МУК 4.1.1242-03

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
     

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение концентраций трибенурон-метила в атмосферном воздухе
населенных мест методом  высокоэффективной жидкостной хроматографии

     
     
Дата введения 2003-07-01

       
     
    УТВЕРЖДЕНЫ Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г.Онищенко 16 марта 2003 г.
     
        
     Настоящие методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения в атмосферном воздухе массовой концентрации трибенурон-метила в диапазоне 0,0024-0,024 мг/м.
     
     
     Трибенурон-метил - действующее вещество препарата ГРАНСТАР, СТС (750 г/кг), фирма-производитель Дюпон де Немур Интернэшнл С.А., Швейцария.
     
     2-{[N-(6-метил-4-метокси-1,3,5-триазин-2-ил)-N-метилкарбамоил]-сульфамоил}-бензойная кислота, метиловый эфир (IUPAC).

     Эмпирическая формула: CHNОS.
     
     Молекулярная масса: 395,4.
     
     Светло-коричневое кристаллическое вещество без запаха (технический продукт с содержанием основного вещества >95%). Температура плавления 141 °С. Давление паров при 25 °С: 5,2·10 мПа. Растворимость в органических растворителях при 25 °С (мг/дм): ацетонитрил - 54,2; ацетон - 43,8; этилацетат - 17,5; метанол - 3,39; четыреххлористый углерод - 3,12; гексан - 0,028. Растворимость в воде при 20 °С (г/дм): 0,05 (рН 5); 2,04 (рН 7).
     
     Константа диссоциации рКа - 5.
     
     Трибенурон-метил стабилен при температуре до 45 °С. Устойчив к гидролизу при рН 8-10, быстро разрушается в водных растворах при рН<7 и рН>12. Относительно неустойчив в большинстве органических растворителей.
     
     Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль.
     
     Область применения препарата. Трибенурон-метил рекомендуется к применению в качестве послевсходового гербицида широкого спектра активности для борьбы со многими широколистными сорными растениями на посевах зерновых колосовых культур.
     
     Ориентировочно безопасный уровень воздействия (ОБУВ) в атмосферном воздухе - 0,003 мг/м.
     
     

1. Погрешность измерений

     
     Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью, не превышающей ±25%, при доверительной вероятности - 0,95.
     
     

2. Метод измерения

     
     Измерения концентраций трибенурон-метила выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на обращенной фазе с ультрафиолетовым детектором.
     
     Концентрирование трибенурон-метила из воздуха осуществляют на бумажные фильтры "синяя лента", экстракцию с фильтра проводят этиловым спиртом.
     
     Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 1-5 нг.
     
     Определению не мешают компоненты препаративной формы, а также пестициды, применяемые при выращивании зерновых колосовых культур.
     
     

3. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы

     
3.1. Средства измерений

     
     Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.
     

3.2. Реактивы

     
3.3. Вспомогательные устройства

     
     Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.
     
     

4. Требования безопасности

     
     4.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими, легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.005-88.
     
     4.2. При выполнении измерений с использованием жидкостного хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.
     
     

5. Требования к квалификации операторов

     
     К выполнению измерений допускают лиц, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на жидкостном хроматографе.
     
     

6. Условия измерений

     
     При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
     
     - процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20±5) °С и относительной влажности не более 80%;
     
     - выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.
     
     

7. Подготовка к выполнению измерений

     
     Перед выполнением измерений проводят очистку ацетонитрила, подготовку подвижных фаз для ВЭЖХ, силиконирование стеклянной посуды, приготовление растворов, кондиционирование хроматографических колонок, установление градуировочной характеристики, отбор проб.
     

7.1. Очистка ацетонитрила

     
     Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора не менее 1 ч, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия.
     

7.2. Подготовка подвижных фаз для ВЭЖХ
     
7.2.1. Подвижная фаза N 1

     
     В мерную колбу вместимостью 1000 см помещают 560 см бидистиллированной воды, 1 см ортофосфорной кислоты, добавляют 440 см ацетонитрила, перемешивают, фильтруют и дегазируют.
     

7.2.2. Подвижная фаза N 2

     
     7.2.2.1. Приготовление 0,2%-ного раствора ортофосфорной кислоты. В мерную колбу объемом 1000 см помещают 500 см бидистиллированной воды, 2 см ортофосфорной кислоты, перемешивают, доводят до метки бидистиллированной водой и еще раз тщательно перемешивают.
     
     7.2.2.2. Приготовление подвижной фазы N 2. В мерную колбу вместимостью 1000 см помещают 500 см ацетонитрила, 100 см метилового спирта и 400 см 0,2%-ного раствора ортофосфорной кислоты. Смесь тщательно перемешивают, фильтруют и дегазируют.
     

