МУК 4.1.1553-03

     
     
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

     
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
по измерению концентрации монофосфорного эфира 4-метил-5--оксиэтил-N-(2'-метил-4'-амино-5'-метилпиримидил)-тиазолия
монофосфата (фосфотиамина) в воздухе рабочей зоны
методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

     
     
Дата введения: с момента утверждения

     
     
     УТВЕРЖДЕНЫ Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г.Онищенко 29 июня 2003 г.
     
     

          
     Фоcфотиамин - Монофосфорный эфир 4-метил-5--оксиэтил-N-(2-метил-4-aмино-5-мeтилпиримидил) тиaзолия фосфат - белый кристаллический порошок со слабым запахом. Легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 95% и хлороформе.
     
     В воздухе находится в виде аэрозоля и паров.
     
     Обладает общетоксическим действием.
     
     ОБУВ в воздухе 0,1 мг/м.
     

Характеристика метода

     
     Методика основана на применении высокоэффективной жидкостной хроматографии с использованием УФ-детектора.
     
     Отбор проб проводится с концентрированием на фильтр и в метанол.
     
     Нижний предел измерения в хроматографируемом объеме (10 мкл) - 0,025 мкг.
     
     Нижний предел измерения в воздухе 0,05 мкг/м (при отборе 10 л воздуха).
     
     Диапазон измеряемых концентраций вещества в воздухе от 0,05 до 0,6 мг/м.
     
     Суммарная погрешность измерения не превышает ±20%.
     
     Время выполнения измерения, включая отбор проб, 1,5 час.
     

Приборы, аппаратура, посуда

     
     Микроколоночный жидкостной хроматограф Милихром или другой модели с УФ-детектором.
     
     Хроматографическая колонка длиной 64 мм, внутренним диаметром 2 мм, заполненная сорбентом Силасорб С.
     
     Весы аналитические BЛP-200, ГОСТ 24104-88 E.
     
     Аспирационное устройство, ГОСТ 17.2.6.01-86*.
_______________
     * На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 51945-2002. - Примечание изготовителя базы данных.
          
     Стаканы химические вместимостью 25 мл, ГОСТ 25336-82.
     
     Вакуумная установка или роторный испаритель ИР-1, ТУ 25-11-9177.
     
     Колбы мерные вместимостью 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74Е.
     
     Пипетки вместимостью 1, 2, 5, 10 мл, ГОСТ 29227-91.
     
     Колбы грушевидные, вместимостью 25 мл, ГОСТ 19908-90.
     
     Пробирки мерные, вместимостью 10 мл, ГОСТ 1770-74Е.
     
     Поглотительные сосуды с пористой пластинкой. ТУ 25-11-1136-75
     
     Воронка фильтрующая.
     
     Лупа изнурительная ЛИ-3-10Х, ГОСТ 8309-75.
     

Реактивы, растворы, материалы

     
     Фосфотиамин с содержанием не менее 90% ФС 42-2331-85 Россия.
     
     Спирт метиловый, ГОСТ 6995-77, 50% раствор.
     
     Кислота о-фосфорная, ГОСТ 6552-80.
     
     Элюент: к 100 мл 50% спирта метилового добавляют около 0,2 мл о-фосфорной кислоты до рН 2,4.
     
     Стандартный раствор N 1 с концентрацией 1000 мкг/мл фосфотиамина готовят растворением 0,1100 г вещества в спирте метиловом 50% в мерной колбе вместимостью 100 мл.
     
     Раствор устойчив в течение 2 недель при хранении в холодильнике.
     
     Стандартный раствор N 2 с концентрацией 100,0 мкг/мл фосфотиамина готовят из стандартного раствора N 1 соответствующим разбавлением спиртом метиловым 50% в мерной колбе вместимостью 50 мл.
     
     Градуировочные растворы с концентрацией 2,5-5-10-15-20-30 мкг/мл фосфотиамина готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 2 спиртом метиловым 50%.
     
     Растворы применяют свежеприготовленными.
     
     Фильтры АФА-ХА-10, ТУ 85-743-80.
     

Отбор пробы воздуха

     
     Воздух с объемом расходом 1 л/мин аспирируют через фильтр АФА-ХА-10 и поглотительный сосуд с 5 мл 50% метанола. Отбор проб производят с охлаждением. Для измерения 0,5ОБУВ следует отобрать 10 л воздуха. Срок хранения отобранных проб одни сутки в холодильнике.
     
     

Подготовка к измерению

     
     Инжектируют в хроматограф от 0,025 до 0,3 мкг фосфотиамина из градуировочных растворов при максимальном объеме вводимой пробы 10 мкл.
     
     Хроматографическая колонка промышленного изготовления.
     
     Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:
     

     
     На полученной хроматограмме измеряют площади пиков и строят градуировочную кривую, выражающую зависимость площади пиков (мм) от содержания вещества в хроматографируемом объеме пробы (мкг).
     
     Построение градуировочного графика необходимо проводить  не менее чем по 5 точкам, выполняя 6 параллельных измерений для каждого раствора. Проверку градуировочного графика следует проводить при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в месяц.
     
     

Проведение измерения

     
     Фильтр и содержимое поглотительного сосуда помещают в колориметрическую пробирку и доводят объем до 5 мл 50% метанола. Оставляют  на 10-15 мин, периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения вещества. Затем фильтр отжимают и удаляют. Степень десорбции с фильтра 96%. Полученный раствор сливают в грушевидную колбу и упаривают досуха под вакуумом при температуре 50-60 °С. Сухой остаток растворяют в 0,2 мл спирта метилового 50%, подкисленного кислотой о-фосфорной до  рН 2,4.
     
     Параллельно с анализом проб проводят хроматографирование раствора, полученного обработкой чистого фильтра.
     
     Хроматографирование анализируемого раствора проводят в тех же условиях, что и при построении градуировочного графика.
     
     Количественное определение фосфотиамина (мкг) проводят по предварительно построенному градуировочному графику.
     
     

Расчет концентрации

     
     Концентрацию фосфотиамина в воздухе "" (мг/м) вычисляют по формуле:
     

,

     
где  - содержание вещества в хроматографируемом объеме пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;

      - общий объем раствора пробы, мл;
     
      - объем раствора пробы, взятый для хроматографирования, мл;
     
      - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям, л (см. Приложение 1).