МУК 4.1.1519-03

     
     
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

     
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
по измерению концентраций s-[2] [(4-Амино-2-метил-5-пиримидинил)
метил[формиламино]-1- [2-(фосфонокси)этил]-1-пропениловый эфир
фенилкарботионовой кислоты (Бенфотиамина) в воздухе рабочей зоны
методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

     
     
Дата введения: с момента утверждения

     
     
     УТВЕРЖДЕНЫ Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г.Онищенко 29 июня 2003 г.
     
     

     Бенфотиамин - белый кристаллический порошок со слабым запахом, с температурой плавления 170 °С (с разложением). Плохо растворим в воде, мало растворим в 95% спирте, растворим в 1% растворе натрия гидроксида ледяной уксусной кислоте, умеренно растворим в метаноле.
     
     В воздухе находится в виде аэрозоля и паров.
     
     Бенфотиамин не обладает местнораздражающим действием на кожу, однако проявляет слабое раздражающее действие на слизистые оболочки глаз.
     
     
     ОБУВ в воздухе рабочей зоны 0,1 мг/м.
     
     

Характеристика метода

     
     Методика основана на применении  высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением УФ-детектора.
     
     Отбор проб проводится с концентрированием на фильтр и в 90% метанол.
     
     Нижний предел измерения в хроматографируемом объеме (10 мкл) - 0,025 мкг.
     
     Нижний предел измерения в воздухе 0,05 мг/м (при отборе 50 л воздуха).
     
     Диапазон измеряемых концентраций вещества в воздухе от 0,05 до 0,6 мг/м.
     
     Определение избирательно на стадиях сушки, просеивания, хранения и фасовки вещества.
     
     Определению не мешают остаточные количества растворителей.
     
     Суммарная погрешность измерения не превышает 20%
          
     Время выполнения измерения, включая отбор проб, 2 часа.
     
     

Приборы, аппаратура, посуда

     
     Жидкостной хроматограф высокого давления " Милихром-1" или другой модели с УФ-детектором.
     
     Хроматографическая колонка размером 64х2 мм, заполненная сорбентом "Силасорб C"
     
     Весы лабораторные ВЛА-200, 2-го кл., ГОСТ 24104-88Е.
     
     Аспирационное устройство, ГОСТ 17.2.6.01-86*
_______________
     * На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 51945-2002. - Примечание изготовителя базы данных.
          
     Фильтродержатели ТУ 95.72.05-77.
     
     Колбы мерные вместимостью 25, 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74Е.
     
     Пипетки вместимостью 1, 2, 5 мл, ГОСТ 29227-91.
     
     Пробирки колориметрические с пришлифованными пробками, вместимостью 10 мл, ГОСТ 25336-82Е.
     
     Поглотительные приборы Рыхтера 7Р, ТУ-25.111.081-75.
     
     Воронки химические диаметром 30 мм, ГОСТ 25336-82Е.
     
     Вакуумная установка или роторный испаритель ИP-1, ТУ 25-11-91774
     
     Секундомер, ГОСТ 5072-97
     
     Линейка измерительная металлическая, ГОСТ 8309-75.
     
     Лупа измерительная ЛИ-3-10X, ГОСТ 8309-75.
     
     рН-метр ЭВ-74
     
     Водяная баня, ТУ 64-1-2850-76
     
     Дистиллятор, ТУ 61-1-721-79.
     

Реактивы, растворы, материалы

     
     Бенфотиамин, ФС 42-2379-85.
     
     Метиловый спирт, ГОСТ 6995-77, 90% раствор.
     
     Ортофосфорная кислота, ГОСТ 6552-80.
     
     Элюент: к 100 мл 90% спирта метилового добавляют около 0,2 мл ортофосфорной кислоты до рН 2,8.
     
     Стандартный раствор N 1 с концентрацией 500 мкг/мл бенфотиамина готовят растворением 0,0500 г вещества в 90% метаноле в мерной колбе вместимостью 100 мл. Раствор устойчив в течение двух недель при хранении в холодильнике.
     
     Стандартный раствор N 2 с концентрацией 20 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 1 90% метанолом. Раствор устойчив в течение двух недель при хранении в холодильнике.
     
     Градуировочные растворы, с концентрацией 0,5-1-2-3-4-6 мкг/мл, готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 2 90% метанолом. Растворы применяют свежеприготовленными.
     
     5 мл градуировочных стандартных растворов, что соответствует 2,5-5-10-15-20-30 мкг бенфотиамина, переносят в грушевидные колбы и упаривают досуха под вакуумом при температуре 50-60 °С. Сухой остаток растворяют в 1,0 мл элюента и хроматографируют.
     
     Фильтр АФА-ХА-10, ТУ 95-743-80
     
     

Отбор пробы воздуха

     
     Воздух с объемным расходом 5 л/мин аспирируют через фильтр АФА-XA-10 и поглотительный сосуд Рыхтера 7Р, содержащий 10 мл 90% метанола. Поглотительный сосуд охлаждают смесью льда с хлористым натрием. Для измерения 1/2ОБУВ следует отобрать 50 л воздуха. Пробы хранят в закрытых сосудах в течение суток в холодильнике.
     
     

Подготовка к измерению

     
     Хроматографическая колонка промышленного изготовления.
     
     Инжектируют в хроматограф от 0,025 до 0,3 мкг бенфотиамина из градуировочных растворов при максимальном объеме вводимой пробы 10 мкл.
     
     Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:
     

     
     На основании полученных хроматограмм строят градуировочный график, выражающий зависимость площади пиков (мм) от количества вещества в хроматографируемом объеме пробы (мкг).
     
     Построение градуировочного графика необходимо проводить не менее чем по 6 точкам, выполняя 5 параллельных измерений для каждого раствора. Проверку градуировочного графика следует проводить при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в месяц.
     
     

Проведение измерения

     
     Фильтр и содержимое поглотительного сосуда помещают в колориметрическую пробирку с пришлифованной пробкой, доводят объем до 10 мл 90% метанолом и оставляют при комнатной температуре на 15 минут, периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения вещества. Затем фильтр тщательно отжимают и удаляют. Степень десорбции вещества с фильтра 96%. Полученный раствор сливают в грушевидную колбу и упаривают досуха под вакуумом при температуре 50-60 °С. Сухой остаток растворяют в 1,0 мл спирта метилового 90%, подкисленного кислотой о-фосфорной до рН 2,8.
     
     Параллельно с анализом проб проводят хроматографирование раствора, полученного обработкой чистого фильтра.
     
     Хроматографирование анализируемого раствора проводят в тех же условиях по отношению к тому же элюенту, что и при построении градуировочного графика.
     
     Количественное содержание бенфотиамина (в мкг) в хроматографируемом объеме проводят по предварительно построенному градуировочному графику.
     
     

Расчет концентрации

     
     Концентрацию бенфотиамина (, мг/м) в воздухе вычисляют по по формуле:
     

,

     
где  - количество вещества в хроматографируемом объеме пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;
     
      - хроматографируемый объем пробы, взятый для анализа, мл;
     
      - общий объем раствора пробы, мл;
     
      - объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, л (Приложение 1).
     
     Методические указания разработаны ВНЦ БАВ, г.Москва