ 6-09-1678-77.
     
     Секундомер.
     
     Фильтродержатели.
     
     Пипетки, колбы, мерная посуда, ГОСТ 20292-74 и ГОСТ 1770-74.
     
     

Реактивы, растворы, материалы

     
     Ацетон, ч., ГОСТ 2603-79.
     
     Хлороформ, ч., ГОСТ 20015-74.
     
     Сульфат натрия безводный, ч., ГОСТ 4166-76.
     
     Хроматрон N-AW с 5% SE-30 (Хемапол, ЧССР).
     
     Стандартный раствор N 1 бициклата с содержанием 100 мкг/мл.
     
     Готовят растворением 10 мг препарата в мерной колбе на 100 мл ацетона. Хранят в холодильнике, устойчив в течение 2-х месяцев.
     
     Стандартные растворы бициклата с содержанием 10, 5 и 1 мкг/мл готовят соответствующим разведением ацетоном стандартного раствора N 1. Хранят не более 5 дней.
     
     Азот газообразный, ГОСТ 9293-74.
     
     Водород газообразный, ГОСТ 3022-70.
     
     

Отбор проб воздуха

     
     Воздух с объемным расходом 1 л/мин последовательно аспирируют через помещенный в фильтродержатель фильтр "синяя лента" и поглотитель, содержащий 10 мл смеси ацетон-вода 7:3 (при охлаждении льдом).
     
     Для определения 1/2 ПДК достаточно отобрать 10 л воздуха. Длительность хранения пробы в холодильнике (+4 °С) не более 2-х дней.
     
     

Подготовка к измерению

     
     Хроматографическую колонку с помощью вакуума заполняют готовой насадкой (около 2 г) - Хроматон N-AW с 5% SE-30 и кондиционируют при 220 °С в течение 5-6 часов в токе газа-носителя.
     
     Градуировочные растворы с содержанием бициклата от 1 до 10 мкг/мл готовят соответствующим разведением стандартного раствора N 1 ацетоном согласно таблице. Стандартные растворы бициклата устойчивы при хранении в холодильнике в течение 5 дней.
     
     

Таблица 2

     
Шкала градуировочных растворов

     
     
     Вводят 5 мкл каждого градуировочного раствора в хроматограф через самоуплотняющуюся мембрану. Строят градуировочную кривую, выражающую зависимость высоты пика (мм) от концентрации компонента (мкг/мл).
     
     Для каждой концентрации проводят не менее 5 параллельных измерений.     
     

Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб*

________________
     * При необходимости для работы можно использовать термоионный детектор (ТИД).
          

Проведение измерения

     
     Бумажный фильтр, содержащий аэрозоль, из фильтродержателя переносят в коническую колбу и заливают 20 мл ацетона. Экстрагируют бициклат в течение 30 мин. Экстракцию повторяют дважды. Объединяют, сушат безводным сульфатом натрия и сливают в колбу для отгонки растворителей.
     
     Смесь ацетон-вода 7:3 из поглотителя переносят в делительную воронку, прибавляют 200 мл дистиллированной воды и реэкстрагируют препарат дважды по 20 мл хлороформом. Объединенный хлороформный экстракт сушат безводным сульфатом натрия (5-7 г) и сливают в колбу для отгонки растворителей, где находится экстрат из фильтра. Концентрируют растворитель при температуре бани не выше 50 °С до объема 0,2-0,3 мл, досуха упаривают на воздухе.
     
     Остаток в колбе растворяют в 1 мл ацетона и 5 мкл микрошприцем вводят в испаритель хроматографа через самоуплотняющуюся мембрану. Записывают хроматограмму, замеряют высоту пика и по градуировочному графику находят концентрацию измеряемого компонента.
     
     

Расчет концентрации

     
     Концентрацию бициклата в мг/м "" вычисляют по формуле:
     

, где

 
      - концентрация вещества, найденная в поглотительном растворе по градуировочному графику, мкг/мл;
     
      - общий объем поглотительного раствора, мл;
     
      - объем воздуха, отобранный для анализа, приведенный к стандартным условиям, л.
     
     

Б. Метод тонкослойной хроматографии

Приборы, аппаратура, посуда

     
     Аспирационное устройство.
     
     Поглотительные приборы с пористой пластинкой N 1.
     
     Ротационный испаритель с набором колб марки ИР-IM, ТУ 25-11-917-76.
     
     Фильтры бумажные "синяя лента", ТУ 6-09-1678-77.
     
     Фильтродержатели, ТУ 25-11-1062-75.
     
