МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИИ БЕНЗОТРИАЗОЛА
В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ

     
     
     УТВЕРЖДЕНЫ заместителем Главного государственного санитарного врача СССР А.И.Заиченко 5 ноября 1985 г. N 3947-85
     
     

     
     Бензотриазол (азимидобензол) - кристаллическое вещество белого цвета, Тпл. 100 °С, Ткип. 201-204 °С при давлении 15 мм рт.ст. Плохо растворим в холодной воде, растворим в горячей воде, этаноле, эфире, бензоле, ацетоне и хлороформе. Нерастворим в н-гексане и н-гептане. В воздухе находится в виде паров и аэрозоля.
     

Метод А. Газохроматографическое измерение концентрации бензотриазола

1. Характеристика метода

     
     Определение основано на использовании газожидкостной хроматографии на приборе с пламенно-ионизационным детектором.
     
     Отбор проб проводится с концентрированием на фильтр и в этиловый спирт.
     
     Предел измерения - 1,5 мкг в хроматографируемом объеме раствора.
     
     Предел измерения в воздухе - 2,5 мг/м (при отборе 50 л воздуха).
     
     Диапазон измеряемых концентраций в воздухе от 2,5 до 30 мг/м.
     
     Определению не мешают этилцеллозольв, морфолин, этиленгликоль, пропиленгликоль, диэтиленгликоль, дипропиленгликоль, моноэтиловый эфир триэтиленгликоля, триэтиленгликоль.
     
     Граница суммарной погрешности измерения не превышает ±25%.
     
     Предельно допустимая концентрация бензотриазола в воздухе - 5 мг/м.
     
     

2. Реактивы, растворы и материалы

     
     Бензотриазол, ТУ 6-09-1291-75.
     
     Ацетон, ГОСТ 2603-79, чда.
     
     Этиловый спирт, технический, ректификованный, ГОСТ 18300-72, хч.
     
     Хроматон N-А или N-Super (фракция 0,25-0,315 мм) фирмы "CHEМAPOL", ЧССР.
     
     Неподвижная фаза ОУ-1 фирмы "CHЕМАPOL", ЧССР.
     
     Хлороформ технический, ГОСТ 20015-73.
     
     Газообразные азот, ГОСТ 9293-74; водород, ГОСТ 3022-70, и воздух, ГОСТ 11882-73, в баллонах с редукторами.
     
     Фильтры АФА-ХА-20.
     
     Основной стандартный раствор бензотриазола с концентрацией 5 мг/мл готовят растворением навески 0,5000 г в ацетоне в мерной колбе вместимостью 100 мл.
     
     Стандартные растворы с концентрацией бензотриазола 0,25; 0,5; 1,0; 2,0; 3,0 мг/мл готовят соответствующим разбавлением основного раствора ацетоном.
     
     Растворы сохраняются в колбах с притертыми пробками в течение 10 дней при условии, если объем растворов в колбах составляет не менее 80% от общего их объема.
     
     

3. Приборы и посуда

     
     Хроматограф с пламенно-ионизационным детектором (с подогревом).
     
     Колонка хроматографическая стеклянная, длиной 1 м и диаметром 3 мм.
     
     Аспирационное устройство.
     
     Поглотительные приборы Рыхтера.
     
     Фильтродержатели.
     
     Роторный испаритель, ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.
     
     Колба для упаривания, грушевидная, ГОСТ 10394-72, вместимостью 100 мл.
     
     Колба коническая, ГОСТ 10394-72, вместимостью 250 мл.
     
     Дефлегматор елочный 100 ТС, ГОСТ 10789-75, с длиной накола 100 мм.
     
     Конусная пробирка с делениями, ГОСТ 10515-75.
     
     Фарфоровая чашка, ГОСТ 9147-73, вместимостью 300 мл.
     
     Баня водяная, ТУ 64 1-423-72.
     
     Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, вместимостью 100 мл.
     
     Пипетки, ГОСТ 20292-74, вместимостью 1, 2, 5, 10 мл.
     
     Насос вакуумный типа ВН-461.
     