7.3. Приготовление 0,012 н аммиачного раствора ацетонитрила

     
     В мерную колбу объемом 1000 см помещают 1,6 см 25%-ного водного раствора аммиака, доводят до метки ацетонитрилом и тщательно перемешивают.
     

7.4. Силиконирование стеклянной посуды

     
     Для силиконирования стекла (создания на поверхности стекла органилсиликоновой пленки с хорошими гидрофобными и адгезивными свойствами) использован 3%-ный раствор полиметилсилоксановой жидкости ПМС-100 в хлороформе. Перед силиконированием посуду тщательно моют и обезжиривают, просушивают, затем на несколько минут заливают раствором силикона (возможно его многократное использование). После выдерживания в сушильном шкафу при температуре 180-210 °С в течение 2 ч посуда готова к работе.
     

7.5. Приготовление градуировочных растворов
     
7.5.1. Исходный раствор трибенурон-метила для градуировки (концентрация 100 мкг/см)

     
     В мерную колбу вместимостью 100 см помещают 0,01 г трибенурон-метила, растворяют в 50-70 см 0,012 н аммиачного раствора ацетонитрила, доводят до метки этим же раствором, тщательно перемешивают. Раствор хранится в морозильной камере в течение суток.
     
     Рабочие градуировочные растворы трибенурон-метила готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного стандартного раствора.
     

7.5.2. Рабочие растворы трибенурон-метила для градуировки

     
     7.5.2.1. Градуировочные растворы N 1-5 (концентрация 0,5-5 мкг/см). В 5 мерных колб вместимостью 100 см помещают по 0,5; 1,0; 2,0; 3,0 и 5,0 см исходного стандартного раствора с концентрацией 100 мкг/см (п.7.5.1), доводят до метки подвижной фазой N 2 (п.7.2.2), тщательно перемешивают, получают рабочие растворы NN 2-6 с концентрацией трибенурон-метила 0,05; 0,1; 0,2; 0,3 и 0,5 мкг/см, соответственно.
     
     7.5.2.2. Градуировочные растворы N 6-11 (концентрация 0,05-1,0 мкг/см). В 5 мерных колб вместимостью 50 см помещают по 0,5; 1,0; 2,0; 3,0 и 5,0 см стандартного раствора N 5 с концентрацией 5 мкг/см, доводят до метки подвижной фазой N 1 (п.7.2.1), тщательно перемешивают, получают рабочие растворы NN 6-11 с концентрацией трибенурон-метила 0,05; 0,1; 0,2; 0,3, 0,5 и 1,0 мкг/см, соответственно.
     
     Рабочие стандартные растворы готовят непосредственно перед хроматографированием.
     

7.6. Отбор проб

     
     Отбор проб воздуха проводят в соответствии с требованиями ГОСТ 17.2.4.02-81 "ОПА. Общие требования к методам определения загрязняющих веществ в воздухе населенных мест". Воздух со скоростью 5 дм/мин аспирируют через фильтр "синяя лента", помещенный в фильтродержатель.
     
     Для измерения концентрации трибенурон-метила на уровне 0,8 ОБУВ атмосферного воздуха необходимо отобрать 45-100 дм воздуха.
     
     Срок хранения отобранных проб, помещенных в полиэтиленовые пакеты, в холодильной камере при +4 °С - 2 дня.
     

7.7. Кондиционирование хроматографических колонок

     
     Промывают колонку подвижной фазой (п.7.2) в течение 30 мин при скорости подачи растворителя 0,4 или 0,1 см/мин до установления стабильной базовой линии.
     

7.8. Установление градуировочной характеристики

     
     Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (отн. единицы) от концентрации трибенурон-метила в растворе (мкг/см), устанавливают методом абсолютной калибровки по 5 растворам для градуировки: растворы NN 1-5 или растворы NN 6-11.
     
     При проведении измерений с детектированием при длине волны 230 нм используют растворы для градуировки NN 6-10, при длине волны 254 нм - растворы NN 1-5 или N 7-11.
     
     В инжектор хроматографа вводят по 20 мм градуировочного раствора NN 6-11 или по 10 мм раствора NN 1-5 и анализируют в условиях хроматографирования по п.7.7.1. Осуществляют не менее 3 параллельных измерений.
     