     Пипетки, колбы, мерная посуда, ГОСТ 20292-74 и ГОСТ 1770-74.
     
     Облучатель ртутно-кварцевый, ТУ 64-1-1618-82.
     
     Камера хроматографическая, ГОСТ 1770-74.
     
     Пульвелизатор стеклянный, ГОСТ 10391-79.
     
     

Реактивы, растворы, материалы

     
     Ацетон, ч., ГОСТ 2603-79.
     
     Хлороформ, ч., ГОСТ 20015-79.
     
     Сульфат натрия безводный, ч., ГОСТ 4166-76.
     
     Аммиак водный 25%, ГОСТ 3760-79.
     
     н-Гексан, ч., ТУ 6-09-3375-78.
     
     Диэтиловый эфир, х.ч., ГОСТ 6662-79.
     
     Нитрат серебра, ч.д.а., ГОСТ 1277-79.
     
     Пластинки "силуфол" (Хемапол, ЧССР).
     
     Стандартный раствор бициклата, содержащий 100 мкг/мл вещества, готовят растворением 10 мг препарата в мерной колбе на 100 мл в ацетоне.
     
     Проявляющий реактив - водно-ацетоновый раствор аммиака серебра. 0,5 г нитрата серебра растворяют в 5 мл дистиллированной воды, добавляют 7 мл аммиаката (=0,9 г/см) и доводят до 100 мл ацетоном. Срок хранения 5-6 дней в холодильнике. Подвижная фаза гексан-ацетон 2:1.
     
     

Отбор проб воздуха

     
     Воздух со скоростью 1 л/мин последовательно аспирируют через помещенный в фильтродержатель фильтр "синяя лента" и поглотитель, содержащий 10 мл смеси ацетон-вода 7:3 (при охлаждении льдом).
     
     Для определения 1/2 ПДК следует отобрать 10 л воздуха. Длительность хранения пробы в холодильнике (+4 °С) не более 2-х дней.
     
     

Проведение измерения

     
     Бумажный фильтр, содержащий аэрозоль, из фильтродержателя переносят в коническую колбу и заливают 20 мл раствора. Экстрагируют бициклат в течение 30 мин. Экстракцию повторяют дважды. Объединяют экстракт, сушат безводным сульфатом натрия и сливают в колбу для отгонки растворителей. Смесь ацетон-вода 7:3 из поглотителя переносят в делительную воронку, прибавляют 200 мл дистиллированной воды и реэкстрагируют препарат дважды по 20 мл хлороформом. Объединенный хлороформный экстракт сушат безводным сульфатом натрия (5-7 г) и сливают в колбу для отгонки растворителей, где находится экстракт из фильтра. Концентрируют растворитель при температуре бани не выше 50 °С до объема 0,2-0,3 мл. Остаток в колбе количественно наносят при помощи капиллярной пипетки на хроматографическую пластинку так, чтобы диаметр пятна не превышал 1,5 см. Колбу с экстрактом смывают небольшими порциями диэтилового эфира, который наносят в центр пятна. Справа и слева от пятна наносят серию стандартных растворов, содержащих 2, 5, 7 и 10 мкг препарата. Пластинку с нанесенными растворами помещают в хроматографическую камеру, в которую за 30 мин до хроматографирования залита смесь гексан-ацетон 2:1. После поднятия фронта подвижного растворителя на 10 см пластинку вынимают и оставляют на несколько минут на воздухе для испарения подвижного растворителя. После этого пластинку обрабатывают из пульверизатора водно-ацетоновым раствором нитрата серебра и подвергают УФ-облучению в течение 30 мин. Бициклат проявляется в виде черного пятна на белом фоне.
     

     
     Количественное определение пестицида проводят путем сравнения интенсивности окраски и измерения площади пятна пробы и стандартного раствора. Измерение площади проводят с помощью миллиметровой бумаги. Прямолинейная зависимость между интенсивностью и площадью пятна с содержанием препарата в пятне соблюдается и интервале 2-10 мкг.
     
     

Расчет концентрации

     
     Концентрацию вещества "" в воздухе (в мг/м) вычисляют по формуле:
     

, где

      - количество вещества, найденное в пробе, мкг;
     
      - объем воздуха (в л), отобранный для анализа, приведенный к стандартным условиям (см. Приложение 1).
     
     
     
Текст документа сверен по:
Методические указания по измерению концентрации
вредных веществ в воздухе рабочей зоны. Вып.25. -
М.: Информационно-издательский центр
Госкомсанэпиднадзора Российской Федерации, 1994