     Микрошприц МШ-10, ГОСТ 8043-74.
     
     Линейка измерительная, ГОСТ 427-75.
     
     Лупа измерительная, ГОСТ 8309-75.
     
     Секундомер, ГОСТ 5072-79.
     
     

4. Проведение измерения

Условия отбора проб воздуха

     
     Для определения аэрозоля бензотриазола воздух аспирируют со скоростью 5 л/мин через фильтр, помещенный в фильтродержатель.
     
     Для определения паров бензотриазола воздух со скоростью 2,5 л/минуту аспирируют через систему, состоящую из фильтра и соединенных с ним последовательно двух поглотительных приборов, содержащих по 8 мл этилового спирта. Поглотительные приборы во время отбора пробы помещают в охлаждающую смесь измельченного льда с хлоридом натрия или калия. Анализируют лишь содержимое поглотительных приборов.
     
     Для определения 0,5 ПДК бензотриазола необходимо отобрать 50 л воздуха. Пробы устойчивы в течение 3 дней.
     

Условия анализа

     
     Приготовление насадки для хроматографической колонки. Навеску ОУ-1, составляющую 3% от веса хроматона, растворяют в 100 мл хлороформа в конической колбе вместимостью 250 мл. В эту же колбу помещают взвешенный на технических весах хроматон (примерно 30 см). Смесь взбалтывают и дают постоять 2 часа. Затем содержимое колбы переносят в фарфоровую чашку и отгоняют хлороформ на кипящей водяной бане при непрерывном помешивании смеси стеклянным шпателем до получения сыпучей массы. Сорбент окончательно сушат в сушильном шкафу при температуре 110 °С в течение 3-х часов.
     
     Приготовленным сорбентом заполняют две стеклянные колонки с помощью вакуума и постукивания по стенкам колонок деревянной палочкой. Сорбент в колонках с обеих сторон закрепляют тампонами из стекловолокна.
     
     Колонки кондиционируют в термостате хроматографа в токе азота с расходом его на одну колонку 2 л/час в течение 16 часов, постепенно повышая температуру от 150 до 210 °С. Продувают колонки в токе азота при температуре 210 °С еще в течение 6 часов.
     
     При определении содержания аэрозоля бензотриазола фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан, заливают его 10 мл ацетона и выдерживают в течение 5-10 минут при перемешивании, после чего ацетон переносят в грушевидную колбу с дефлегматором. Операцию элюирования бензотриазола с фильтра повторяют дважды. Экстракты объединяют. Ацетон отгоняют на водяной бане обычным способом или с помощью ротационного вакуумного испарителя до объема 2-3 мл, затем раствор количественно переносят в мерную коническую пробирку, обмывая стенки колбы небольшим количеством ацетона, и упаривают до объема 0,5 мл. Для обеспечения равномерного кипения ацетона в колбу и пробирку вносят крупинку фарфоровой крошки. После охлаждения раствора 6 мкл пробы вводят в хроматограф через самоуплотняющуюся мембрану испарителя.
     
     При определении паров бензотриазола содержимое поглотительных приборов переносят в грушевидную колбу, обмывают стенки поглотительных приборов этанолом (дважды по 5 мл), смывы присоединяют к содержимому грушевидной колбы и выпаривают растворитель на кипящей водяной бане практически досуха. Внутренние стенки дефлегматора и колбы обмывают ацетоном, порциями по 2 мл, количественно переносят в мерную пробирку, упаривают до объема 0,5 мл и хроматографируют аликвотную часть раствора - 6 мкл.
     

     Для количественного определения используют метод абсолютной калибровки. Для этого в хроматограф вводят по 6 мкл каждого стандартного раствора, что соответствует содержанию бензотриазола 1,5; 3,0; 6,0; 12,0; 18,0 мкг. На основании полученных данных строят градуировочный график зависимости площади пика от количества бензотриазола из 5 параллельных определений. Площадь пика () вычисляют как произведение высоты пика () на полусумму ширины () на расстоянии 0,85 и 0,15 от высоты пика:
     

 мм.