7.8.1. Условия хроматографического анализа

     
     Измерения выполняют при следующих режимных параметрах:
     
     7.8.1.1. Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором Perkin-Elmer (США)
     
     Колонка стальная длиной 25 см, внутренним диаметром 2,1 мм, содержащая Spherisorb S5 ODS 2, зернением 5 мкм
     
     Температура колонки: комнатная
     
     Подвижная фаза: ацетонитрил-вода-ортофосфорная кислота (44:56:0,1, по объему)
     
     Скорость потока элюента: 0,4 см/мин
     
     Рабочая длина волны: 230 (254) нм
     
     Чувствительность:
     
     0,01 ед. абсорбции на шкалу (длина волны 230 нм)
     
     0,005 ед. абсорбции на шкалу (длина волны 254 нм)
     
     Объем вводимой пробы: 20 мм
     
     Ориентировочное время выхода трибенурон-метила: 7,8-8,0 мин
     
     Линейный диапазон детектирования:
     
     1-10 нг (при длине волны 230 нм)
     
     2-20 нг (при длине волны 254 нм)
     
     7.8.1.2. Альтернативные условия хроматографирования
     
     Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором Милихром (Россия)
     
     Колонка стальная длиной 64 мм, внутренним диаметром 2 мм, содержащая
     
     Сепарон С18, зернением 5 мкм
     
     Температура колонки: комнатная
     
     Подвижная фаза: ацетонитрил-метанол-0,2%-ная ортофосфорная кислота (50:10:40, по объему)
     
     Скорость потока элюента: 100 мм/мин
     
     Рабочая длина волны: 254 нм
     
     Чувствительность: 0,2 ед. абсорбции на шкалу
     
     Объем вводимой пробы: 10 мм
     
     Ориентировочное время выхода трибенурон-метила: 4,3-4,4 мин
     
     Линейный диапазон детектирования: 5-50 нг
     
     Образцы, дающие пики большие чем рабочий градуировочный раствор с максимальной для используемых условий хроматографирования концентрацией, разбавляют соответствующей подвижной фазой.
     
     Градуировочный график проверяют ежедневно по анализу 1-2 стандартных растворов различной концентрации. Если получаемые результаты отличаются более чем на 6% от данных, заложенных в градуировочную характеристику, ее строят заново, используя свежеприготовленные рабочие стандартные растворы.
     
     

8. Выполнение измерений

     
     Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 см, заливают 10 см этилового спирта, помещают на встряхиватель на 10 мин. Растворитель сливают, фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями этилового спирта объемом 10 см.
     
     Объединенный экстракт упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °С почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха, остаток растворяют в 2 см подвижной фазы N 1 (п.7.2.1) или в 0,5 см подвижной фазы N 2 (п.7.2.2) и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в п.7.8.1.1 или 7.8.1.2, соответственно.
     
     Пробу вводят в инжектор хроматографа не менее двух раз. Устанавливают площадь пика.
     
     Перед анализом опытной пробы проводят хроматографирование холостой (контрольной) пробы - экстракта неэкспонированного фильтра.
     
     

9. Обработка результатов измерений

     
     Массовую концентрацию трибенурон-метила в пробе атмосферного воздуха, , мг/м, рассчитывают по формуле:
     

, где

     
      - концентрация трибенурон-метила в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/см;
     
      - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см;
     
      - объем пробы воздуха, отобранный для анализа, приведенный к нормальным условиям (давление 760 мм рт.ст., температура 0 °С), дм.
     

, где

     
      - температура воздуха при отборе пробы (на входе в аспиратор), °С;
     
      - атмосферное давление при отборе пробы, мм рт.ст;
     
      - расход воздуха при отборе пробы, дм/мин;
     
      - длительность отбора пробы, мин.
     
     Примечание. Идентификация и расчет концентрации трибенурон-метила в пробах могут быть проведены с помощью компьютерных программ обработки хроматографических данных.
     
     

10. Оформление результатов измерений

     
     За результат анализа () принимается среднее арифметическое результатов двух параллельных определений  и  (), расхождение между которыми не превышает значений норматива оперативного контроля сходимости (): .
     

, мг/м, где

     
      - норматив оперативного контроля сходимости, мг/м;
     
      - норматив оперативного контроля сходимости, % (равен 10%).
     
     При превышении норматива оперативного контроля сходимости измерения повторяют. При повторном превышении норматива  выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и устраняют их.
     
     Результат количественного анализа представляют в виде:
     
     - результат анализа  (мг/м), характеристика погрешности , %, =0,95 или  мг/м, =0,95, где
     

, мг/м

     
     Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и погрешность.
     
     

11. Контроль погрешности измерений

     
     Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями МИ 2335-95 "ГСИ. Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа".
     
     

12. Разработчики

     
     Ракитский В.Н., Юдина Т.В., Федорова Н.Е., Волкова В.Н. (Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф.Эрисмана, г.Мытищи Московской обл.).
     
     
     
Текст документа сверен по:
официальное издание
Определение остаточных количеств пестицидов
в пищевых продуктах, сельскохозяйственном
сырье и объектах окружающей среды:
Сб. методических указаний.
Выпуск 2. Часть 8. МУК 4.1.1240-4.1.1243-03. -
М.: Федеральный центр гигиены
и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2005