МУК 4.1.892-99

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
по измерению концентраций 4-[(2-гидрокси-3-изопропиламино)пропокси]
фенилацетамида бензоата (бензоата атенолола) в воздухе рабочей зоны
методом тонкослойной хроматографии

     
     
Дата введения: с момента утверждения

     УТВЕРЖДЕНЫ Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г.Онищенко 30.12.1999 г.
     
     

М.м. 388,48

     Бензоат атенолола. Кристаллический порошок белого цвета с температурой плавления 156-158 °С. Растворим в воде и этаноле.
     
     В воздухе находится в виде аэрозоля.
     
     Обладает общетоксическим действием.
     
     ПДК в воздухе 1,0 мг/м.
     
     

Характеристика метода

     
     Определение основано на хроматографировании вещества в тонком слое на пластинках Сорбфил с последующим обнаружением хроматограмм раствором нингидрина и денситометрировании окрашенных зон при длине волны 513 нм.
     
     Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.
     
     Нижний предел измерения вещества в анализируемом объеме 4 мкг.
     
     Нижний предел измерения вещества в воздухе 0,5 мг/м (при отборе 40,0 л воздуха).
     
     Диапазон измеряемых концентраций в воздухе от 0,5 до 5,0 мг/м.
     
     Определению не мешают 4-[(2,3-эпокси)пропокси]фенилацетамид, этиловый и изопропиловый спирт.
     
     Суммарная погрешность измерения не превышает ±20%.
     
     Время выполнения измерения 2 часа 30 мин, включая отбор проб.
     

Приборы, аппаратура, посуда

     
     Спектрофотометр Спекорд М-40 с приставкой для измерения отражения с фотометрическим шаром, денситометр БИАН-170.
     
     Аспирационное устройство.
     
     Фильтродержатели.
     
     Хроматографическая камера для ТСХ размером 10x20 см, ГОСТ 23932-79.
     
     Пластинки для тонкослойной хроматографии Сорбфил ПТСХ-П-А, ТУ 26-11-17-89.
     
     Хроматографическая камера для ТСХ, ГОСТ 23932-79.
     
     Стаканы химические, вместимостью 50 мл, ГОСТ 19908-80.
     
     Вакуумная установка.
     
     Колбы грушевидные вместимостью 25 мл, ГОСТ 23932-79.
     
     Посуда стеклянная лабораторная, ГОСТ 1770-74E, 20292-74*.
________________
     * Действуют ГОСТ 29169-91, ГОСТ 29227-91-ГОСТ 29229-91, ГОСТ 29251-91-ГОСТ 29253-91. - Примечание изготовителя базы данных.
          
     Сушильный шкаф.
     

Реактивы, растворы, материалы

     
     Бензоат атеналола фармакопейный с содержанием не менее 99,0%.
     
     Этиловый спирт, ГОСТ 5963-67*.
_______________
     * Действует ГОСТ Р 51723-2001. - Примечание изготовителя базы данных.

     
     Метиловый спирт, ГОСТ 6995-77.
     
     Хлороформ, ТУ 6-09-4263-76.
     
     Аммиак водный, 25% раствор, ГОСТ 3760-79.
     
     Нингидрин, х.ч. (ЧСФР).
     
     Подвижный растворитель: хлороформ - метанол (50:10) мл. В камеру дополнительно помещают бюкс с 25 мл 25% раствора аммиака.
     
     Проявляющий реактив: в мерную колбу на 100 мл помещают 1,0 г нингидрина, растворяют в этаноле при нагревании, охлаждают, доводят объем раствора до метки и перемешивают.
     
     Стандартный раствор N 1 с концентрацией 1000 мкг/мл готовят растворением 0,1000 г вещества в этиловом спирте в мерной колбе вместимостью 100 мл. Раствор устойчив в течение двух недель при хранении в холодильнике.
     
     Рабочие стандартные растворы с концентрацией 40-60-100-200-300-400 мкг/мл вещества, готовят соответствующим разбавлением этанолом стандартного раствора N 1. Растворы устойчивы в течение двух недель при хранении в холодильнике.
     
     Фильтры АФА-ВП-10, ТУ 95-743-80.
     
     

Отбор пробы воздуха

     
     Воздух с объемным расходом 5 л/мин аспирируют через фильтр АФА-ВП-10. Для измерения 1/2ПДК следует отобрать 40,0 л воздуха. Хранение проб допускается в течение 3 суток в холодильнике.
     
     

Подготовка к измерению

     
     На линию старта пластинки (от края 1,5 см) наносят с помощью микропипетки по 0,1 мл растворов с концентрацией вещества от 40 до 400 мкг/мл, которые готовят аналогично пробам (но растворяют в 1 мл этанола). Диаметр пятна не должен превышать 0,5 см. Пластинку высушивают на воздухе в течение 3 мин и помещают в камеру для хроматографирования с системой растворителей хлороформ - метанол (50:10) мл и бюксом вместимостью 25 мл с 25% раствором аммиака. После того как фронт растворителя пройдет до конца пластинки, ее вынимают из камеры и помещают в сушильный шкаф при температуре 120 °С на 5 мин. Затем пластинку опрыскивают проявляющим реактивом и помещают в сушильный шкаф при температуре 120 °С на 3 мин. Бензоат атенолола проявляется в виде оранжево-коричневых пятен на светлом фоне c =0,73±0,02.
     
     Интенсивность окраски пятен вещества измеряют на спектрофотометре Спекорд М-40 с приставкой для отражения с фотометрическим шаром при длине волны 513 нм по отношению к фону. В качестве фона используется участок исследуемой пластинки без вещества. Для каждой концентрации измеряют отражение () в %. Оптическая плотность () и отражение () связаны между собой соотношением:
     

где  - выражено в %, тогда
     

 или   

     
     По средним результатам из пяти определений строят градуировочный график: на ось ординат наносят значение оптических плотностей градуировочных хроматограмм, на ось абсцисс - соответствующее им количество вещества в мкг в градуировочном растворе.
     

Проведение измерения

     
     Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан, доливают 6 мл этанола и оставляют на 15 мин, периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения вещества. Затем фильтр отжимают и удаляют. Степень десорбции вещества с фильтра 96%. Полученный раствор сливают в грушевидную колбу и упаривают досуха под вакуумом при температуре 60-65 °С. Сухой остаток растворяют в 0,5 мл этанола и используют полученный раствор для анализа.
     
     Далее поступают аналогично градуировочным растворам.
     
     При использовании планиметра количество вещества "" (в мкг) в анализируемом объеме пробы находят по формуле:
     

,

     
где  - содержание вещества на пятне стандарта, мкг;
               
      - площадь пятна пробы, мм.
           
      - площадь пятна стандарта, мм.
     
     При использовании денситометра содержание вещества в анализируемом объеме находят по градуировочному графику.
     

Расчет концентрации

     
     Концентрацию бензоата атенолола в воздухе "" (мг/м) вычисляют по формуле:
     

,

     
где - содержание вещества, найденное по градуировочному графику, мкг;
               
      - общий объем раствора пробы, мл;
             
      - объем раствора пробы, используемый для анализа, мл;
            
      - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям, л (см. Приложение 1).