МУК 4.1.1616-03

     

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение массовых концентраций
(2S,5R,6R)-6-[[(R)-амино-(4-гидроксифенил)ацетил]амино]-3,3-диметил-7-
оксо-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоновой кислоты тригидрата
(амоксициллина тригидрата) в воздухе рабочей зоны
методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

     
     
Дата введения: с момента утверждения

     
     
     УТВЕРЖДЕНЫ Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации Г.Г.Онищенко 29 июня 2003 г.
     
     

1. Область применения
 

2. Характеристика вещества

     
     2.1. Структурная формула          
     

                   
     2.2. Эмпирическая формула СНNОS.
     
     2.3. Молекулярная масса 419,4.
     
     2.4. Регистрационный номер САS 61336-70-7.
     
     2.5. Физико-химические свойства.
     
     Амоксициллина тригидрат - антибиотик широкого спектра действия из группы полусинтетических пенициллинов, кристаллический порошок белого цвета, 160-180 °С, малорастворим в воде и этиловом спирте, практически не растворим в эфире и жировых маслах, растворим в разбавленных кислотах и разбавленных гидроксидах щелочных металлов, растворим в смеси ацетонитрила и воды при рН 5 (элюенте).
     
     Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль.
     
     2.6. Токсикологическая характеристика.
     
     Амоксициллина тригидрат обладает антимикробным и слабым аллергенным свойствами.
     
     Предельно допустимая концентрация (ПДК) в воздухе рабочей зоны - 0,1 мг/м. Класс опасности - второй.
     
     

3. Погрешность измерений

     
     Методика обеспечивает выполнение измерений массовых концентраций амоксициллина тригидрата с погрешностью не более ±23% при доверительной вероятности 0,95.
     
     

4. Метод измерений

     
     Измерения массовых концентраций амоксициллина тригидрата основаны на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением спектрофотометрического детектора.
     
     Отбор проб проводится с концентрированием на фильтр.
     
     Нижний предел измерения содержания амоксициллина тригидрата в хроматографируемом объеме раствора - 0,010 мкг.
     
     Нижний предел измерения концентрации амоксициллина тригидрата в воздухе - 0,05 мг/м (при отборе 400 дм воздуха).
     
     Определению не мешают сопутствующие вещества (целлюлоза микрокристаллическая, титана диоксид, поливинилпирролидон низкомолекулярный, магний стеариново-кислый, оксипропилцеллюлоза).
     
     

5. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы

     
5.1. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы

5.2. Реактивы

     
     Допускается применение иных средств измерения, вспомогательных устройств, реактивов и материалов, обеспечивающих показатели точности, установленные для данных методических указаний.
     
     

6. Требования безопасности

     
     6.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работы с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.005-88.
     
     6.2. При проведении анализов горючих и вредных веществ соблюдают меры противипожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-76.
     
     6.3. При выполнении измерений с использованием хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.
     
     

7. Требования к квалификации оператора

     
     К выполнению измерений и обработке результатов допускаются лица с высшим и средним специальным образованием, имеющие навыки работы на жидкостном хроматографе.
     
     

8. Условия измерений

     
     8.1. Приготовление растворов и подготовку проб к анализу проводят в нормальных условиях при температуре воздуха (20±5) °С, атмосферном давлении 84-106 кПа и влажности воздуха не более 80%.
     
     8.2. Измерения на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.
     
     

9. Подготовка к выполнению измерения

     
9.1. Приготовление растворов

     
     9.1.1. Стандартный раствор N 1 амоксициллина тригидрата в растворе элюента концентрацией 400 мкг/см готовится растворением 20 мг вещества в мерной колбе вместимостью 50 см.
     
     9.1.2. Стандартный раствор N 2 амоксициллина тригидрата в растворе элюента концентрацией 40 мкг/см готовится разбавлением стандартного раствора N 1. Растворы устойчивы в течение месяца при хранении в холодильнике.
     
     9.1.3. Раствор дигидрофосфата калия концентрацией 0,05 М готовят растворением 1,36 г указанной соли в 200 см дистиллированной воды в колбе данного объема.
     
     9.1.4. Раствор элюента готовят смешением в мерной колбе на 100 см 95 см 0,05 М раствора дигидрофосфата калия и 5 см ацетонитрила, который прибавляют пипеткой. Раствор доводят до рН 5 ортофосфорной кислотой. Непосредственно перед измерением раствор фильтруют с помощью устройства для фильтрации и фильтров "Владипор" и дегазируют под вакуумом.
     

9.2. Подготовка прибора

     
     Общую подготовку прибора осуществляют согласно инструкции по эксплуатации.
     

9.3. Установление градуировочной характеристики

     
     Градуировочную характеристику, выражающую зависимость величины хроматографического сигнала от массы анализируемого вещества в хроматографируемом объеме раствора, устанавливают по методу абсолютной калибровки с использованием серии градуировочных растворов, которые готовят разбавлением стандартного раствора N 2 в пробирках с пришлифованными пробками согласно табл.1. Растворы устойчивы в течение недели при хранении в холодильнике.
     
