МУК 4.1.1521-03

     
     
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

     
     
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
по спектрофотометрическому измерению концентраций N-L--аспартил-L-фенилаланина-метилового эфира (аспартама)
в воздухе рабочей зоны

     
     
Дата введения: с момента утверждения

     
     
     УТВЕРЖДЕНЫ Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г.Онищенко 29 июня 2003 г.
     
     

          
     Аспартам-N-L--acпартил-L-фенилаланина-метиловый эфир. Белый кристаллический порошок с температурой плавления 230-234 °С с разложением. Слабо растворим в воде, умеренно растворим в спирте.
     
     В воздухе находится в виде аэрозоля.
     
     Обладает общетоксическим действием.
     
     ПДК в воздухе - 2,0 мг/м.
     
     

Характеристика метода

     
     Определение основано на реакции аспартама с п-нитрофенилдиазонием с образованием окрашенного в красный цвет диазоаминосоединения и последующим фотометрическим анализом при длине волны 520 нм.
     
     Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.
     
     Нижний предел измерения содержания вещества в анализируемом объеме пробы 5 мкг.
     
     Нижний предел измерения концентрации вещества в воздухе 0,5 мг/м (при отборе 50 л воздуха).
     
     Диапазон измеряемых концентраций вещества в воздухе от 0,5 до 10,0 мг/м.
     
     Определению не мешают сахароза, фруктоза, крахмал.
     
     Суммарная погрешность измерения не превышает ±20%.
     
     Время выполнения измерений 2 часа, включая отбор проб.
     
     

Приборы, аппаратура, посуда

     
     Спектрофотометр или фотоэлектроколориметр со светофильтром 520 нм.
     
     Аспирационное устройство, модель 822, ТУ 64-1-862-72.
     
     Пипетки вместимостью 1, 2, 10 мл, ГОСТ 29227-91.
     
     Пробирки колориметрические вместимостью 10 мл, ГОСТ 25336-82Е.
     
     Стаканы химические вместимостью 25 мл, ГОСТ 25336-82Е.
     
     Колбы мерные вместимостью 25, 100 мл, ГОСТ 1770-74Е.
     
     

Реактивы, растворы, материалы

     
     Аспартам с содержанием не менее 98%. Американская фармакопея U.S.Р. 23.
     
     Натрия гидроокись, х.ч., ГОСТ 4328-77, 20% раствор.
     
     Соляная кислота, х.ч., ГОСТ 3118-77, 1 н. раствор и 0,01 н р-р.
     
     п-Нитроанилин, ТУ 6-09-258-70, 0,1% раствор в 1 н. соляной кислоте.
     
     Натрий азотистокислый, х.ч., ГОСТ 4197-74, 0,5% раствор.
     
     п-Нитрофенилдиазоний (готовят перед использованием). К 10 мл предварительно охлажденного раствора п-нитроанилина добавляют 1 мл охлажденного раствора натрия азотистокислого и взбалтывают. Через 2 мин, после обесцвечивания, раствор готов к использованию. Раствор хранят на льду в течение 1 часа.
     
     Калий фосфорнокислый однозамещенный, ГОСТ 4198-75.
     
     Натрий тетраборнокислый 10-водный (бура), ГОСТ 4199-76.
     
     Буферный раствор: 4,08 г однозамещенного фосфата калия и 1,6 г буры растворяют в 80 мл воды, добавляют 6,35 мл 20% раствора едкого натра и доводят объем до 100 мл.
     
     Стандартный раствор N 1 с концентрацией аспартама 500 мкг/мл готовят растворением 0,05 г вещества в 0,01 н растворе соляной кислоты в мерной колбе вместимостью 100 мл (раствор готовят при нагревании на водяной бане при 60 °С). Раствор устойчив в течение недели.
     
     Стандартный раствор N 2 с концентрацией 50 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 1 0,01 н. раствором соляной кислоты. Раствор устойчив в течение недели при хранении в холодильнике.
     
     Фильтры АФА-ВП-10, ТУ 95-743-80.
     
     

Отбор пробы воздуха

     
     Воздух с объемным расходом 10 л/мин аспирируют через фильтр АФА-ВП-10. Для измерения 1/2ПДК следует отобрать 25 л воздуха. Срок хранения проб две недели при хранении в холодильнике.
     
     

Подготовка к измерению

     
     Градуировочные растворы (устойчивы в течение суток) готовят согласно таблице.
     
     

Таблица

     
Шкала градуировочных растворов

     
     
     В подготовленные градуировочные растворы вносят по 2 мл буферного раствора и по 0,5 мл п-нитрофенилдиазония, перемешивают и оставляют при комнатной температуре на 30 минут. После этого приливают по 1 мл 20% раствора натра едкого. Растворы перемешивают и через 15 мин измеряют оптическую плотность.
     
     Измерение проводят в кюветах с толщиной поглощающего слоя 10 мм при длине волны 520 нм по отношению к раствору сравнения, не содержащему определяемого вещества (раствор N 1 по таблице).
     
     Строят градуировочный график: на ось ординат наносят значение оптических плотностей градуировочных растворов, на ось абсцисс - соответствующие им величины содержания вещества в градуировочном растворе (мкг).
     
     Проверка градуировочного графика проводится 1 раз в 3 месяца или в случае использования новой партии реактивов.
     
     

Проведение измерения

     
     Фильтр с отобранной пробой переносят в пробирку, приливают 10 мл 0,01 н. раствора соляной кислоты и помещают на водяную баню при температуре 60 °С на 15 мин, периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения вещества. Затем фильтр тщательно отжимают и удаляют. Степень десорбции с фильтра 96%.
     
     2 мл полученного раствора помещают в колориметрическую пробирку, приливают 2 мл буферного раствора и 0,5 мл п-нитрофенилдиазония, перемешивают и оставляют при комнатной температуре на 30 минут. После этого приливают по 1 мл 20% раствора натра едкого.
     
     Через 15 мин измеряют оптическую плотность аналогично градуировочным растворам. Раствором сравнения служит контрольный раствор, который готовят одновременно и аналогично пробам, используя чистый фильтр.
     
     Количественное определение аспартама проводят по предварительно построенному градуировочному графику.
     
     

Расчет концентрации

     
     Концентрацию аспартама "" в воздухе (в мг/м) вычисляют по формуле:
     

,

     
где  - содержание вещества в анализируемом объеме раствора пробы, мкг;
     
      - общий объем раствора пробы, мл;
     
      - объем раствора пробы, взятый для анализа, мл;
     
      - объем воздуха (в л), отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям, (см. Приложение 1).