МУК 4.1.1599-03

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
по измерению концентраций натриевой соли 6-аминогексановой кислоты
и натриевой соли 6-аминогексановой кислоты, ацилированной высшими
 кислотами (реагент ААК или Таллактам), в воздухе рабочей зоны
методом бумажной хроматографии

Дата введения: с момента утверждения

     УТВЕРЖДЕНЫ Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г.Онищенко 29 июня 2003 г.
     
     

          
     
     Натриевая соль 6-аминогексановой кислоты - кристаллическое вещество, практически не растворимо в органических растворителях, растворимо в воде, при нагревании выше 250 °С разлагается.
     
     

          
     Реагент ААК - кристаллическое вещество, практически не растворимо в органических растворителях, растворимо в воде, тем. плавления 140-150 °С.
     
     Обладают общетоксическим действием.
     
     В воздухе находятся в виде аэрозоля.
     
     ОБУВ в воздухе натриевой соли 6-аминогексановой кислоты и реагента ААК - 10 мг/м.
     
     

Характеристика метода

     Определение проводят методом восходящей бумажной хроматографии (бумага F N 6) с последующим проявлением, элюированием окрашенных в фиолетовый цвет пятен и измерением оптической плотности растворов при 405 нм.
     
     Отбор проб проводят с концентрированием на бумажный фильтр "белая лента".
     
     Нижний предел измерения содержания в анализируемом объеме:
     

     
     Нижний предел измерения концентрации в воздухе:
     
     натриевой соли 6-аминогексановой кислоты 5 мг/м (при отборе 24 л воздуха)

     реагента ААК 5 мг/м (при отборе 720 л воздуха)
     
     Диапазон измеряемых концентраций:
     
     натриевой соли 6-аминогексановой кислоты и реагента ААК от 5 до 20 мг/м.
     
     Суммарная погрешность измерения ±25%.
     
     Время выполнения измерения, включая отбор проб, - сутки.
     
     Разделение на бумаге идет 14-16 часов.
     
     

Приборы, посуда, аппаратура

     Спектрофотометр СФ-26.
     
     Аспирационное устройство, ТУ 64-1-862-72.
     
     Фильтродержатель ТУ 95-72-05-77.
     
     Хроматографическая камера размером 24х800 мм с лодочкой и подставкой для лодочки, ГОСТ 1065-78.
     
     Стеклянный пульверизатор ГОСТ 19391-71.
     
     Баня водяная ТУ 64-1-2850-76.
     
     Колбы мерные вместимостью 25, 50 мл, ГОСТ 1770-74E.
     
     Пробирки колориметрические с пришлифованными пробками, высотой 120 мм и диаметром 15 мм, ГОСТ 25336-82Е.
     
     Пипетки вместимостью 1, 2, 5, 10 мл, ГОСТ 29227-91.
     
     Микропипетки вместимостью 0,2 мл, ГОСТ 29227-91.
     
     Пробирки стеклянные высотой 40-45 мм и внутренним диаметром 12 мм, ГОСТ 25336-82Е.
     
     Стаканы химические вместимостью 25, 50 мл, ГОСТ 19908-80*.
______________
     * На территории Российской Федерации действует ГОСТ 19908-90. - Примечание изготовителя базы данных.

     Воронки делительные вместимостью 1000 мл, ГОСТ 8613-64.
     
     

Реактивы, растворы, материалы

     Натриевая соль 6-аминогексановой кислоты, ТУ 6-14-22-219-83.
     
     Реагент ААК ТУ 6-14-22-219-83.
     
     Этиловый спирт х.ч., ГОСТ 5962-67*.
______________
     * На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 51652-2000. - Примечание изготовителя базы данных.
     
     Н-бутиловый спирт ч., ГОСТ 6006-78.
     
     Кислота уксусная х.ч., ГОСТ 6169-78.
     
     Нингидрин МРТУ 6-09-2726-65, 1% свежеприготовленный раствор в ацетоне.
     
     Ацетон, ч.д.а., ГОСТ 2603-79.
     
     Водно-спиртовой раствор (1:5).
     
     Подвижная фаза: н-бутанол, ледяная уксусная кислота, вода (4:1:3).
     
     Вода дистиллированная, ГОСТ 6709-72.
     
     Реактивы смешивают в делительной воронке, встряхивают и оставляют на 30-40 минут. После разделения для анализа используют верхний слой.
     
     Бумага хроматографическая F N 6, Германия, или аналогичная.
     
     Фильтр бумажный "белая лента" МРТУ 6-06-2411-65.
     
     Стандартный раствор N 1 натриевой соли 6-аминогексановой кислоты с концентрацией 2 мг/мл готовят растворением 50 мг вещества в дистиллированной воде в мерной колбе вместимостью 25 мл.
     