     
     Концентрацию бензотриазола в воздухе () вычисляют по формуле:
     

 мг/м,

     
где  - количество бензотриазола, найденное в хроматографируемом объеме раствора пробы, мкг;
     
      - общий объем раствора пробы, мл;
     
      - объем пробы, взятый для анализа, мл;
     
      - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к температуре 20 °С и давлению 760 мм рт.ст. (приложение 1), л.
     
     

Метод Б. Измерение концентраций бензотриазола методом
тонкослойной хроматографии

1. Характеристика метода

     
     Определение основано на хроматографировании бензотриазола в тонком слое силикагеля на пластинах "Силуфол" в системе этилацетат-гексан (2:1) и проявлении хроматограмм реактивным раствором бромфенолового синего или диазот.....*ированного п-нитроанилина в щелочной среде.
_______________
     * Брак оригинала. - Примечание .     
     
     Отбор проб проводится с концентрированием на фильтр и в этиловый спирт.
     
     Предел измерения - 1 мкг в анализируемом объеме раствора.
     
     Предел измерения в воздухе - 0,7 мг/м (при отборе 15 л воздуха).
     
     Диапазон измеряемых концентраций в воздухе от 0,7 до 20 мг/м.
     
     Определению не мешает исходный продукт синтеза бензотриазола - о-фенилендиамин и ингибитор ВНХ-5.
     
     Граница суммарной погрешности измерения не превышает ±25%.
     
     Предельно допустимая концентрация бензотриазола в воздухе - 5 мг/м.
     
     

2. Реактивы, растворы и материалы

     
     Бензотриазол, ТУ 6-09-1291-75.
     
     н-Гексан, ТУ 6-09-3375-73, хч.
     
     Этилацетат, МРТУ 6-09-5515-70.
     
     Эфир диэтиловый, ГОСТ 6265-74.
     
     Ацетон, ГОСТ 2603-79, хч.
     
     Бромфеноловый синий, ТУ 6-09-1058-75.
     
     Натрия гидроокись, ГОСТ 4328-77, 10%-ный раствор.
     
     Серебро азотнокислое, ГОСТ 1277-75, чда, 0,5% водно-ацетоновый раствор (1 часть воды и 3 части ацетона).
     
     п-Нитроанилин, ТУ 6-09-258-70, 0,1%-ный раствор в 1 М растворе соляной кислоты.
     
     Кислота соляная, ГОСТ 3118-77, хч, 1 M раствор.
     
     Натрий азотистокислый, ГОСТ 4197-74, хч, 0,5% раствор.
     
     Подвижная база: н-гексан - этилацетат (1:2).
     
     Проявляющий реактив N 1: 0,05 г бромфенолового синего растворяют в мерной колбе вместимостью 100 мл в 1 мл ацетона и доводят раствор до метки раствором азотнокислого серебра. Хранят в темном месте до 30 дней.
     
     Проявляющий реактив N 2: готовят перед употреблением, смешивая 10 мл раствора п-нитроанилина с 1 мл раствора натрия азотистокислого. Реактив готовят на холоду.
     
     Пластинки для тонкослойной хроматографии типа "Силуфол" (ЧССР).
     
     Фильтры АФА-ХА-18.
     
     Основной стандартный раствор бензотриазола с концентрацией 1 мг/мл готовят растворением 100 мг вещества в диэтиловом эфире в мерной колбе вместимостью 100 мл. Раствор устойчив при +4 °С в течение 10 суток.
     
     Стандартный раствор бензотриазола с концентрацией 100 мкг/мл готовят разведением основного стандартного раствора диэтиловым эфиром. Раствор устойчив не более 5 суток.
     
     

3. Приборы и посуда

     
     Аспирационное устройство.
     
     Денситометр БИАН-170.
     
     Фильтродержатели.
     
     Баня водяная, ТУ 46-22-603-75.
     
     Камера хроматографическая, ГОСТ 10565-63.
     
     Роторный испаритель ИР-1М, ТУ-25-11-917-74.
     
     Пульверизаторы стеклянные.
     
     Колба грушевидная, ГОСТ 10394-72, вместимостью 100 мл.
     