     

Таблица 1

     
Растворы для установления градуировочной характеристики при определении
амоксициллина тригидрата

     
     
     Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:
     
     состав элюента - ацетонитрил-0,05 М дигидрофосфата калия, 5:95, рН 5;
     
     скорость потока элюента 100 мм/мин;
     
     объем вводимой пробы 5 мм;
     
     длина волны спектрофотометрического детектора 254 нм;
     
     время удерживания амоксициллина тригидрата 3 мин.
     
     Растворы помещают в пробоотборное устройство хроматографа.
     
     На полученной хроматограмме измеряют площади пиков с помощью интегратора хроматографа (в условных единицах) при анализе 6 растворов разных концентраций и растворителя, проводя не менее 5 параллельных определений для каждого раствора, и строят градуировочную кривую зависимости площади пика от количества компонента в хроматографируемом объеме пробы (мкг). Проверку градуировочного графика проводят при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в месяц.
     

9.4. Отбор пробы воздуха

     
     Воздух с объемным расходом 20 дм/мин аспирируют через фильтр АФА ВП-10. Для измерения ПДК амоксициллина тригидрата достаточно отобрать 400 дм воздуха. Пробы можно хранить в течение трех суток.
     
     

10. Выполнение измерения

     
     Фильтр с отобранной пробой помещают в бюкс с пришлифованной крышкой и приливают пипеткой 5 см раствора элюента. Периодически встряхивая, выдерживают раствор в течение 5 мин и сливают его в пробирку. Аналогичным образом проводят повторную экстракцию с фильтра и объединяют растворы. Степень десорбции с фильтра 94%. Хроматографирование раствора пробы проводят в тех же условиях, что и хроматографирование градуировочных растворов. Количественное определение содержания анализируемого вещества в растворе проводят по предварительно построенному градуировочному графику.
     
     

11. Расчет концентрации

     
     Концентрацию амоксициллина тригидрата (, мг/м) в воздухе вычисляют по формуле:
     

,

     
где  - содержание вещества в анализируемом объеме пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;
     
      - объем пробы, взятый для хроматографирования, см;
     
      - общий объем раствора пробы, см;
     
      - объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, дм (см. прилож.1).
     

12. Оформление результатов анализа

     
     Результат количественного анализа представляют в виде () мг/м, =0,95, где  - характеристика погрешности, .
     
     

13. Контроль погрешности методики

     
     Значения характеристики погрешности, норматива оперативного контроля точности и норматива оперативного контроля воспроизводимости приведены в табл.2 в виде зависимости от значения массовой концентрации анализируемого компонента в пробе .
     
     

Таблица 2

     
Результаты метрологической аттестации методики количественного химического анализа

     
     
13.2. Оперативный контроль воспроизводимости

     
     Оперативный контроль воспроизводимости выполняют в одной серии с анализом рабочих проб. Отбирают реальные пробы воздуха рабочей зоны из одного традиционного места отбора двумя пробоотборниками одновременно. Анализируют в соответствии с прописью методики, максимально варьируя условия проведения анализа: партии реактивов, наборы мерной посуды и т.д., и получают два результата  и  анализов. Результаты анализа не должны отличаться друг от друга на величину большую, чем норматив оперативного контроля воспроизводимости :     

     
     При превышении расхождения между двумя результатами норматива оперативного контроля воспроизводимости эксперимент повторяют. При повторном превышении указанного норматива выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и устраняют их.
     

13.3. Оперативный контроль точности

     
     Оперативный контроль точности выполняют в одной серии с анализом рабочих проб. Отбирают реальные пробы воздуха рабочей зоны из одного традиционного места отбора двумя пробоотборниками одновременно. Затем к одной пробе, отобранной на фильтр, делают добавку анализируемого компонента  из раствора, нанося его на фильтр. Величина добавки должна соответствовать 50-150% от содержания компонента в пробе. Результаты анализа  без добавки и  с добавкой получают по возможности в одинаковых условиях: одним аналитиком, с одной партией реактивов, с одним набором посуды и т.д. Погрешность процедуры отбора проб контролируют путем поверки используемых пробоотборников. Расчет норматива оперативного контроля погрешности  проводят по характеристике погрешности методики за вычетом характеристики погрешности пробоотборника. Решение об удовлетворительной погрешности принимают при выполнении условия:     

     
     
14. Нормы затрат времени на анализ

     
     Для проведения серии анализов из 6 проб при последовательном отборе проб воздуха требуется 4 ч.
     
     Методические указания разработаны Российским государственным медицинским университетом (Е.Б.Гугля).



Текст документа сверен по:
официальное издание
Измерение концентраций вредных веществ
в воздухе рабочей зоны: Сборник методических
указаний МУК 4.1.1615-4.1.1643-03. - Выпуск 42. -
М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии
Роспотребнадзора, 2006