     Стандартный раствор N 2 реагента ААК с концентрацией 100 мг/мл готовят растворением 5,0 г вещества в дистиллированной воде в мерной колбе вместимостью 50 мл.
     
     Растворы устойчивы в течение месяца.
     
     

Отбор пробы воздуха

     Воздух с объемным расходом 5 л/мин (для натриевой соли 6-аминогексановой кислоты) и 25 л/мин (для реагента ААК) аспирируют через бумажный фильтр "белая лента". Для измерения 1/2 ОБУВ следует отобрать 24 л (натриевая соль 6-аминогексановой кислоты) и 720 л (реагент ААК) воздуха.
     
     Пробы сохраняются месяц.
     
     

Подготовка к измерению

     Для построения графика зависимости: масса вещества - величина оптической плотности раствора, готовят градуировочные растворы.
     
     Градуировочные растворы натриевой соли 6-аминогексановой кислоты с концентрацией 0,4; 0,8; 1,2; 1,6 мг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 1 водно-спиртовым раствором (1:5).
     
     Градуировочные растворы реагента ААК с концентрацией 12, 24, 36, 48 мг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 2 водно-спиртовым раствором.
     
     Растворы устойчивы в течение месяца.     
     

Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб

     На бумажные фильтры "белая лента" наносят 0,30 мл градуировочных растворов натриевой соли 6-аминогексановой кислоты и реагента ААК, помещают в химический стакан, заливают 10 мл водного-спиртового раствора, оставляют на 10 минут, периодически перемешивая. Затем фильтрат сливают в пробирку, фильтр отжимают, экстракцию повторяют дважды. Общий фильтрат дробно выпаривают на водяной бане при температуре 50-60 °С досуха, в пробирках высотой 40-45 мм. Сухой остаток растворяют 0,3 мл водно-спиртового раствора, на анализ отбирают 0,15 мл раствора.
     
     На листе хроматографической бумаги шириной 180 мм и длиной 600 мм на расстоянии 70 мм от нижнего края проводят линию старта. На расстоянии 2,5 см друг от друга наносят по 0,15 мл из каждого обработанного градуировочного раствора, что соответствует 60, 120, 180 и 240 мг натриевой соли 6-аминогексановой кислоты и 1800, 3600, 5400 и 7200 мкг реагента ААК, и затем высушивают.
     
     Бумагу помещают в камеру, на дно которой за 1,5-2 часа до хроматографирования наливают верхний слой подвижной фазы из делительной воронки высотой 25-30 мм, бумагу закрепляют сверху.
     
     После поднятия растворителя на высоту 350-500 мм бумагу вынимают из камеры, сушат, орошают 1% свежеприготовленным раствором нингидрина в ацетоне. Хроматограмму сушат и помещают на 5 мин в сушильный шкаф при температуре 100 °С.
     
     Натриевая соль 6-аминогексановой кислоты и реагент ААК проявляются в виде фиолетовых пятен.  натриевой соли 6-аминогексановой кислоты 0,5±0,05;  реагента ААК 0,3±0,05.
     
     Окраска пятен устойчива в течение 1 часа.
     
     После проявления хроматограммы вырезают каждое окрашенное пятно из бумаги, измельчают, помещают в пробирку и заливают 3,5 мм водно-спиртового раствора и оставляют на 20-25 минут, периодически встряхивая.
     
     Окрашенный в фиолетовый цвет прозрачный слой жидкости фотометрируют в кювете с толщиной слоя 10 мм при длине волны 405 нм.
     
     По полученным данным строят градуировочный график зависимости, откладывая на оси ординат средние значения оптических плотностей растворов, а на оси абсцисс - соответствующие им массы веществ (в мкг).
     
     Проверка градуировочного графика проводится один раз в месяц.
     
     

Проведение измерения

     Фильтр с отобранной пробой помещают в химический стакан и далее обрабатывают так же, как и градуировочные растворы.
     
     На линию старта хроматографической бумаги наносят 0,15 мл пробы и "свидетелей".
     
     Хроматографирование, обработку полученной хроматограммы проводят аналогично градиуировочным растворам.
     
     Величину оптической плотности раствора пробы измеряют в кювете с толщиной поглощающего слоя 10 мм при длине волны 405 нм.
     
     По соответствующему градуировочному графику и величине оптической плотности раствора пробы находят массу вещества в хроматографируемом объеме (0,15 мл).
     
     

Расчет концентрации

     Концентрацию вещества в мг/м воздуха "" вычисляют по формуле:
     

,

где  - масса вещества, найденная в хроматографируемом объеме пробы, мкг;
     
      - общий объем пробы, мл;
     
      - объем пробы, взятый для анализа, мл;
     
      - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям, л (см. Приложение 1).