     Микропипетки, ГОСТ 20292-74, вместимостью 0,1 мл.
     
     Шприцы медицинские, вместимостью 1 мл.
     
     Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, вместимостью 100 мл.
     
     Пипетки, ГОСТ 20292-75, вместимостью 1, 5, 10 мл.
     
     Пробирки градуированные с пришлифованными пробками, ГОСТ 10515-75, вместимостью 10 мл.
     
     Воронки стеклянные для фильтрования, ГОСТ 8613-76, диаметром 30 мм.
     
     

4. Проведение измерения

Условия отбора проб воздуха

     
     Отбор проб проводят, как описано в методе А. Скорость аспирации воздуха через поглотительные приборы составляет 1 л/мин.
     
     Для определения 0,5 ПДК необходимо отобрать 15 л воздуха.
     

Условия анализа

     
     Защитный фильтр, установленный перед поглотительными приборами, анализу не подлежит.
     
     Содержимое поглотительных приборов количественно переносят в грушевидную колбу и выпаривают этанол на кипящей водяной бане или с помощью вакуум-испарителя практически досуха.
     
     Фильтр с пробой воздуха помещают в пробирку с притертой пробкой и заливают 10 мл диэтилового эфира на 2 часа. Растворитель сливают в ту же грушевидную колбу, фильтр обрабатывают 2 раза по 5-7 мл эфира, присоединяя смывы к содержимому колбы. Отгоняют эфир при температуре 40 °С до объема раствора 4-5 мл. Раствор количественно переносят в мерную пробирку, смывая дефлегматор и стенки колбы порциями эфира по 2 мл и присоединяя смывы к раствору в пробирке. Концентрируют раствор до объема 5 мл. 0,5 мл полученного раствора отбирают в другую пробирку, упаривают до объема 0,1 мл и количественно наносят его на хроматографическую пластинку с помощью микропипетки или медицинского шприца. Рядом наносят стандартный раствор бензотриазола в количестве 0,01; 0,02; 0,04; 0,06; 0,1 мл, что соответствует 1, 2, 4, 6, 10 мкг. Хроматографирование производят в системе растворителей этилацетат-гексан (2:1), после чего пластинку извлекают из хpoматографической камеры и сушат при комнатной температуре до полного удаления следов растворителей. Хроматограммы проявляют реактивом N 1 или реактивом N 2 и 10%-ным раствором гидроксида натрия. Бензотриазол проявляется в виде желтого пятна на голубом фоне (реактив N 1) или розово-фиолетового пятна (реактив N 2) с величиной =0,55±0,02.
     
     Хроматограмма устойчива в течение 20 суток (проявляющий реактив N 1). Зависимость величины площади пятна от концентрации соблюдается в интервале концентраций от 1 до 30 мкг.
     
     Содержание бензотриазола определяют с помощью денситометра БИАН-170. Для этого после проявления хроматограммы снимают денситограмму пробы и измеряют площадь пика. Содержание бензотриазола определяют по градуировочному графику, для построения которого снимают денситограммы стандартов в интервале содержаний 1-10 мкг или 10-30 мкг. Измеряют площади пиков и строят градуировочный график. В случае отсутствия денситометра оценку количества бензотриазола на хроматограмме проводят по площади пятен, которую измеряют с помощью промасленной миллиметровой бумаги или планиметра.
     
     Концентрацию бензотриазола в воздухе () вычисляют по формуле:
     

 мг/м,

     
где  - содержание бензотриазола на хроматограмме стандарта, мкг;
     
      - площадь пятна бензотриазола на хроматограмме пробы, мм;
     
      - площадь пятна бензотриазола на хроматограмме стандарта, мм;
     
      - общий объем раствора пробы, мл;
     
      - объем пробы, взятый для анализа, мл;
     
      - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к температуре 20 °С и давлению 760 мм рт.ст. по формуле (приложение 1), л.
     
     
     
Текст документа сверен по:
Методические указания по измерению концентраций
вредных веществ в воздухе рабочей зоны. Вып.XXI
/ Министерство здравоохранения СССР. - М., 1986